RBL-2H3 细胞 - RBL-2H3 在过敏反应和免疫学研究中的意义
RBL-2H3细胞系是一种用于免疫学研究的大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞系。它是研究肥大细胞生理、行为和功能的模型系统。这些细胞还被用于研究过敏反应、免疫过程以及药物测试和开发。
本文将深入介绍 RBL-2H3 的起源、一般属性、培养要求和研究应用。
RBL-2H3 细胞：起源和一般特征
在研究中使用嗜碱性粒细胞系之前，您应该了解它的起源和一般特性。本节文章将向您介绍 RBL-2H3 细胞的基本知识。例如，什么是 RBL-2H3 肥大细胞？为什么要使用 RBL-2H3 细胞？大鼠嗜碱性白血病中的RBL-2H3细胞是什么？RBL-2H3 的形态是什么？RBL-2H3 细胞是永生的吗？
- RBL-2H3 是 1978 年美国国家牙科研究所免疫学实验室从 Wistar 大鼠嗜碱性粒细胞中提取的嗜碱性粒细胞白血病细胞。
- RBL-2H3 细胞具有 c-kit 受体酪氨酸激酶和肥大细胞蛋白酶 II（RMCP-II）受体，是一种潜在的肥大细胞模型。因此，尽管它们起源于大鼠的嗜碱性粒细胞，但它们通常被称为肥大细胞[1]。
- 它们在激活时会释放组胺和其他介质，并表达高亲和性 IgE 受体。
- RBL-2H3 细胞呈现成纤维细胞样形态。
RBL-2H3 细胞：培养信息
本节将帮助您了解培养 RBL-2H3 细胞系的一些关键信息。您将了解什么是 RBL-2H3 细胞倍增时间？什么是 RBL-2H3 细胞播种密度？什么是 RBL-2H3 细胞培养方案？什么是 RBL-2H3 细胞系冷冻培养基？
培养 RBL-2H3 细胞的要点
|
种群倍增时间： |
RBL-2H3 肥大细胞的倍增时间约为 50-60 小时。 |
|
粘附或悬浮： |
RBL-2H3 是一种粘附细胞系。 |
|
亚培养比例： |
对于 RBL-2H3 细胞，分割比例保持在 1:2 到 1:4 之间。用不含镁和钙的 1 x PBS 溶液洗涤粘附细胞。加入传代溶液 Accutase，细胞在环境温度下保持 10 分钟，使其从培养容器底部脱离。加入新鲜培养基，离心细胞。将收获的细胞小心地重新悬浮在新鲜培养基中，然后倒入装有生长培养基的新烧瓶中。 |
|
生长培养基： |
用于培养 RBL-2H3 细胞的 EMEM 培养基含有 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺、2.2 g/L NaHCO3 和 EBSS 盐。培养基应每周更换 2 至 3 次。 |
|
生长条件： |
RBL-2H3 细胞在温度为 37 °C 并连接 5%CO2源的加湿培养箱中培养。 |
|
储存： |
细胞储存在液氮气相中或温度低于 -150 °C 的电冰箱中，以长期保护细胞的活力。 |
|
冷冻过程和培养基： |
CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基用于采用缓慢冷冻工艺冷冻 RBL-2H3 细胞。简而言之，这种方法允许温度每分钟下降 1 °C，保护细胞免受冲击。 |
|
解冻过程： |
RBL-2H3 细胞在预设水浴（37 °C）中解冻约 60 秒。然后，将细胞加入新鲜培养基并离心。这一步骤对于去除冷冻培养基成分至关重要。然后，将细胞团重新悬浮在生长培养基中，并将细胞分装到烧瓶中进行培养。 |
|
生物安全等级： |
RBL-2H3 细胞应保存在生物安全 1 级实验室中。 |
RBL-2H3嗜碱性粒细胞系的优势和局限性
RBL-2H3 细胞常用于免疫学研究。本节概述了它们的主要优点和局限性。
优点
- 易于培养：RBL-2H3 细胞易于在实验室环境中培养和维护。这有利于进行成本效益高、可重复的实验，使其成为免疫学初始研究的热门选择。
局限性
- 非人类起源：RBL-2H3 细胞来源于大鼠嗜碱性粒细胞，可能无法准确模拟人类生物过程，这可能会限制其在特定人类研究中的适用性。因此，在将结果推断到人体系统时，必须谨慎解释数据。
- 简化的肥大细胞模型：虽然这些细胞为研究肥大细胞功能提供了一个基本模型，但它们并不能完全代表肥大细胞在人体免疫系统中相互作用的复杂性质。因此，它们可能无法充分模拟肥大细胞在体内免疫反应或疾病中的多方面作用。
RBL-2H3 细胞系：免疫学研究的基石
利用 RBL-2H3 细胞系进行嗜碱性粒细胞和肥大细胞研究
RBL-2H3 细胞系来源于野鼠，是研究嗜碱性粒细胞和肥大细胞生物学的重要模型。这些大鼠肥大细胞提供了有关肥大细胞介质释放的重要信息，对于了解过敏性鼻炎等过敏性疾病至关重要。通过这些细胞，研究人员探索了细胞受体动力学和免疫突触的建立，这是免疫系统对过敏原反应的核心。2019年发表的一项有趣的研究使用了RBL-2H3细胞系，研究了清开灵注射产生假性过敏反应背后的机制。研究发现，PI3K-RAC1 信号级联部分诱发了细胞的这种过敏反应[2]。
过敏研究中的免疫突触动力学
