DLD-1细胞：DLD-1细胞在结直肠癌研究中的应用与见解
DLD-1是一种常用于癌症研究的人类结直肠癌细胞系。它是研究结肠癌各个方面的宝贵工具，包括肿瘤发生、进展、潜在分子机制以及对治疗药物的反应。因此，DLD-1在理解疾病机制和开发潜在治疗策略方面具有突出作用。
- 培养基
- DLD-1细胞的培养使用含补充成分的RPMI 1640培养基，包括10%胎牛血清（FBS）、2.1 mM稳定谷氨酰胺及2.0 g/L碳酸氢钠（NaHCO3）。培养基应每周更换2-3次。
- 倍增时间
- DLD-1细胞的倍增时间约为15小时。
- 生长类型
- DLD-1是一种贴壁型人结肠癌细胞系。细胞生长形成单层。
- 生物安全等级
- BSL-1
DLD-1细胞的一般特征与来源
在开展细胞系研究之前，研究人员首先需要了解其来源和一般属性。本文部分将详细介绍 DLD-1 细胞系，并解答以下常见问题：什么是 DLD-1 细胞？什么是 DLD-1 癌细胞系？ DLD-1细胞系有哪些突变？DLD-1细胞的大小是多少？DLD-1细胞的形态特征是什么？
- DLD-1是一种结肠癌细胞系，源自一名67岁男性结直肠腺癌患者的大肠。该细胞系由D.L. Dexter及其同事于1977年至1979年间分离获得。 该细胞系与HCT-8、HCT-15和HRT-18细胞系具有相同的来源。
- 与结直肠癌一样，DLD-1细胞具有微卫星不稳定性表型 [1]。
- DLD-1 的突变包括 KRAS、P53、BRAF、BRCA1 和 BRCA2。由于 DLD-1 的 P53 状态、DLD-1 BRCA、DLD-1 BRCA2 和 DLD-1 KRAS 突变，这些细胞被认为是癌症研究的理想对象。
- 这些细胞具有上皮样形态。
- DLD-1 细胞系的大小约为 15 µm。
- 人类结直肠癌细胞系 DLD-1 具有伪二倍体核型。约 86% 的细胞具有 46 条染色体的模态数。然而，在 17.1% 的细胞群体中也可能存在多倍体。
DLD-1细胞系的培养信息
在培养任何细胞系之前，您必须了解其基本的细胞培养要求。本节将重点介绍在开始DLD-1细胞系相关工作之前必须掌握的重要内容。其中包括：DLD-1的倍增时间是多少？ DLD-1细胞培养基是什么？DLD-1细胞的接种密度是多少？如何培养DLD-1细胞？
DLD-1细胞培养要点
倍增时间：
DLD-1细胞的倍增时间约为15小时。
贴壁或悬浮培养：
DLD-1是一种贴壁型人结肠癌细胞系。细胞可生长成单层。
接种密度：
DLD-1细胞的接种密度为1至2×10⁴个细胞/cm²。贴壁细胞用1×磷酸盐缓冲盐水（PBS）洗涤，并在室温下用传代溶液（Accutase）孵育。 孵育8至10分钟后，将脱落细胞加入培养基中并离心。随后将细胞沉淀小心重悬，并将细胞倾入装有生长培养基的新培养容器中。
生长培养基：
DLD-1细胞采用含补充成分的RPMI 1640培养基，包括10%胎牛血清（FBS）、2.1 mM稳定谷氨酰胺及2.0 g/L NaHCO3。培养基应每周更换2-3次。
培养条件：
DLD-1细胞培养于37°C、5%二氧化碳（CO₂）浓度的加湿培养箱中。
保存：
DLD-1细胞保存在液氮气相中或电控超低温冷冻柜中（温度低于-150°C）。
冷冻流程与培养基：
可使用 CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基对 DLD-1 细胞进行冷冻。建议采用缓慢冷冻法，使温度以每分钟 1°C 的速率逐渐降低，从而避免细胞受冷冲击并保护其存活率。
解冻过程：
将冷冻细胞置于预设为 37 °C 的水浴中解冻 40 至 60 秒，直至仅剩一小块冰团。 随后，将细胞加入新鲜培养基中并进行离心。此步骤旨在去除细胞中的冷冻培养基成分。收集的细胞需重新悬浮于生长培养基中，并分装至培养瓶中进行培养。
生物安全等级：
DLD-1细胞系在生物安全1级实验室中进行培养。
DLD-1细胞系：优势与局限性
在本节中，我们将回顾 DLD-1 结肠癌细胞系的优势与局限性。
优势
DLD-1细胞系的主要优势包括：
结直肠癌模型
