HEK293A 细胞
一般信息
| 说明 | HEK293A 细胞系是人类胚胎肾脏 293(HEK293)细胞的衍生物,是病毒学和基因治疗研究的专用工具,特别是在复制无能腺病毒的生产、扩增和滴定方面。这些细胞的形态扁平,大大有助于显微镜检查和滴定过程,使病毒颗粒的计数和评估更加简单。 HEK293A 细胞系的一个关键特征是腺病毒 E1 基因能稳定地整合到其基因组中。这种整合至关重要,因为它为 E1 蛋白(特别是 E1a 和 E1b)的表达提供了必要的转录机制。这些蛋白的存在对腺病毒载体在细胞中的复制至关重要。E1a 蛋白的主要功能是激活腺病毒基因组的转录,而 E1b 蛋白则参与病毒复制和细胞周期破坏。 HEK293A 细胞的作用不仅限于支持病毒复制。这些细胞有助于高效生产基础研究和治疗应用所必需的高滴度、高质量病毒制剂。该细胞系复制能力强,易于处理,使研究人员能够以前所未有的精度和效率筛选和开发腺病毒构建体。 总之,HEK293A 细胞系是病毒学和基因治疗领域不可或缺的资源。它能稳定表达 E1 蛋白并支持腺病毒复制,是研究人员生产和操作腺病毒载体的重要工具。该细胞系的特性使其能够高效地生成病毒载体,这对推进研究和潜在的治疗干预至关重要。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胚胎肾脏 |
| 同义词 | HEK-293A、HEK293A、HEK 293A、HEK293-A、QBI-HEK 293A、QBI-293A |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HEK293A(Cytion 目录号 305070) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_6910 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HEK293A细胞系含有源自猴病毒40(SV40)的基因,可增强转染效率和增殖能力。该构建体已稳定整合到胚胎肾细胞中。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305070-070623 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305070 |
| 305070-180524 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305070 |
| 305070-220524 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305070 |
材料转让协议
若您计划仅在单一研究地点将Cytion细胞系用于内部研究,请填写并签署我们的材料转让协议(MTA),随订单一并提交。
任何商业用途——包括但不限于收费服务、质量控制检测、产品放行、诊断应用或监管研究——请填写预期用途表,以便我们为您项目定制专属协议。
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所需产品
所需产品
冷冻培养基 CM-1 - 50 毫升冷冻保存介质变体: 50 毫升Cytion 的冷冻培养基 CM-1 是一种先进的冷冻培养基,旨在确保细胞在解冻后具有最高水平的活力和功能。这种多功能培养基适用于包括人类和动物细胞在内的多种细胞类型,是各种研究应用的必备工具。Freeze Medium CM-1 精心平衡了冷冻保护剂和必需营养素的组合,在冷冻过程中最大程度地减少了冰晶的形成和细胞应激,从而保护了细胞的完整性。
冷冻培养基 CM-1 的主要特点包括
广泛的兼容性:适用于多种类型的细胞,包括原代细胞、干细胞和成熟的细胞系。
高活力:经过优化,可最大限度地提高冻存后细胞的恢复能力和存活率,确保可靠的实验结果。
即用型:方便制备和灭菌,可立即使用,减少了制备时间和污染风险。
稳定性更强:在标准低温保存条件下保持稳定的性能,确保结果的可重复性。
保存期长:CM-1 是一种含血清的即用型冷冻保存培养基,可在冰箱中保存长达一年。
使用 CM-1 冷冻细胞
要使用 CM-1 冷冻粘附细胞和悬浮细胞,请按照以下步骤操作:
对于粘附细胞,清洗并使其与培养基质分离。对于悬浮细胞,直接进入下一步。
清点细胞,确保细胞浓度合适。
离心细胞使其沉淀,然后用 CM-1 冷冻培养基重悬。
将重新悬浮的细胞转移到冷冻瓶中。
在将细胞转移到长期储存器之前,采用缓慢冷冻的方法。
方法
说明
步骤
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手动冷冻
逐步降低温度以确保细胞活力的方法。
1️⃣ 将细胞放入冷冻培养基中,在 4°C 的冰箱中冷冻 40 分钟。
2️⃣转移到-80°C冷冻室24小时。
3️⃣将细胞保存在液氮中,以便长期保存。
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使用冰冻先生
无需电力即可控制冷冻速率的便捷设备。
1️⃣用冷冻培养基在低温瓶中准备细胞。
2️⃣ 将冷冻瓶放入 Mr.