RBL-2H3 细胞在免疫学研究中被广泛使用，尤其适用于研究免疫突触动力学。这有助于阐明免疫系统的交流过程，可用于研究外周血和腹膜肥大细胞。此类研究对于全面了解全身和局部的免疫反应至关重要。
药物筛选和毒性测试
在药物筛选和测试中，可利用 RBL 细胞对各种刺激的反应能力，包括研究H2O2如何抑制 IgE 介导的反应。这些细胞在开发链球菌感染等疾病的治疗方法中发挥着至关重要的作用，因为链球菌中的mitis群会抑制肥大细胞的活化。 除此之外，研究人员还利用这种RBL 2H3 mc模型评估各种物质的毒性作用，包括化学品、药物和纳米颗粒。例如，最近的一项研究（2022 年）评估了聚苯乙烯微塑料对 RBL-2H3 细胞的细胞毒性。他们发现，微塑料会破坏 RBL-2H3 细胞器并促进细胞死亡[3]。2021 年的另一项研究利用 RBL 2H3 小鼠模型评估了天然产品奈非林的抗过敏和抗炎潜力。研究显示，该化合物具有良好的抗过敏和抗炎特性[4]。
先进的免疫学测量方法
RBL-2H3 细胞释放的介质具有一致性和可测量性，因此非常适合方便的荧光测定法，有助于进行对疾病研究和治疗药物评估至关重要的精确测量。
起源于鼠的RBL-2H3 细胞系是免疫学领域基础研究和应用研究的宝贵财富。它为促进我们对免疫疾病的了解和治疗提供了深远的机遇。
用于高级免疫学研究的 RBL-2H3 细胞系
RBL-2H3 细胞研究出版物
以下是一些以 RBL-2H3 肥大细胞为主题的精彩研究出版物：
narirutin 对 RBL-2H3 细胞脱颗粒的抑制活性
该研究论文发表于《免疫药理学与免疫毒理学》（2021 年）。研究提出，天然化合物 narirutin 通过调节 NF-κB、MAPK 和酪氨酸激酶信号通路对 RBL 2H3 细胞脱颗粒产生抑制作用。
芹菜素对 RBL-2H3、RAW264.7 和 HaCaT 细胞的影响：抗过敏、抗炎和皮肤保护活性
国际分子科学杂志》（2020 年）上的这项研究提出，芹菜素化合物能显著抑制 RBL-2H3 和 RAW264.7 细胞的过敏和炎症反应。因此，它可以作为一种潜在的抗免疫相关疾病的药物。
皂苷的抗炎和抗过敏作用及其对 RAW 264.7、RBL-2H3 和 HaCaT 细胞信号通路的影响
这篇发表在《国际分子科学杂志》（International Journal of Molecular Sciences，2021年）上的研究论文利用RBL-2H3等不同细胞系评估了天然产品皂苷的抗过敏和抗炎作用。
用于治疗过敏性疾病的泰国草药 Benchalokawichian 的提取物和一些纯成分对 RBL-2H3 细胞释放β-己糖胺酶的抑制作用
这项基于证据的补充和替代医学（2014年）研究发现，Benchalokawichian提取物和一些活性成分对RBL 2H3ß-己糖胺酶的释放具有潜在的抑制作用。
螺旋藻多肽通过抑制RBL-2H3细胞中Akt和MAPKs的磷酸化抑制肥大细胞脱颗粒作用
这篇论文于2018年发表在《国际生物大分子杂志》（International Journal of Biological Macromolecules）上。研究指出，天然产物螺旋藻（spirulina maxima）可通过阻止MAPKs和AKT磷酸化来抑制RBL 2H3脱颗粒。
RBL-2H3 细胞系的资源：协议、视频及更多
RBL-2H3 是一种广泛使用的肥大细胞系。这里提到了涵盖 RBL-2H3 培养和转染协议的可用资源：
- RBL 2H3 MC 模型： 这篇研究文章包括维持 RBL-2H3 培养和转染 RBL-2H3 的方案。
以下是解释 RBL-2H3 细胞培养方案的一些资源：
- RBL-2H3 细胞： 该网站有助于您了解 RBL-2H3 细胞系的细胞培养方案。此外，它还包含有关 RBL 2H3 细胞培养基和培养条件的信息。
RBL-2H3 细胞系：研究人员必备的常见问题
参考文献
- Passante, E. and N. Frankish,The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell.Inflamm Res, 2009.58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al.，清开灵注射液部分通过 RBL-2H3 细胞的 PI3K-Rac1 信号通路引起的假过敏反应。毒理学研究，2019.8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al.，聚苯乙烯微（纳）塑料损伤RBL-2H3细胞细胞器并促进MOAP-1诱导细胞凋亡。危险材料学报》，2022 年。438: p. 129550.
- Chiu，K.-M.，et al.，anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells.国际分子科学杂志》，2021 年。22(20): p. 10994.