توثيق خط الخلايا البشرية (التكرار الترادفي القصير (STR))
نظراً لانتشار حالات التلوث المتبادل وسوء تحديد الهوية، تُعدّ أصالة الخلايا المستخدمة في مشاريع البحث العلمي مصدر قلق كبير. وتشير التقديرات إلى أن حوالي 15-20% من جميع الأبحاث القائمة على سلالات الخلايا تُجرى باستخدام سلالات خلايا تم تحديد هويتها بشكل خاطئ. ولذلك، فإن تحديد خصائص سلالة الخلايا باستخدام تحليل تتابعات STR أمر بالغ الأهمية لإجراء أبحاث موثوقة وقابلة للتكرار. بالإضافة إلى ذلك، يطالب عدد متزايد من المجلات العلمية بالتحقق من سلالات الخلايا قبل قبول أي مقال.
تشمل خدماتنا
- التحقق من صحة السلالات الخلوية
- المقارنة مع قواعد البيانات عبر الإنترنت
- تقرير تحليل جاهز للنشر
سهلة الاستخدام
- يرجى تنزيل نموذج طلب مصادقة خط الخلايا وإرفاق النسخة المملوءة والمطبوعة مع شحنة العينات الخاصة بك.
- يرجى إرسال العينات إلينا في مظروف مبطن في درجة حرارة الغرفة.
- بالنسبة لـ gDNA، يرجى تزويدنا بـ ≥ 50 ميكرولتر من 50 نانوغرام/ميكرولتر gDNA في تريس أو EDTA (10 مليمولار تريس، 0.1 مليمولار EDTA).
- بالنسبة لكتل الخلايا، يرجى تزويدنا بـ 1.0-5.0 مليون خلية في شكل كتلة خلايا. يرجى غسلها مرتين باستخدام PBS وإعادة تعليقها في 0.5 مل من الإيثانول بنسبة 70-90%.
العلامات
- يتم تصنيف الخلايا البشرية باستخدام نظام PowerPlex من Promega باستخدام 16 علامة STR.
- يتم تصنيف الخلايا الفئرانية باستخدام 18 علامة STR.
- يتم تصنيف خلايا الفئران باستخدام 14 علامة STR وعلامة واحدة خاصة بالجنس.
- يتم تصنيف خلايا الكلاب باستخدام 11 علامة STR.
- يتم تصنيف خلايا الهامستر باستخدام 10 علامات STR.
النتائج
ستحصل على النتائج في غضون أسبوعين عبر البريد الإلكتروني. تتضمن النتائج مقارنة البيانات بقاعدة بيانات Cellosaurus. سيتم تصنيف خط الخلايا على أنه مصدق أو غير مصدق.
التكرارات الترادفية القصيرة (STRs)
يتكون التكرار الترادفي القصير (STR) من نمط DNA مكون من 2-13 قاعدة تتكرر حتى عدة مئات من المرات. يؤدي التباين الفردي في عدد التكرارات في STR إلى اختلافات في طول الأجزاء الناتجة عند استخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يتم تحديد ملامح سلالات الخلايا باستخدام هذه الاختلافات في أطوال الأجزاء في عدة مواقع.
الكشف عن خلطات سلالات الخلايا
من الممكن تحديد تلوث خط خلوي واحد بخط خلوي إضافي واحد أو أكثر حتى نسبة 10% من تكرار الخط الخلوي الملوث. عادةً ما توفر تركيبات الخطوط الخلوية ملامح STR ذات ثلاث قمم أو أكثر لموقع واحد أو عدة مواقع.