3️⃣ 在-80°C下保存24小时,然后转移到液氮中。
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可控速率冷冻箱
赛默飞或其他制造商生产的用于控制温度降低的高精度冷冻机。
1️⃣对设备进行编程,使温度逐渐降低。
2️⃣ 将准备好的细胞放入冷冻室。
3️⃣冷冻周期结束后,将细胞转移到液氮中。
将冷冻瓶保存在-130°C以下的温度或液氮中,以便长期保存。
成分
含 FBS、DMSO、葡萄糖、盐类
缓冲能力:pH = 7.2 至 7.6
Cytion 的冻存培养基 CM-1 为低温保存提供了可靠的解决方案,可确保细胞在解冻后的高存活率和高功能性,适用于广泛的研究应用。€59.00*EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSSEagle’s Minimum Essential Medium(EMEM)是培养多种哺乳动物细胞(尤其是贴壁细胞系)最常用的基础培养基之一。该经典配方最初由Harry Eagle开发,含有在标准培养条件下支持原代细胞和已建立细胞系生长所需的必需氨基酸、维生素和无机盐。
这种即用型、经无菌过滤的液体配方中添加了厄尔平衡盐溶液(EBSS)、2 mM L-谷氨酰胺、D-葡萄糖(1.0 g/L)和2.2 g/L碳酸氢钠(NaHCO3),使其适用于二氧化碳可控的培养箱环境(通常为5% CO2)。配方中含有的酚红可作为pH指示剂,便于在细胞培养过程中直观监测培养基状态。
主要特点
经典的鹰氏MEM配方,含厄尔平衡盐溶液(EBSS)
含 2 mM L-谷氨酰胺——可立即使用
2.2 g/L 碳酸氢钠——经缓冲处理,适用于 5% CO2 培养
以 D-葡萄糖(1.0 g/L)作为主要碳源
含酚红作为pH指示剂
不含HEPES,不含丙酮酸钠
经无菌过滤的液体培养基,开箱即用
pH 7.0 – 7.6
典型应用
EMEM 支持多种哺乳动物细胞系的培养,包括 HeLa、HEK 293、Vero、MRC-5、L-929、BHK-21 以及许多原代细胞。常见应用包括:
贴壁细胞系的常规维持和扩增
病毒扩增和疫苗生产工作流程
细胞毒性及生物测定应用
转染和蛋白质表达研究
细胞生物学和分子生物学的基础研究
为了实现最佳的细胞生长,EMEM通常会添加5–10%的胎牛血清(FBS),并根据细胞系的不同,添加非必需氨基酸(NEAA)和青霉素/链霉素等抗生素。
处理与储存
未开封的瓶装产品应避光储存于 +2 °C 至 +8 °C 之间。开封后,请在无菌条件下使用。溶液中的 L-谷氨酰胺会逐渐降解——为获得最佳性能,建议开封后 4 周内使用该培养基;若需长期储存,请在使用前补充新鲜的 L-谷氨酰胺。将培养基加热至 37 °C 后再加入细胞中。
质量
本产品在严格的质量标准下生产。每批产品均经过无菌性、pH值、渗透压及内毒素水平的检测,以确保在细胞培养应用中表现一致。
产品规格
规格
详情
产品类型MEM
产品类别细胞培养基
规格液体
无菌是
规格500 毫升
L-谷氨酰胺含 L-谷氨酰胺 (2 mM)
葡萄糖含葡萄糖(1.0 g/L)
碳酸氢钠含 NaHCO3 (2.2 g/L)
HEPES不含 HEPES
丙酮酸钠不含丙酮酸钠
酚红含酚红
盐溶液厄尔平衡盐溶液 (EBSS)
pH7.0 – 7.6
内毒素含量未指定
储存+2 °C 至 +8 °C
配方(每升成分)
组分
浓度(mg/L)
无机盐
氯化钙·2H₂O265.00
硫酸镁97.72
