خلايا CHO-EGFR

‏١٬٩٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 305977

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

الوصف	إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة لخطوط الخلايا مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فيبلغ السعر حوالي 6,250 يورو. إذا كنت تمثل كيانًا تجاريًّا أو لم تكن متأكدًا من الفئة التي تنطبق عليك، يرجى الاتصال بنا. خلايا CHO-EGFR هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) المُعاد تجميعها، والتي تم هندستها للتعبير بشكل مستقر عن مستقبل عامل النمو البشري للبشرة (EGFR/ERBB1/HER1)، وهو مستقبل تيروزين كيناز ينتمي إلى عائلة ErbB. ينظم EGFR العمليات الخلوية الرئيسية بما في ذلك التكاثر، والبقاء، والهجرة، والتمايز من خلال تنشيط مسارات الإشارة النهائية مثل MAPK/ERK، وPI3K/AKT، وJAK/STAT. غالبًا ما يرتبط التعبير الشاذ عن EGFR، أو تضخمه، أو طفراته بأورام صلبة متعددة، بما في ذلك سرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة، وسرطان القولون والمستقيم، والورم الأرومي الدبقي، وسرطان الخلايا الحرشفية في الرأس والرقبة. توفر نماذج CHO-EGFR المستقرة منصة خاضعة للرقابة لدراسة بيولوجيا المستقبلات والاستهداف العلاجي. تُستخدم خلايا CHO-EGFR على نطاق واسع في أبحاث الأورام وتطوير المنتجات البيولوجية لتوصيف الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة لـ EGFR، ومثبطات كيناز التيروزين، والأجسام المضادة ثنائية النوع، ومركبات الأجسام المضادة والأدوية، والعلاجات بالخلايا المناعية المعدلة وراثيًا. تدعم هذه الخلايا التقييم الكمي لارتباط الليجند، وتنشيط المستقبلات، والاستيعاب، وحالة الفسفرة، والإشارات النهائية، والحصار العلاجي. كما أنها تُستخدم بشكل شائع في اختبارات قياس التدفق الخلوي، ودراسات شغل المستقبلات، والفحص عالي الإنتاجية، وسير عمل اختبارات الفعالية. ونظرًا لأن خلايا CHO توفر خصائص نمو قوية وتعبيرًا داخليًا منخفضًا نسبيًا لأنظمة المستقبلات البشرية، فإنها توفر خلفية قابلة للتكرار لتعبير EGFR المُعاد تجميعه وتطوير الاختبارات المعيارية.
كائن حي	الهامستر الصيني
الأنسجة	المبيض

العمر	للبالغين
الجنس	أنثى
نوع الخلية	خلية ظهارية في المبيض
خصائص النمو	الالتصاق/التعليق

اقتباس	CHO-EGFR (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305977)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	10029

الوسط الثقافي	للمزارع الملتصقة: DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a) للمزارع المعلقة وسط نمو CHO A (من InSCREENeX؛ رقم كتالوج InSCREENeX INS-ME-1039)
المكملات الغذائية	للمزارع الملتصقة: إضافة 5٪ FBS إلى الوسط. أضف الجينيتين (G418-Sulfat) للحصول على تركيز نهائي قدره 0.5 مجم/مللتر.
كاشف التفكك	للمزارع الملتصقة: التربسين-إدتا
الاستزراع الفرعي	لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/EDTA بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية لمدة 5-10 دقائق، أو حتى تنفصل الخلايا. راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطاً كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مزرعة جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من _ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد	بعد الذوبان، قم بتقسيم الخلايا بنسبة 1:2 إلى 1:3 في قوارير T25 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق (للمزارع الملتصقة) لمدة 24 ساعة على الأقل.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

خلايا CHO-EGFR

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA