خلايا HT55

HT55 هو خط خلوي لسرطان غدي في المستقيم البشري، تم إنشاؤه من ورم مستقيمي أولي لامرأة قوقازية تبلغ من العمر 54 عامًا. ينمو هذا الخط الخلوي على شكل طبقة أحادية ملتصقة ذات شكل خلوي شبيه بالأنسجة الظهارية، وهو مسجل في قاعدة بيانات Cellosaurus تحت الرمز CVCL_1294. يحمل HT55 طفرات متعددة متغايرة الزيجوت ومتماثلة الزيجوت مسببة لفقدان الوظيفة في جين APC (داء البوليبات الغدية القولونية) المثبط للورم، بما في ذلك p.Gln1131Ter، وp.Gln1303Ter، وp.Arg1463Ser، p.Asn581Tyr، و p.Lys241Ter (جميعها متغايرة الزيجوت)، بالإضافة إلى استبدال متماثل الزيجوت p.Arg213Leu. يجعل هذا الملف الطفري من HT55 نموذجًا ذا صلة بيولوجية لتكوّن سرطان القولون والمستقيم المدفوع بجين APC، مما يعكس خلل تنظيم مسار WNT القياسي الذي يقود غالبية حالات سرطان القولون والمستقيم لدى البشر.

يُستخدم HT55 على نطاق واسع في أبحاث سرطان القولون والمستقيم لدراسة إشارات WNT/β-catenin، ووظيفة APC كمثبط للأورام، وحساسية الأدوية ومقاومتها، والتقييم قبل السريري للعوامل المستهدفة ضد مكونات مسار WNT. هذا السلالة مناسبة للاختبارات الدوائية المختبرية ودراسات الزرع بين الأنواع في نماذج الفئران ذات المناعة الضعيفة، مما يوفر منصة مختبرية متماسكة وسهلة الاستخدام لأبحاث آليات سرطان القولون والمستقيم وأبحاثه التطبيقية. إن وجود طفرات متعددة في اقتطاع جين APC يجعل HT55 ممثلاً للنوع الفرعي من سرطان القولون والمستقيم الذي يتميز باستقرار الميكروساتلايت وعدم استقرار الكروموسومات، والذي غالبًا ما يكون مدفوعًا بفقدان وظيفة جين APC.

يُحفظ HT55 في وسط EMEM (MEM Eagle، بوزن: 2 مليمول/لتر من L-Glutamine، بوزن: 2.2 غرام/لتر من NaHCO₃، بوزن: EBSS؛ رقم المنتج لدى Cytion 820100a) المكمل بـ 10% من مصل الأجنة البقري (FBS) عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في جو مرطب يحتوي على 5% من ثاني أكسيد الكربون (CO₂). تُعاد زراعة الخلايا باستخدام Accutase عندما تصل نسبة التراص إلى حوالي 80–90٪، مع نسبة تقسيم موصى بها تتراوح بين 1:3 و1:5 وكثافة بذر تتراوح بين 1–3 × 10⁴ خلية/سم². يتم تجديد الوسط كل 2–3 أيام. ويبلغ زمن التضاعف حوالي 28 ساعة.