氯化钾400.00
氯化钠6,800.00
无水磷酸氢二钠122.00
碳酸氢钠 (NaHCO3)2,200.00
氨基酸
L-精氨酸·盐酸盐126.00
L-胱氨酸·2HCl31.30
L-谷氨酰胺292.00
L-组氨酸·盐酸·水42.00
L-异亮氨酸52.00
L-亮氨酸52.00
L-赖氨酸·盐酸盐72.50
L-蛋氨酸15.00
L-苯丙氨酸32.00
L-苏氨酸48.00
L-色氨酸10.00
L-酪氨酸·2Na·2H2O51.90
L-缬氨酸46.00
维生素
D-泛酸钙1.00
氯化胆碱1.00
叶酸1.00
肌醇2.00
烟酰胺1.00
吡哆醛·盐酸盐1.00
核黄素0.10
硫胺素·盐酸盐1.00
其他成分
D(+)-葡萄糖1,000.00
酚红10.00€25.00*Accutase变体: 100 毫升Accutase 细胞解离试剂--胰蛋白酶的温和替代品
Accutase 是一种细胞分离溶液,正在彻底改变细胞培养行业。它是蛋白分解酶和胶原分解酶的混合物,可模拟胰蛋白酶和胶原酶的作用。与胰蛋白酶不同,Accutase 不含任何哺乳动物或细菌成分,对细胞更温和,是标准组织培养塑料器皿和涂有粘合剂的塑料器皿中细胞常规分离的理想解决方案。在本博文中,我们将探讨 Accutase 的优点和用途,以及它如何改变细胞培养的游戏规则。
Accutase 的优势
与传统的胰蛋白酶溶液相比,Accutase 有几个优点。首先,当需要温和、高效地分离任何粘附细胞系时,都可以使用它,使其成为胰蛋白酶的直接替代品。其次,Accutase 对胚胎干细胞和神经干细胞的效果非常好,而且在传代后仍能保持这些细胞的活力。第三,Accutase 能保留大多数表位,以便随后进行流式细胞仪分析,因此非常适合细胞表面标记分析。
此外,在传代粘附细胞时,Accutase 无需中和。细胞分裂后,加入更多培养基可稀释 Accutase,使其不再能分离细胞。这样就不需要灭活步骤,节省了细胞培养技术人员的时间。最后,Accutase 无需分装,一瓶可在冰箱中稳定保存 2 个月。
Accutase 的应用
Accutase 可直接替代胰蛋白酶溶液,用于细胞系的传代。此外,在使用流式细胞仪分析许多细胞表面标记物和进行细胞分拣时,Accutase 也能很好地分离细胞。Accutase 处理的其他下游应用包括细胞表面标记分析、病毒生长检测、细胞增殖、肿瘤细胞迁移检测、常规细胞传代、生产放大(生物反应器)和流式细胞术。
Accutase 的成分
Accutase 不含哺乳动物或细菌成分,是一种具有蛋白水解酶和胶原水解酶活性的天然酶混合物。它的浓度比胰蛋白酶和胶原酶低得多,因此毒性更低、更温和,但同样有效。
Accutase 的功效
与胰蛋白酶等动物源性酶相比,Accutase 能有效分离原代细胞和干细胞,并保持较高的细胞活力。10 分钟后,100% 的细胞都能恢复,而且由于 Accutase 的自动消化功能,将细胞留在 Accutase 中长达 45 分钟也无妨。
总结
总之,Accutase 是一种强大的解决方案,它正在改变细胞培养的游戏规则。Accutase 性质温和、高效且用途广泛,是胰蛋白酶的理想替代品。如果您正在寻找一种可靠、高效的细胞分离解决方案,Accutase 就是您的最佳选择。€75.00*抗生素/抗真菌溶液(100 倍)产品概述
容量:100 毫升 储存:≤-15°C 无菌:无菌过滤
