SH-SY5Y 细胞 - 神经母细胞瘤研究和 SH-SY5Y 细胞的神经科学意义

SH-SY5Y 细胞系源自人类神经母细胞瘤,被广泛用于医学研究,以调查神经退行性疾病和开发药物。研究人员利用这些细胞的原始未分化形态或将其分化成类似神经元的细胞。

SH-SY5Y 细胞系的一般信息和起源

本节将介绍有关 SH-SY5Y 细胞系的基本信息,包括其起源、定义和细胞结构。我们将讨论其形态和细胞起源等问题。

  • SH-SY5Y是一种人源细胞系,起源于1970年对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞系的亚克隆。
  • SK-N-SH母细胞系是从一名四岁女性神经母细胞瘤患者的骨髓活检中培育出来的。
  • SH-SY5Y 细胞具有肾上腺素能表型,并表达多巴胺能标记,是研究神经退行性疾病、神经发生和脑细胞特征的有用体外模型 [1]。
  • SH-SY5Y细胞生长为具有神经元的有活力神经母细胞团块,具有松散的粘附性。
  • SH-SY5Y 细胞的大小为 12 μm。
  • SH-SY5Y细胞的染色体模数为47,它们具有罕见的1号染色体标记--1q三体,这是由1q片段的一个额外拷贝插入1号染色体长臂引起的。

培养 SH-SY5Y 细胞

在神经生物学研究实验室中,SH-SY5Y 细胞是培养最多的神经母细胞瘤细胞。要使用这些细胞,就必须了解适合培养这些细胞的生长培养基类型、它们的生长特性、最佳播种密度以及正确的冷冻方法。本节将提供有关培养 SH-SY5Y 细胞的基本信息,以帮助您了解这些方面。

培养 SH-SY5Y 细胞的要点

群体倍增时间:SH-SY5Y 细胞的平均群体倍增时间约为 3-4 天。

粘附或悬浮:SH-SY5Y 是松散粘附的细胞。当高密度播种时,它们会成团生长。

播种密度: SH-SY5Y 的最佳播种密度为 1 x 104 个细胞/平方厘米。SH-SY5Y 培养物由粘附细胞和漂浮细胞组成。

生长培养基:DMEM:Ham's F12 培养基,辅以 3.1 g/L 葡萄糖、10% FBS 和 1.6 mM L-谷氨酰胺,是培养 SH-SY5Y 细胞系的理想培养基。

生长条件(温度、二氧化碳):SH-SY5Y 细胞在温度为 37°C 的加湿培养箱中生长,并提供 5% 的二氧化碳。

储存:为保持 SH-SY5Y 细胞的活力,将其储存在温度低于 -150°C 的液氮气相中。

冷冻过程和培养基:使用 CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基冷冻 SH-SY5Y 细胞。在冷冻这种神经母细胞瘤细胞系时,选择温度逐渐下降 1°C 的缓慢冷冻法。

解冻过程:将装有 SH-SY5Y 细胞的冷冻瓶放入 37°C 水浴中。快速搅拌小瓶,直到细胞解冻,只剩下一小块冰。

生物安全等级:SH-SY5Y 细胞可在生物安全 1 级实验室中培养。

中度和高度融合的 SH-SY5Y 细胞。

SH-SY5Y 细胞:优势与局限

优势

  • 分化成神经元:使用特定化合物可将 SH-SY5Y 细胞分化为功能性神经元,提供了比原代神经元更方便的替代品,并避免了使用原代神经元所带来的伦理问题 [2]。
  • 神经退行性疾病的体外模型:包括多巴胺能神经标记在内的分子标记的表达使 SH-SY5Y 细胞适用于研究帕金森氏症等神经退行性疾病。

局限性

  • 细胞周期不同步:SH-SY5Y 细胞培养物的细胞周期不同步,处于未分化状态[3]。
  • 分化状态不明确:SH-SY5Y 细胞的分化状态不明确,从肿瘤性神经母细胞瘤状态到有丝分裂后神经元或神经祖细胞。它们不表达成熟神经元细胞所表达的分子标记[4]。

用于体外神经药理学和药物研发的 SH-SY5Y 细胞

SH-SY5Y 细胞的应用

神经退行性疾病研究:SH-SY5Y细胞可用于研究神经退行性疾病,如阿尔茨海默氏症和帕金森氏症。例如,一项研究用淀粉样β肽1-42处理SH-SY5Y细胞,以建立阿尔茨海默病的体外模型。然后用 pcDNA-17A 和 17A shRNA 转染所建立的细胞系,以研究长非编码 RNA 17A 对阿尔茨海默病样细胞的影响。研究表明,LncRNA-17A 可调节 SH-SY5Y 细胞的凋亡和自噬,从而模拟 AD [5]。

药物开发:SH-SY5Y 细胞可用于筛选和验证药物对神经退行性疾病的治疗效果。例如,2021 年进行的一项研究利用除草剂(百草枯)诱导 SH-SY5Y 细胞产生帕金森氏症,然后利用这些细胞研究黄酮类化合物柚皮苷的治疗潜力。该化合物在细胞模型中对帕金森病介导的神经变性和神经毒性具有保护作用,这表明它具有开发帕金森病治疗方法的潜力[6]。

有关 SH-SY5Y 细胞的研究论文

关于 SH-SY5Y 细胞的研究成果很多。本节将介绍几个重要实例。

有关 SH-SY5Y 细胞的资源:协议、视频等

关于这一著名的神经母细胞瘤细胞系,有多种在线资源可供使用。这些资源可让您了解如何处理和维护 SH-SY5Y 培养物。

细胞培养方案

以下网站文章可帮助您了解培养、冷冻和解冻 SH-SY5Y 细胞的方法。

我们希望这篇文章能提供有关 SH-SY5Y 细胞处理、培养和在研究中使用的有用信息;如果您想研究这种神经母细胞瘤细胞系,请考虑向我们订购。

SH-SY5Y 细胞系:常见问题

参考文献

  1. Carvajal-Oliveros, A., et al.,BE (2)-M17 细胞系的多巴胺能表型优于传统用于帕金森研究的 SH-SY5Y,后者主要是血清素能细胞系。IBRO Neuroscience Reports, 2022.13: p. 543-551.
  2. Kovalevich, J. and D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology.神经元细胞培养:方法与规程》,2013 年:第 9-21 页。
  3. Martin, E.-R., J. Gandawijaya, and A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement.药理学前沿》,2022 年:第 4042 页。
  4. Feles, S., et al., Streamlining culture conditions for the neuroblastoma cell line SH-SY5Y: a prerequisite for functional studies.方法与规程》,2022 年。5(4): p. 58.
  5. Wang, X., M. Zhang, and H. Liu, LncRNA17A regulates autophagy and apoptosis of SH-SY5Y cell line as an in vitro model for Alzheimer's disease.生物科学、生物技术和生物化学,2019.83(4): p. 609-621.
  6. Ahmad, M.H., et al., Naringenin alleviates paraquat-induced dopaminergic neuronal loss in SH-SY5Y cells and a rat model of Parkinson's disease.Neuropharmacology, 2021.201: p. 108831.

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