DLD-1细胞携带结直肠癌患者中常见的突变，例如DLD-1 KRAS突变、DLD-1 BRCA突变和DLD-1 BRCA2突变。这种临床相关性使其成为研究该疾病的理想细胞模型。
致瘤性细胞系
DLD-1细胞具有致瘤性。将其注射到裸鼠体内可诱发肿瘤。因此，研究人员利用这些细胞建立异种移植肿瘤模型，以帮助研究肿瘤在体内的形成、发展和进展。
局限性
DLD-1细胞相关的局限性包括：
异质性
DLD-1结肠癌细胞群体表现出遗传和表型异质性。这可能会影响研究结果的普适性。
DLD-1细胞系的研究应用
DLD-1细胞系在癌症研究中具有广泛的应用价值。本节将探讨其中一些主要应用。
- 癌症研究：DLD-1细胞是理解结直肠癌生长、发育和进展分子机制的宝贵体外模型。此外，它们还被用于研究基因表达、信号传导通路，以及特定基因突变对癌细胞行为的影响。 2022年的一项研究发现，PI3K/Akt/YAP信号级联调控着DLD-1结直肠癌细胞系的迁移和侵袭[2]。
- 药物研发：研究人员利用DLD-1细胞系测试抗癌药物的有效性，并评估其在结肠癌治疗中的潜力。这有助于药物研发及高效对抗疾病。 2022年的一项研究利用DLD-1癌细胞系，探索了化学合成的硅酞菁类化合物的抗癌活性。研究结果表明，这些化合物是强效的抗癌药物[3]。 值得注意的是，另一项研究利用DLD-1细胞，发现了源自益生菌的P8蛋白所具有的抗癌潜力[4]。
5. 关于DLD-1细胞的研究论文
本节将重点介绍几篇以DLD-1结肠癌细胞系为研究对象的、颇具价值且被广泛引用的文献。
黄酮苷迪奥斯明可诱导DLD-1人结肠癌细胞系发生凋亡和细胞周期阻滞
该论文发表于《天然生物活性产物杂志》（2022年）。研究发现，黄酮类化合物迪奥斯明可诱导DLD-1细胞凋亡并导致细胞周期阻滞，因此具有潜在的抗癌作用。
发表于《动物细胞与系统》（2018年）的这项研究提出，菠萝蛋白酶作为一种酶，可抑制DLD-1细胞中的KRAS突变并发挥强效细胞毒性作用。
伯格普汀通过p53/p21/PTEN轴诱导结直肠癌细胞G1期阻滞及促凋亡级联反应
该研究论文于2019年发表在《环境毒理学》期刊上。研究利用DLD-1结直肠癌细胞系，探讨了天然化合物伯格普汀的抗肿瘤效应。
纳米姜黄素/纳米氧化铁复合材料的环保制备：增强对DLD-1细胞系的体外抗癌活性
发表于《无机与有机金属聚合物与材料杂志》（2023年）的这项研究发现，姜黄素/氧化铁纳米复合材料对DLD-1结直肠癌细胞具有显著的抗癌效果。
表布拉西诺苷通过激活AKT，在SW480和DLD-1结肠癌细胞系中诱导自噬并促进多胺代谢
该研究论文于2020年发表于《土耳其生物学杂志》。研究提出，天然产物表布拉西诺苷介导的DLD-1细胞中AKT的激活，可刺激与多胺相关的自噬。
DLD-1细胞系相关资源：实验方案、视频及其他
以下是关于DLD-1细胞的若干资源：
- DLD-1转染：本视频教程是关于DLD-1体外转染方案的全面指南。
- DLD-1细胞：该研究论文简要介绍了DLD-1细胞的培养要求，包括培养基和培养条件。此外，它可能有助于您了解DLD-1细胞的转染方案。
以下链接包含人源性结肠癌细胞DLD-1的培养方案。
- DLD-1细胞系：该网站将提供关于DLD-1细胞系的基础信息，并帮助您了解各种DLD-1细胞培养方案，包括传代培养以及冷冻保存和增殖培养物的处理方法。
参考文献
- Gavrilas, L.I. 等，促凋亡基因作为白藜芦醇和姜黄素在结直肠癌中单药及联合治疗的新靶点。《食品与功能》，2019年，10(6): 3717-3726页。
- Takeda, T. 等，PI3K/Akt/YAP信号通路促进DLD-1结直肠癌细胞的迁移和侵袭。《肿瘤学通讯》，2022年，23(4): 1-9页。
- Farajzadeh, N. 等，新型硅酞菁对结直肠腺癌细胞系（DLD-1）的抗癌活性。 《新化学杂志》，2022年，46(41)：第19863-19873页。
- An, B.C. 等，益生菌来源的P8蛋白在结直肠癌细胞系DLD-1中的抗癌作用。《国际分子科学杂志》，2023年，24(12)：第9857页。