抗生素/抗真菌溶液(100 倍)是一种无菌、即用型浓缩液,旨在降低细胞培养和相关实验室应用中的微生物污染风险。这种 100x 溶液含有青霉素、链霉素和两性霉素 B 的成熟组合,对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、酵母菌和丝状真菌具有广谱抗菌活性。该制剂适用于真核细胞培养、细菌培养基和其他对污染敏感的系统,支持清洁、一致的实验室操作。
应用和优点 该溶液针对常规研究方案进行了优化,广泛用于维持细胞培养工作流程中的无菌条件。它能在污染敏感环境中提供可靠的性能,帮助研究人员降低微生物过度生长的风险,同时不影响细胞健康或实验重现性。无菌过滤配方无需额外的溶解步骤,可简化培养基制备过程,减少日常实验过程中的变异性。
使用方法与兼容性 要达到标准的工作浓度,可将溶液按 1:100 的比例稀释到完整的培养基中。该产品与多种哺乳动物细胞系和基础培养基兼容。由于有稳定的库存,研究人员可从可靠的供应连续性和简化的物流规划中获益。溶液应储存在 ≤ -15 °C 的环境中,避免反复冻融以保持稳定。 仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。不得用于人类或动物。€45.00*公共广播事业磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 溶液
磷酸盐缓冲盐水(PBS)是生物和化学研究中广泛使用的缓冲溶液。在组织处理和细胞培养等各种实验过程中,它在维持 pH 值平衡和渗透压方面发挥着至关重要的作用。我们的 PBS 溶液由高纯度成分精心配制而成,可确保每次实验的稳定性和可靠性。我们的 PBS 溶液的渗透压和离子浓度接近人体渗透压和离子浓度,因此等渗且对大多数细胞无毒。
我们的 PBS 溶液的成分
我们的 PBS 溶液是一种经过 pH 值调整的超纯级磷酸盐缓冲液和生理盐水混合溶液。在 1 倍工作浓度下,它包含
8000 毫克/升氯化钠(NaCl)
200 毫克/升 氯化钾(KCl)
1150 毫克/升 无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)
200 毫克/升 无水磷酸二氢钾(KH2PO4)
这种成分可确保最佳的 pH 值和离子平衡,适用于广泛的生物应用。
我们的 PBS 溶液的应用
我们的 PBS 溶液非常适合生物研究中的各种应用。它具有等渗和无毒的特性,适用于物质稀释和细胞容器冲洗。含有 EDTA 的 PBS 溶液可有效分离附着和凝集的细胞。不过,PBS 中不应添加锌等二价金属,否则会导致沉淀。在这种情况下,建议使用 Good's 缓冲液。此外,我们的 PBS 溶液也可作为病毒运输培养基的替代品,用于运输和储存包括 SARS-CoV-2 在内的 RNA 病毒。
质量控制
无菌过滤
储存和保质期
储存于 +2°C 至 +25°C,避光保存。
开封后,储存于 2°C 至 25°C,并在 24 个月内使用。
运输条件
环境温度
保养
避光冷藏,温度保持在 +2°C 至 +8°C。避免冷冻和频繁加温至 +37°C,否则会降低产品质量。
不要将培养基加热到 37°C 以上或使用微波炉等不受控制的热源。
如果只需使用部分培养基,请取出所需用量并加热至室温后再使用。
成分
类别
成分
浓度(毫克/升)
盐类
氯化钾
200
无水磷酸一钾
200
氯化钠
8000
无水磷酸氢二钠
1150€20.00* -
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