خلايا KC
معلومات عامة
| الوصف | KC (Kc167) هو خط خلوي جنيني من ذبابة الفاكهة (Drosophila melanogaster) مستمد من جنين أنثوي في مرحلة الإغلاق الظهري، ومسجل في قاعدة بيانات Cellosaurus تحت الرمز CVCL_Z833. تم إنشاء هذا الخط في الأصل، وقد استُخدم على نطاق واسع في بيولوجيا خلايا ذبابة الفاكهة، والفحوصات الجينية، وعلم الجينوم الوظيفي. تم تخليد خلايا Kc167 باستخدام فيروس SV40، وهي تنمو بشكل شبه ملتصق، مكونةً مجموعة مختلطة من الخلايا الملتصقة والخلايا العائمة بشكل غير محكم. وهي من بين سلالات خلايا ذبابة الفاكهة الأكثر تمييزًا، كما أنها قابلة تمامًا لإسكات الجينات بوساطة RNAi، مما يجعلها نموذجًا أساسيًّا لفحوصات RNAi على نطاق الجينوم في بيولوجيا اللافقاريات. تُستخدم خلايا KC في بيولوجيا خلايا ذبابة الفاكهة، وفحوصات RNAi وCRISPR على نطاق الجينوم، ودراسات مسارات نقل الإشارات (Wnt/Wingless، Hedgehog، Notch، JAK/STAT، Toll/NF-κB)، وأبحاث المناعة الفطرية، والدراسات المقارنة للمسارات المحفوظة تطوريًا. إن جينوم ذبابة الفاكهة الذي تم تسلسله وتوضيحه بالكامل، إلى جانب قواعد البيانات العامة الشاملة لمواد RNAi (مثل DRSC/TRiP)، يجعل خلايا KC قوية بشكل خاص لاكتشافات الجينوم الوظيفي غير المتحيزة. تنطبق تصنيف BSL-2 بسبب إضفاء الخلود بواسطة فيروس SV40. تُزرع خلايا KC في وسط شنايدر الخاص بدروسوفيلا المُضاف إليه 2 مليمول/لتر من الجلوتامين و10% من مصل الدم البقري (FBS). ومن الأهمية بمكان أن تُزرع سلالات خلايا دروسوفيلا عند درجة حرارة 25 درجة مئوية في الهواء المحيط بدون ثاني أكسيد الكربون (وليس عند 37 درجة مئوية / 5% ثاني أكسيد الكربون كما هو الحال بالنسبة لخلايا الثدييات). يتم تمرير الخلايا عن طريق إعادة تعليقها وتخفيفها بلطف (نمو شبه ملتصق). يتم تجديد الوسط أو تخفيف الخلايا كل 2–3 أيام. |
|---|---|
| كائن حي | Drosophila melanogaster (ذبابة الفاكهة) |
| الأنسجة | الجنين |
| المرض | عادي |
| الموقع النقيلي | الجنين (مرحلة إغلاق الظهر) |
| التطبيقات | بيولوجيا خلايا ذبابة الفاكهة (Drosophila)؛ فحوصات RNAi على نطاق الجينوم؛ فحوصات CRISPR؛ نقل الإشارات (Wnt/Wingless، Hedgehog، Notch، JAK/STAT، Toll/NF-κB)؛ المناعة الفطرية؛ الجينوميات الوظيفية لللافقاريات |
| المترادفات | KC، K C |
الخصائص
| العمر | مرحلة إغلاق الظهر |
|---|---|
| الجنس | أنثى |
| علم الصرف | شبه ملتصق، شبيه بالأنسجة الظهارية |
| نوع الخلية | الخلايا الجنينية |
| خصائص النمو | شبه ملتصق |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | KC (رقم الكتالوج لدى Cytion: 300604) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_Z833 |
| حالة الكائنات المعدلة وراثيًا | GMO-S2: يحتوي خط الخلايا هذا من ذبابة الفاكهة (Drosophila) على كاسيت خلود فيروس SV40 مدمج بشكل مستقر. يلزم تطبيق إجراءات الاحتواء من المستوى BSL-2. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى. |
البيانات الجزيئية الحيوية
| القابلية للإصابة بالفيروس | فيروس SV40 المُخلَّد |
|---|
المناولة
| الوسط الثقافي | وسط شنايدر لذبابة الفاكهة + 2 مليمول/لتر من الجلوتامين + 10% من مصل الأجنة البقرية (FBS). |
|---|---|
| المكملات الغذائية | أضف إلى الوسط 2 مليمول/لتر من الجلوتامين و10% من مصل الدم البقري (FBS) |
| كاشف التفكك | غير مطلوب (شبه متكتل؛ يُعاد تعليقه برفق) |
| مضاعفة الوقت | حوالي 24 إلى 48 ساعة |
| الاستزراع الفرعي | قم بسحب المزرعة برفق باستخدام الماصة لإعادة تعليق الخلايا شبه الملتصقة. انقل حجمًا مناسبًا إلى قارورة جديدة وأضف وسط شنايدر طازجًا ومُسخَّن مسبقًا. خفف المحلول حتى تصل الكثافة إلى 5 × 10⁵ إلى 1 × 10⁶ خلية/مل. قم بالتحضين عند درجة حرارة 25 درجة مئوية في الهواء المحيط بدون ثاني أكسيد الكربون. |
| نسبة التقسيم | من 1 إلى 3 |
| كثافة البذر | من 5 × 10⁵ إلى 1 × 10⁶ خلية/مل |
| تجديد السوائل | كل يومين إلى 3 أيام |
| وسيط التجميد | كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد. |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
| أجواء الاحتضان | 25 درجة مئوية، الهواء المحيط (لا حاجة إلى ثاني أكسيد الكربون). |
| شروط الشحن | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| ظروف التخزين | للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل. |
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
اتفاقية نقل المواد
إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.
لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.
يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.