Caco-2 细胞
Caco-2 细胞简介
| 说明 | Caco-2 细胞是人体肠道屏障的高级体外模型,主要是因为它们分化成的细胞单层与小肠内壁的肠细胞非常相似。在带有聚碳酸酯过滤器的组织培养滤器插入物上培养 Caco2 细胞系时,Caco-2 细胞会发生自发分化。Caco2 细胞分化的结果是表达专门的细胞类型,包括微绒毛、酶和转运体,与体内的复杂特征和机制类似。 在肠道吸收研究模型中,从人类结直肠腺癌患者身上提取的 Caco-2 细胞因其能够产生较高的 TEER 值(表明紧密连接和上皮屏障功能完好)而发挥了重要作用。这些特性对于胆固醇外流检测等试验和细胞转运研究(包括脂质纳米颗粒的移动和蛋白质相互作用的检测)至关重要。 Caco-2 细胞是肠道吸收研究的关键,提供了可靠的体外近似肠上皮细胞。这些细胞模仿肠道肠细胞,通过模拟肠道屏障来促进口服药物吸收的分析。研究人员利用 Caco-2 细胞预测物质如何穿过肠粘膜,这对口服药物的药代动力学分析至关重要。此外,Caco-2 细胞还是研究肠道胆固醇摄取、平衡和转运的关键工具,这些过程对于了解脂质代谢和相关疾病至关重要。 Caco-2 细胞仍然是结肠癌和毒理学研究的基石,不仅因为它们与人类胃肠道研究相关,还因为它们在详细了解胆道通路、结肠内异生物代谢、癌症和毒理学研究方面的作用。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 结肠 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 应用 | 胃肠道模型,测量跨上皮/内皮电阻力(TEER)。Caco-2 细胞的 TEER 值高达 2000 平方厘米(通过 CLS 使用 CellZscope 测量,nanoAnalytics 公司,德国明斯特)。 |
| 同义词 | CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II |
详细信息
| 年龄 | 72 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
文件
| 引用 | CaCo-2(Cytion 目录号 300137) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0025 |
Caco-2 细胞系的基因构成
| 表达的受体 | 热稳定肠毒素(Sta,大肠杆菌)、表皮生长因子(EGF)、视黄酸结合蛋白 I 和视黄醇结合蛋白 II、角蛋白阳性。 |
|---|---|
| 抗原表达 | O 型血,Rh+,HLA 二级阴性 |
| 同工酶 | Me-2,1,PGM3,1,PGM1,1,ES-D,1,AK-1,1,GLO-1,1,G6PD,B。 |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠体内。形成符合结肠原发性(II 级)的中度分化腺癌 |
| 抗病毒能力 | 人体免疫缺陷病毒(HIV、LAV) |
| 倍性状态 | (P14),多倍体 |
| MSI 状态 | 稳定 (MSS) |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 60 至 70 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成90%融合的单层细胞。 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 为了在解冻后获得最佳附着力和存活率,我们建议使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板。 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:01:01
B*: '15:01:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:04:01
DQA1*: '03:01:01
DQB1*: '03:02:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300137-170625 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 300137 |
| 300137-220424 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300137 |
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