P19 细胞 - 使用 P19 细胞进行胚胎癌研究
P19是一种小鼠胚胎癌细胞系。它广泛应用于生物医学研究，主要用于研究发育生物学、干细胞生物学、细胞分化和药物筛选。由于 P19 细胞具有分化能力，因此可用于研究组织形成和早期胚胎发育等复杂的生物过程。本文将讨论小鼠来源的 P19 细胞的基本原理。
P19 细胞的一般特征和起源
在开始使用细胞系之前，了解其一般特征和起源至关重要。本节将介绍以下内容：什么是 P19 细胞系？P19 细胞的大小是多少？P19 细胞的来源是什么？
- P19 是一种多能胚胎癌细胞，最初是从 C3H/He 小鼠发育的畸胎癌中获得的。该细胞系由麦克伯尼和罗杰斯于 1982 年首次建立。
- P19 细胞可在补充血清的培养基中持续生长。当暴露于无毒药物（如维甲酸和二甲基亚砜（DMSO））时，它们可以分化成其他类型的细胞[1]。
- 这些小鼠癌细胞具有上皮样形态。
- P19 细胞系具有雄性核型（n=40；XY）。
P19 细胞的培养信息
P19 细胞系因其独特的特性而被研究实验室广泛培养。它的培养容易且易于管理。本节将介绍维护和培养 P19 细胞所需的所有关键信息。我们将了解P19 细胞的倍增时间是多少？如何培养 P19 细胞系？P19 是粘附细胞系吗？
培养 P19 细胞的要点
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倍增时间： |
据报道，P19 细胞系的倍增时间约为 2 到 3 天。 |
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粘附或悬浮： |
P19 胚胎癌细胞系是粘附的。 |
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亚培养比例： |
P19 细胞应每 48 小时进行一次分培，分培比例应保持在 1:10。用 1 X 磷酸盐缓冲盐水洗涤粘附的细胞，并与 Accutase 一起培养，直到细胞解离。向细胞中加入培养基，然后离心收获细胞。将收集的细胞仔细重悬并分配到新的烧瓶中。 |
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生长培养基： |
DMEM/Ham's F12 培养基含有 5% 胎牛血清、3.1 g/L 葡萄糖、1.6 mM L-谷氨酰胺、1.0 mM 丙酮酸钠、15 mM HEPES 和 1.2 g/L NaHCO3，用于培养 P19 细胞。 |
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生长条件： |
生长和培养 P19 胚胎癌细胞系必须使用 37°C、5% CO2 的加湿培养箱。 |
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储存： |
冷冻的 P19 细胞瓶应储存在温度低于 -150°C 的冰箱或液氮气相中，以长期保持细胞的活力。 |
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冷冻过程和培养基： |
可使用 CM-1 或 CM-ACF 培养基冷冻 P19 细胞，采用缓慢冷冻法，保护细胞免受任何冲击并保持其活力。 |
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解冻过程： |
冷冻的 P19 细胞可在 37°C 水浴中解冻，方法是快速搅拌小瓶 40 至 60 秒。将细胞加入新鲜培养基并离心以去除冷冻培养基成分。细胞托盘再次悬浮，然后将细胞倒入新烧瓶中进行生长。 |
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生物安全等级： |
P19 细胞系需要 1 级生物安全实验室设置。 |
P19 细胞系：优缺点
本节将讨论 P19 细胞系的优缺点。
优点
- 分化潜力：P19 细胞可分化成各种细胞类型，包括心肌细胞、神经元和小胶质细胞。它们的分化需要无毒药物，如维甲酸和二甲基亚砜（DMSO）。维甲酸能诱导神经元、小胶质细胞和星形胶质细胞的发育，而二甲基亚砜则能启动跳动的心肌细胞和平滑肌细胞的发育。因此，P19 细胞有助于研究细胞分化和发育过程。
- 模型系统：多能胚胎癌细胞系 P19 是研究早期胚胎发育的重要模型。研究人员利用 P19 细胞来阐明细胞信号传导途径以及这些过程所涉及的细胞和分子机制。
缺点
- 鼠源性：P19 是一种小鼠胚胎癌细胞系。因此，使用这些细胞进行的研究结果可能无法完全转化为人类生物学和过程。
P19 细胞的研究应用
P19 细胞具有分化能力，与发育生物学和干细胞研究密切相关，因此有多种研究应用。P19 胚胎癌细胞的一些重要研究应用包括
- 细胞分化研究： 我们知道，P19 细胞可分化为神经元、小胶质细胞、平滑肌细胞和心肌细胞，因此被广泛用于研究细胞分化过程。此外，它还有助于研究神经和心脏发育及其内在机制。2018 年进行的一项研究发现，活性氧（ROS）引导 P19 细胞分化为特定细胞类型，并阻止诱导其他细胞类型[3]。另一项研究探讨了视黄酸介导的神经分化过程，发现PI3K/Akt/GSK3β信号通路参与其中[4]。
- 发育生物学： P19 细胞是研究早期胚胎发育的宝贵模型。它们有助于研究人员了解复杂的生物过程，如胚胎发育过程中的组织形成。这项研究利用 P19 细胞研究了室间隔缺损（VSD）形成的分子因素。研究结果表明，长非编码RNA SNHG6通过负向调节miRNA-101和激活Wnt/β-catenin通路导致了VSD的形成[5]。
- 药物测试： P19 小鼠胚胎癌细胞系也可用于筛选潜在的候选药物。一项研究使用了分化的 P19 细胞神经元，并调查了合成左旋多巴和牡丹籽水提取物对乙酰胆碱酯酶抑制作用的神经保护作用。结果表明，与左旋多巴相比，植物提取物表现出良好的效果 [6]。
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P19 细胞研究出版物
本节将介绍一些以 P19 细胞为主题的有趣研究出版物。
垂体性激素调控胚胎干细胞和畸胎瘤细胞迁移、粘附和增殖的新证据
这篇文章发表于2017年的《肿瘤学报告》（Oncology Reports）。研究提出，垂体性激素能驱动畸胎瘤细胞系的粘附、增殖和迁移，包括P19细胞。
长非编码RNA uc.4 通过 TGF-beta 信号通路影响细胞分化
发表在《实验与分子医学》（Experimental & Molecular Medicine）杂志（2018年）上的这篇论文利用P19细胞，研究了长非编码RNA uc.4的功能。研究结果显示，uc.4通过调节TGF beta信号通路影响细胞分化。
三维细胞培养和天然组织提取物对P19胚胎癌干细胞神经分化的联合影响
该研究文章于2018年发表在《组织工程与再生医学杂志》（Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine）上。研究发现，天然脑组织提取物和三维细胞培养可以加速P19胚胎癌细胞向神经细胞的分化。
Cichorium intybus L. 叶提取物在体外诱导胚胎癌干细胞分化为胰岛素分泌细胞
这项研究于 2020 年发表在《民族药理学杂志》（Journal of Ethnopharmacology）上。该研究提出，Cichorium intybusL. 叶提取物可诱导 P19 胚胎癌细胞分化为胰岛素分泌型胰β细胞。
牡丹籽水提取物与合成左旋多巴相比具有更好的神经保护作用和乙酰胆碱酯酶抑制作用
这项研究发表在《分子》（2022 年）上。本研究探讨了白果牡丹籽提取物对 P19 细胞神经元的神经保护作用和乙酰胆碱酯酶抑制作用。
有关 P19 细胞系的资源：方案、视频等
以下是一些有关 P19 细胞的资源。
- P19 细胞神经元分化方案：本文包含 P19 细胞神经分化方案及其他有关 P19 细胞分化的有用信息。
- P19 细胞转染：该链接将帮助您了解 P19 细胞转染方案。
以下链接包含 P19 细胞培养方案。
- P19 细胞：本网站包含有关 P19 细胞系的所有有用信息，包括其培养条件、P19 细胞培养基、细胞分裂等。
探索 P19 细胞系：常见问题
参考文献
- McBurney，M.W.，P19 胚胎癌细胞。Int J Dev Biol, 1993.37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., et al.,P19 胚胎癌细胞系：研究基因与环境相互作用的模型。细胞培养技术》，2011 年：第 223-240 页。
- Pashkovskaia, N., U. Gey, and G. Rödel,线粒体 ROS direct the differentiation of murine pluripotent P19 cells.干细胞研究》，2018 年。30: p. 180-191.
- Fu, F., et al.,All-trans-retinoid acid induces the differentiation of P19 cells into neurons involved in the PI3K/Akt/GSK3β signaling pathway.细胞生物化学杂志》，2020 年。121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., et al.,Long noncoding RNA SNHG6 contributes to ventricular septal defect formation via negative regulation of miR-101 and activation of Wnt/β-catenin pathway.Die Pharmazie-An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019.74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., et al.,Mucuna pruriens seed aqueous extract improved neuroprotective and acetylcholinesterase inhibitory effects compared to synthetic L-dopa.分子》，2022 年。27(10): p. 3131.