HEK293 EBNA 细胞
一般信息
| 说明 | HEK293 EBNA 细胞系是原始 HEK293 细胞系的衍生物,而原始 HEK293 细胞系本身是由组织培养的人类胚胎肾细胞衍生而来。这种特殊的亚系被设计成能稳定表达爱泼斯坦-巴氏病毒核抗原-1(EBNA-1)。EBNA-1 的表达允许携带 EBV 复制源的质粒进行外显子复制,这使得 HEK293 EBNA 细胞在生产重组蛋白和进行涉及外显子载体的基因表达研究时尤为重要。 HEK293 EBNA 细胞保留了母体 HEK293 细胞的许多特性,包括对细胞培养塑料的粘附性和在标准哺乳动物细胞培养基中的稳健生长。EBNA-1 的加入扩大了它们在研究和生物技术应用中的用途,因为它增强了细胞繁殖具有 EBV 质粒复制起源的质粒的能力。这一特性对于生产稳定、高产的重组蛋白至关重要,而这对于研究目的和工业规模生产都是必不可少的。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胚胎肾脏 |
| 同义词 | HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA、HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA、293/EBNA-1 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HEK293 EBNA(Cytion 目录号 300264) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_6974 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HEK293 EBNA细胞系含有EBV核抗原(EBNA)序列,可实现EBV衍生质粒的环状复制,且不释放传染性病毒颗粒。该修饰在胚胎肾源细胞中具有稳定性。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
生物分子数据
| 抗原表达 | EBNA1 |
|---|---|
| 病毒 | 腺病毒 5(转化型),EBV(表达 EBNA1) |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 为了在解冻后获得最佳附着力和存活率,我们建议使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板。 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300264-280325 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300264 |
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