Hep3B 细胞：肝细胞癌研究与发现
HEP3B是一种永生化的人源肝癌细胞系。它广泛应用于肝毒性和药物代谢研究。HEP3B 转染效率高，因此常用于研究肝癌的发生、发展和治疗干预。本文将介绍有关 HEP3B 细胞系的所有必要信息，以帮助您使用该细胞系。主要包括
- HEP3B 细胞的一般特征和起源
- 有关 HEP3B 细胞系的培养信息
- HEP3B 细胞系：优势和局限性
- HEP3B 细胞在研究中的应用
- 有关 HEP3B 细胞系的出版物
- HEP3B 细胞系的资源：协议、视频等
1.HEP3B 细胞的一般特征和来源
您需要了解的细胞系的主要信息是其来源和一般特征。这可以帮助您决定其在研究中的用途，并帮助您处理它。本节文章涵盖有关 HEP3B 起源和特征的所有基本信息。在这里，您将了解到什么是 Hep3B 细胞系？Hep3B 细胞的起源是什么？HEP3B 细胞的形态是什么？
- HEP3B 是一种连续的人类肝癌细胞系，源自一名患有肝细胞癌（HCC）的 8 岁非洲男孩的肝组织。1979年，Aden及其同事在美国费城Wistar研究所Barbara B. Knowles实验室建立了该细胞系[1]。
- HEP3B 细胞的染色体中整合了乙型肝炎病毒（HBV）基因组。
- 这些肝癌细胞呈现上皮形态。
- HEP3B 细胞的染色体模数为 60。与 HepG2 不同的是，它们没有重新排列的 1 号染色体。
HepG2 和 Hep3B 有什么区别？
HepG2 和 HEP3B 的区别在于每个细胞的染色体数不同。HEP3B 含有 60 条染色体，而 HepG2 细胞平均有 55 条染色体。此外，HepG2 不致癌且乙型肝炎阴性，而 HEP3B 致癌且 HBV 阳性。
2.HEP3B 细胞系的培养信息
了解细胞系的培养信息能让您轻松使用细胞系。本节涵盖培养 HEP3B HBV 细胞系的所有要点，包括： 1：Hep3B 细胞的倍增时间是多少？HEP3B 的培养条件是什么？如何培养 HEP3B HCC 细胞？
培养 HEP3B 细胞的要点
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倍增时间： |
HEP3B 细胞的倍增时间约为 36 小时。 |
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粘附或悬浮： |
这种肝癌细胞系是粘附的。 |
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分裂比： |
HEP3B 细胞以 1:2 至 1:4 的比例进行亚培养。用 1 x PBS 冲洗粘附的 HEP3B 细胞，然后用 Accutase 溶解液孵育。8-10 分钟后，加入新鲜培养基，离心细胞。然后小心地将收获的细胞重悬，并按建议的分割比例倒入装有培养基的烧瓶中。 |
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生长培养基： |
用于培养 HEP3B 细胞的 EMEM 培养基含有 10% FBS、2.2 g/L NaHCO3、2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's 平衡盐溶液（EBSS）。 |
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生长条件： |
HEP3B 细胞在 37°C 加湿培养箱中培养，持续供应 5% CO2。 |
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储存： |
冷冻的 HEP3B 细胞储存在温度低于 -150°C 的电冰箱或液氮气相中。 |
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冷冻过程和培养基： |
建议使用 CM-1 或 CM-ACF 作为 HEP3B 细胞的冷冻培养基。细胞冷冻采用慢速冷冻过程，每分钟只允许温度下降 1°C，以保护细胞活力。 |
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解冻过程： |
将冷冻细胞在预设温度为 37°C 的水浴中解冻 40 至 60 秒。然后将这些细胞加入新鲜的生长培养基中，离心去除冷冻培养基成分。收集的细胞重新悬浮并分配到新的烧瓶中进行生长。 |
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生物安全等级： |
HEP3B 细胞培养需要 1 级生物安全实验室。 |
3.HEP3B 细胞系：优势与局限
HEP3B 是一种广泛使用的肝癌细胞系。本节将重点介绍这些肝癌细胞的一些主要优势和局限性。
优势
HEP3B 细胞的主要优点有
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易于培养 |
HEP3B 细胞没有严格的细胞培养要求，因此在研究实验室中易于处理和维护。这简化了实验程序。 |
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转染效率高 |
HEP3B 细胞具有极高的转染效率，因此可广泛应用于基因操作和基因表达相关研究。 |
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致肿瘤性 |
HEP3B 是一种具有致瘤性的肝细胞癌细胞系，注射到免疫功能低下的小鼠体内可形成肿瘤。这有助于利用 HEP3B 异种移植模型研究癌症的进展和发展。 |
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HEP3B P53 状态 |
HEP3B 细胞具有与肝细胞癌（HCC）和其他癌症类似的 P53 基因突变，因此可用于研究 P53 基因突变对癌症生长、发展和恶化的影响。 |
局限性
HEP3B 细胞系的局限性在于
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体外细胞模型 |
HEP3B 细胞系是肝细胞癌（HCC）细胞的体外模型。然而，它可能无法完全代表生物体内 HCC 的复杂性。因此，体外实验结果可能与体内观察到的结果不同。 |
4.HEP3B 细胞在研究中的应用
HEP3B 细胞系在生物医学研究中具有多种研究用途。HEP3B 细胞的一些主要研究应用包括
- 癌症生物学： HEP3B 是一种人类肝细胞癌细胞系。它是研究 HCC 发生和发展的细胞和分子机制的宝贵细胞模型。研究人员利用这些细胞研究与肝癌相关的基因突变、细胞过程和细胞信号通路。如一项利用 HEP3B 细胞的研究发现，microRNA-223-3p 可调控 NLRP3 炎性体成分，抑制 HEP3B 肝癌细胞的增殖并增强其凋亡[2]。
- 药物筛选与开发： HEP3B 细胞系还可用于测试、筛选和开发针对肝癌的新型疗法。此外，它还用于评估不同抗癌药物和疗法的毒性和疗效。研究人员还利用这些肝癌细胞研究药物代谢。研究人员使用 HEP3B 细胞，评估了Cotinus coggygria植物提取物对 HEP3B 肝癌细胞的细胞毒性潜力 [3]。
- 病毒感染： HEP3B 是乙型肝炎病毒阳性细胞系，因此可用于研究可能导致肝癌发生的病毒感染，即 HBV 和 HCV。这有助于更好地了解病毒感染和开发潜在的抗病毒治疗方法。例如，一项研究使用 HEP3B 肝癌细胞，调查泛素化对丙型肝炎病毒传播的重要性。研究结果表明，泛素特异性蛋白酶 15（USP15）通过调节肝细胞特异性功能，包括脂滴形成和 HCV RNA 翻译，参与了 HCV 的传播 [4]。
5.有关 HEP3B 细胞系的论文
本节将介绍几篇关于 HEP3B 细胞的有趣研究论文。
这篇发表在《生物化学与生物物理研究通讯》（Biochemical and Biophysical Research Communications）（2019年）上的论文提出，叶黄素化合物诱导的内质网应激可能以P53不依赖的方式在P53缺失的HEP3B细胞中发挥抗肿瘤作用。
从簕杜鹃中分离的木犀草素对 Hep3B 肝癌细胞的潜在靶向作用
Archiv der Pharmazie（2021 年）上的这项研究提出，五环三萜类化合物羽扇豆醇是一种针对 HEP3B 细胞的潜在抗癌剂。
Cnidium monnieri (L.) Cusson的乙醇提取物通过调节 p53 依赖性途径诱导 HepG2 和 Hep3B 肝癌细胞的细胞周期停滞和凋亡
本文发表于《分子医学报告》（2017）。研究结果表明，Cnidium monnieri (L.) Cusson乙醇提取物通过调节p53和Akt/GSK-3β信号通路，诱导肝癌细胞HepG2和HEP3B的细胞死亡（凋亡）和细胞周期停滞。
金合欢素通过抑制 PI3K/Akt 信号通路增强舒拉萘烷介导的肝癌 Hep3B 细胞凋亡
这项发表在《生物分子与治疗学》（2020）上的研究提出，欧拉诺芬具有协同活性，可通过激活 PI3K/AKT 通路促进 sulforaphane 介导的 HEP3B 细胞凋亡。
环状 RNA-0072309 通过靶向 microRNA-665 对 Hep3B 细胞株具有抗肿瘤作用
BioFactors (2023)上的这篇研究文章提出，环状 RNA-0072309 通过靶向 miRNA-665 在肝癌细胞 HEP3B 中发挥抗肿瘤作用。
6.有关 HEP3B 细胞系的资源：协议、视频等
以下是一些有关 HEP3B 细胞的资源：
- HEP3B 转染：这段视频将解释 HEP3B 细胞的转染方案。
- HEP3B 转染效率：该链接将帮助您了解 HEP3B DMEM 培养基的组成、细胞传代和 HEP3B 细胞的转染方案。此外，它还提供了在转染方案中优化 HEP3B 脂质体转染胺 3000 试剂的信息。
以下链接包含 HEP3B 细胞培养方案：
- HEP3B 培养条件： 该链接将帮助您了解处理和维护 Huh7 和 HEP3B 培养物的方案。
- HEP3B 细胞：该网站有大量关于 HEP3B 细胞的信息，包括 HEP3B 培养基、细胞分裂方案、解冻以及增殖和低温保存培养物的处理。
参考文献
- Puttahanumantharayappa, L.D. 等人，肝癌细胞系的起源和特性。Japanese J Gastroenterol Res, 2021.1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al.,miRNA-223-3p regulates NLRP3 to promote apoptosis and inhibit proliferation of hep3B cells.实验与治疗医学，2018.15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. and S. Selen-Isbilir,Cotoxic effect of Cotinus coggygria extract on Hep3B cancer cell line.天然产品研究》，2022 年：第 1-4 页。
- Kusakabe, S., et al.，USP15通过调节病毒RNA翻译和脂滴形成参与丙型肝炎病毒传播。病毒学杂志》，2019 年。93(6): p. 10.1128/jvi.01708-18.