SK-OV-3 卵巢癌细胞的耐药机制

化疗耐药性仍然是晚期卵巢癌成功治疗的主要障碍，尽管最初的治疗效果不错，但大多数患者最终还是会对铂类药物产生耐药性。在 Cytion，我们深知阐明这种耐药性的分子机制对于制定克服治疗失败的策略至关重要。SK-OV-3 细胞具有内在的铂类耐药表型，是研究化疗耐药机制和确定恢复药物敏感性的治疗方法的主要模型。

主要启示

SK-OV-3 细胞表现出涉及药物外流、DNA 修复和凋亡逃避的多因素化疗耐药性
ABC 转运体的过表达能积极清除细胞中的化疗药物
DNA 损伤修复能力的增强可使细胞在受到基因毒性损伤后存活下来
通过PI3K/AKT和NF-κB通路发出的促生存信号可促进化疗生存
针对耐药机制的联合策略可恢复药物敏感性

SK-OV-3 耐铂的分子基础

SK-OV-3 细胞对治疗卵巢癌的基础化疗药物顺铂和卡铂表现出内在耐药性。这种耐药性表型是由多种因素造成的，包括药物转运、DNA 损伤反应和细胞死亡信号通路的同时改变。

我们的SK-OV-3 细胞（300342）对顺铂的 IC50 值比对铂敏感的卵巢癌株高出约 5-10 倍，为研究耐药机制和筛选增敏药物提供了一个强大的模型。

SK-OV-3 细胞中功能性 p53 的缺失消除了 DNA 损伤诱导细胞凋亡的关键介质。没有 p53 依赖的细胞周期停滞和死亡信号传导，细胞就能存活下来并继续增殖，尽管铂类药物会造成 DNA 损伤。这种 p53 缺失状态也会影响对许多其他治疗药物的反应，在解读药物反应数据时应加以考虑。

药物外流和减少蓄积

ATP结合盒（ABC）转运体能主动将化疗药物从细胞中排出，使细胞内药物浓度降至细胞毒性阈值以下。SK-OV-3细胞表达多种ABC转运体，这些转运体导致了细胞的耐药表型。

P-糖蛋白（P-gp，MDR1，ABCB1）是典型的药物外排泵，可转运包括类固醇和蒽环类在内的多种底物。虽然铂类药物不是典型的 P-gp 底物，但包括 MRP2（ABCC2）在内的其他耐药性相关转运体也能转运铂-谷胱甘肽共轭物。

使用荧光底物或放射性标记化合物进行的药物蓄积试验可量化外流对细胞内药物水平的影响。使用钙黄绿素-AM 或罗丹明 123 的流式细胞术可提供 P-gp 活性的功能读数。原子吸收光谱法测得的铂积累减少与耐药性严重程度相关。

ABC 转运体抑制剂可以通过阻止药物外流来恢复药物的敏感性。维拉帕米和环孢素 A 等第一代抑制剂已证明了这一概念，而特异性更强、毒性更低的新药仍在临床应用开发中。

增强 DNA 损伤修复能力

铂类药物主要通过形成 DNA 加合物来阻碍复制和转录，从而产生细胞毒性。识别和修复这些损伤的能力增强的细胞可以在化疗中存活下来，而对于修复能力不足的细胞来说，化疗将是致命的。

核苷酸切除修复（NER）可清除包括铂-DNA 交联在内的大量 DNA 加合物。ERCC1是NER的重要组成部分，它在SK-OV-3细胞中的表达量升高，并与铂抗性相关。敲除 ERCC1 可使耐药细胞对铂治疗敏感，从而验证了这一机制。

同源重组（HR）修复处理 DNA 双链断裂和链间交联。与缺乏同源重组功能的 BRCA 突变卵巢癌不同，SK-OV-3 细胞保持着完整的同源重组能力，能够修复铂金诱导的损伤。这种 HR 能力在导致抗药性的同时，还可以利用 PARP 抑制剂进行治疗，在 HR 缺乏的情况下产生合成致死率。

包括γH2AX（磷酸化 H2AX）在内的 DNA 损伤反应标记可提供损伤诱导和修复动力学的读数。SK-OV-3细胞在铂处理后显示出γH2AX病灶的快速消解，这反映了它们高效的修复能力。

逃避凋亡和促生存信号传导

即使 DNA 损伤累积，癌细胞也必须执行凋亡程序才能死亡。SK-OV-3细胞表现出多种改变，这些改变阻碍了细胞凋亡的执行，使其在细胞受损的情况下仍能存活。

BCL-2家族蛋白调节内在凋亡途径。SK-OV-3 细胞过度表达包括 BCL-2 和 BCL-XL 在内的抗凋亡成员，而促凋亡的纯 BH3 蛋白水平降低。这种不平衡阻止了线粒体外膜通透（MOMP）和细胞色素 c 的释放，从而阻断了 caspase cascade 的激活。

PI3K/AKT 通路为 SK-OV-3 细胞提供了强有力的促生存信号。AKT 的持续激活会使促凋亡蛋白（包括 BAD 和 FOXO 转录因子）磷酸化并失活。PI3K 抑制剂通过缓解这种生存信号，使 SK-OV-3 细胞对化疗敏感。

SK-OV-3 细胞中的 HER2 扩增会驱动 PI3K/AKT 和 MAPK 通路的激活。包括曲妥珠单抗和拉帕替尼在内的HER2靶向疗法在SK-OV-3模型中显示出活性，并在联合疗法中与化疗产生协同作用。

克服耐药性的策略

针对特定耐药机制的合理联合疗法可以恢复 SK-OV-3 细胞的化疗敏感性。确定特定情况下的主要耐药机制有助于选择适当的增敏剂。

包括 venetoclax 和 navitoclax 在内的 BH3 拟效药能直接拮抗抗凋亡 BCL-2 家族蛋白，降低凋亡阈值。在 SK-OV-3 模型中，与铂类或类固醇化疗联合使用可通过执行凋亡产生协同作用。

PI3K/AKT 通路抑制剂可阻断促生存信号传导，增强化疗诱导的细胞凋亡。针对卵巢癌的多种 PI3K 抑制剂正处于临床开发阶段，联合用药策略前景看好。

推荐用于化疗耐药性研究的产品：

SK-OV-3 细胞 (300342)- 铂耐药卵巢癌模型
DMEM 高葡萄糖 (820300a)- 标准培养基
冷冻培养基 CM-ACF (800650)- 低温保存液