خلايا CHO-EPCAM

‏١٬٩٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 305974

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

الوصف	إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة لخطوط الخلايا مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فيبلغ السعر حوالي 6,250 يورو. إذا كنت تمثل كيانًا تجاريًّا أو لم تكن متأكدًا من الفئة التي تنطبق عليك، يرجى الاتصال بنا. خلايا CHO-EPCAM هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) المُعاد تجميعها، والتي تم هندستها للتعبير بشكل مستقر عن جزيء الالتصاق بالخلايا الظهارية البشرية (EpCAM؛ CD326/TACSTD1)، وهو بروتين سكري عبر الغشاء يُعبَّر عنه على نطاق واسع في الأنسجة الظهارية ويتم تنظيمه بشكل كبير في العديد من أنواع السرطان المشتقة من الخلايا الظهارية. يشارك EpCAM في الالتصاق بين الخلايا، والتكاثر، والتمايز، ومسارات الإشارة المرتبطة بتطور الورم وانتشاره. يتم إنتاج نماذج CHO-EPCAM المستقرة بشكل شائع لتوفير تعبير سطحي محكوم وقابل للتكرار لـ EpCAM لاستخدامه في اختبارات الارتباط والاستهداف والوظائف التي تتضمن الأجسام المضادة العلاجية والعلاجات بالخلايا المناعية المعدلة وراثياً. تُستخدم خلايا CHO-EPCAM على نطاق واسع في طب الأورام والأبحاث التطبيقية لتطوير وتوصيف الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة لـ EpCAM، ومركبات الأجسام المضادة والأدوية، ومحفزات الخلايا التائية ثنائية النوعية، وعلاجات الخلايا CAR-T أو CAR-NK. يعد النموذج مفيدًا بشكل خاص لتقييم تقارب الارتباط الخاص بالمستضد، وشغل المستقبلات، وحركيات الاستيعاب، والسمية الخلوية، وتكوين المشابك المناعية. بالإضافة إلى ذلك، تدعم هذه الخلايا تطوير اختبارات قياس التدفق الخلوي، والفحص عالي الإنتاجية، والتحقق من صحة عوامل التصوير أو المنصات التشخيصية التي تستهدف EpCAM. نظرًا لأن خلايا CHO تظهر خصائص نمو مستقرة وتعبيرًا داخليًا ضئيلًا للعديد من علامات الظهارة البشرية، فإنها توفر خلفية متسقة لدراسات التعبير عن المستضدات المؤتلفة.
كائن حي	الهامستر الصيني
الأنسجة	المبيض

العمر	للبالغين
الجنس	أنثى
نوع الخلية	خلية ظهارية في المبيض
خصائص النمو	الالتصاق/التعليق

اقتباس	CHO-EPCAM (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305974)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	10029
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_D2TL

المستقبلات المعبر عنها	EpCAM (CD326)

الوسط الثقافي	للمزارع الملتصقة: DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a) للمزارع المعلقة وسط نمو CHO A (من InSCREENeX؛ رقم كتالوج InSCREENeX INS-ME-1039)
المكملات الغذائية	للمزارع الملتصقة: إضافة 5٪ FBS إلى الوسط. أضف الجينيتين (G418-Sulfat) للحصول على تركيز نهائي قدره 0.5 مجم/مللتر.
كاشف التفكك	للمزارع الملتصقة: التربسين-إدتا
الاستزراع الفرعي	لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/EDTA بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية لمدة 5-10 دقائق، أو حتى تنفصل الخلايا. راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطاً كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مزرعة جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من _ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد	بعد الذوبان، قم بتقسيم الخلايا بنسبة 1:2 إلى 1:3 في قوارير T25 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق (للمزارع الملتصقة) لمدة 24 ساعة على الأقل.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

خلايا CHO-EPCAM

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA