NIH-3T3 细胞:推进成纤维细胞研究和 NIH-3T3 的应用

1962 年,纽约大学医学院的霍华德-格林(Howard Green)和乔治-托达罗(George Todaro)从 17 天大的瑞士白化小鼠胚胎组织中培育出NIH-3T3 细胞系,它已成为生物医学研究的基础资源。NIH-3T3 细胞因其对白血病病毒和肉瘤病毒病灶形成的高度敏感性而被公认为是进行病毒肿瘤学研究、基因表达分析和细胞生长动力学探索等大量科学研究的重要工具。3T3 "的命名反映了细胞培养的方法,表示 "3 天转移 "间隔,初始播种密度为 3 × 10^5 个细胞,突出了这些细胞最初培养和扩增的标准化条件。

NIH-3T3 细胞的多样化形态和应用

NIH-3T3 细胞的标志性特征之一是其形态适应性,这种适应性随培养汇合度的变化而显著不同。在较低密度时,这些成纤维细胞显示出纺锤形的单细胞结构,当细胞群达到汇合时,则演变成密集的漩涡状。NIH-3T3 细胞的平均直径约为 18 μm,是深入研究细胞生物学(从组织修复机制到细胞周期调控的复杂途径)的多功能模型。

NIH-3T3 细胞的高倍和低倍融合度。

培养信息

  • 关键培养细节

    • 人口倍增时间:大约 20 小时。

    • 生长类型:粘附培养。

    • 接种密度:建议:3 到 4 x 10^4 个细胞/厘米^2。

    • 生长培养基:DMEM 或 Ham's F12,添加 5% FBS 和 2.5 mM L-谷氨酰胺。

    • 生长条件:保持在 37 °C、5% CO2 的加湿培养箱中。

    • 储存:保存在温度低于 -195 °C 的液氮气相中。

    • 冷冻方法:使用 CM-1 或 CM-ACF 培养基;采用缓慢冷冻法(温度下降 1°C)。

    • 解冻程序:在 37 ℃ 水浴中快速升温,然后离心去除冷冻培养基,再重新悬浮于生长培养基中。

    • 生物安全等级:培养需要 1 级生物安全设置。

实验室中的瑞士白化鼠。

使用 NIH 3T3 细胞的利与弊

优点

  • 转染效率:NIH-3T3 细胞以转染率高而著称,是瞬时和稳定基因表达研究的绝佳选择,适用于各种转染技术。

  • 饲养层实用性:这些细胞可释放生长因子,促进共培养细胞的生长,因此通常用作与角质形成细胞和干细胞等细胞共培养的支持性饲养层。

  • 干细胞 研究:NIH-3T3 细胞是干细胞研究的首选,它能在不改变基因的情况下诱导多能性,并为干细胞分化提供有利环境。

  • 培养稳定性: NIH-3T3 细胞以其稳定性和低自发转化率而著称。然而,在某些条件下或暴露于特定致癌基因或诱变剂后,NIH-3T3 细胞会发生自发转化。这种转化可导致细胞获得癌变特性,如不受控制的生长、失去接触抑制以及注射到易感宿主体内形成肿瘤的能力。

缺点

  • 细胞大小不一致:NIH-3T3 细胞细长、纺锤形的形态可能会发生变化,从而使实验中的图像分析变得复杂。

  • 易受感染:如果不在严格的无菌条件下保存,这些细胞很容易受到细菌和支原体感染,从而可能影响实验的完整性。

NIH-3T3 细胞的研究应用

  • DNA 转染研究:NIH-3T3 细胞的稳健性使其成为引入和研究各种基因功能的理想选择,在研究 NAB2-STAT6 等蛋白质及其在细胞过程中的作用时就证明了这一点。

  • 基于细胞的检测:它们的可靠性适用于各种检测,包括存活率、细胞凋亡和病灶形成检测,可深入了解细胞在不同实验条件下的反应。

  • 细胞周期研究:该细胞系可通过血清水平直接操纵细胞周期,是研究细胞周期调控及其在疾病中的畸变的有效模型。

利用 NIH-3T3 细胞提升研究水平

重点介绍涉及成纤维细胞系 NIH 3T3 的关键研究

NIH-3T3 细胞系在众多研究项目中发挥了关键作用,涉及细胞生物学的各个方面。以下是一些利用这些细胞进行的重要研究:

  • 探索 NAB2-STAT6 融合蛋白:该研究发表在《生物化学与生物物理研究通讯》(Biochemical and Biophysical Research Communications)上,深入探讨了 NAB2-STAT6 融合蛋白如何影响 NIH-3T3 细胞,特别是其通过 EGR-1 调节增强细胞生长和迁移的作用。
  • 调查 APOBEC3 和鼠白血病病毒:病毒学》杂志上的这项研究探讨了 AKV 小鼠白血病病毒在表达小鼠 APOBEC3 基因的 NIH-3T3 细胞中的超突变。
  • 评估表观遗传药物的抗转移潜力:在《肿瘤靶点与治疗》(Oncotargets and Therapy)中,这项研究评估了水合肼和丙戊酸对 RAS 转化的 NIH-3T3 细胞的抗转移作用。
  • 黄芩素对 NIH-3T3 增殖和胶原合成的影响:这项研究利用 NIH-3T3 细胞,探讨黄芩素如何通过 miR-9/ 胰岛素样生长因子-1 轴调节影响细胞增殖和胶原蛋白的生成。
  • 研究核黄素消耗与肿瘤发生:本研究介绍了 NIH-3T3 细胞中核黄素缺乏如何通过促进细胞增殖和细胞周期基因失调而导致肿瘤发生的发现。

NIH-3T3 细胞研究的重要资源

对于有兴趣使用 NIH-3T3 细胞的研究人员,有多种资源可用于指导培养和实验方案:

  • NIH-3T3 细胞中的球形体形成:该视频详细介绍了球形细胞的形成过程,球形细胞是一种三维细胞培养技术,可将 NIH-3T3 细胞聚集成团,为研究提供更贴近生理的模型。
  • 监测 NIH-3T3 细胞生长:通过 JuLI Br 活细胞成像系统,这段视频捕捉了 NIH-3T3 细胞 65 小时的生长动态,展示了细胞的实时增殖。

这些资源旨在支持您使用 NIH-3T3 细胞进行研究,为成功的实验和发现奠定基础。

有关 NIH-3T3 细胞的常见问题

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