COS-1 细胞：基因表达研究中的细胞主力军
COS-1 细胞系是一种纤维母细胞样细胞，来源于猴子的肾脏组织，研究人员经常用它来研究猴子病毒 SV40。这些细胞易于转染，通常用于为各种生化、分子和细胞生物学实验创建重组蛋白。
本文将提供有关 COS-1 细胞系的全面详细信息，涵盖您需要的所有基本信息。具体来说，您将获得以下方面的知识：
1.COS-1 细胞系：起源和一般信息。
在使用细胞系开始任何工作之前，必须对细胞系本身有一个基本的了解。这包括细胞的来源、如何分离细胞以及细胞的特性等信息。在本节中，我们将深入探讨 COS-1 细胞的基本知识。
什么是 COS-1 细胞系？
COS-1 细胞系由纤维母细胞样细胞组成，J.W.F. Cowell 及其同事于 1981 年首次创建了这种细胞系。这些细胞是通过用一种突变形式的猿猴病毒 SV40 转化绿猴上皮细胞系 CV-1 而产生的。随后，对已建立的 COS-1 细胞系进行了彻底鉴定，以恢复 SV40 基因组中先前从复制起源中删除的区域。这些细胞能表达大 T 抗原和其他正确复制质粒等环状基因组所需的蛋白质。
COS-1 细胞具有类似成纤维细胞的形态，可粘附在物体表面，并以单层形式扩散。目前还没有已知的 COS-1 细胞系基因变体。不过，一种相关的细胞系 COS-7 也源自 CV-1 细胞，具有类似的特征。
2.COS-1 细胞的优缺点
COS-1 细胞系具有独特的优点和局限性，我们将在下文中讨论。
优点
- 适合转染：COS-1 细胞系易于使用各种方法进行转染，包括物理和化学方法。
- 生产慢病毒：COS-1 细胞系是生产高质量重组慢病毒颗粒的合适包装宿主，无需额外的纯化步骤。这些细胞能牢固地粘附在塑料表面，从而防止含有病毒颗粒的转染上清液受到污染[1]。
- 基因表达：COS-1 细胞系被广泛用于瞬时和稳定表达分析研究，通过转染含有 SV40 复制源的环状质粒可产生许多重组蛋白 [2]。
局限性
- 非人类细胞系：由于 COS-1 细胞来源于非人类灵长类动物，因此由该细胞系产生的重组蛋白仅适用于实验室实验，不建议用于人类。
3.COS-1 细胞的研究应用
在讨论细胞系时，最重要的考虑因素之一是其研究应用。本节将探讨 COS-1 细胞最突出的研究应用。
- 重组蛋白生产：COS-1 细胞系被广泛用于通过瞬时或稳定转染含有 SV40 复制源的循环载体来生产重组蛋白。在最近的一项研究中，生物学家利用 COS-1 细胞系生产了马绒毛膜促性腺激素，这是一种用于生殖领域的重组生殖激素[3]。同样，另一项研究利用 COS-1 细胞生产了一种针对特定类型流感病毒的重组鸡化单克隆抗体 [4]。
- 生产病毒样颗粒：COS-1 细胞是生产高质量慢病毒的包装宿主，可用于生产病毒疫苗。一项研究利用 COS-1 细胞系生产了无感染性但具有高免疫原性的登革热病毒样颗粒，这是一种有效的候选疫苗 [5]。
4.COS-1 细胞出版物
关于 COS-1 细胞的一些著名出版物有
- 用 COS-1 细胞生产和纯化登革病毒样颗粒：这篇发表在《Bio-Protocol》上的文章解释了如何利用 COS-1 细胞生产高免疫原性登革病毒样颗粒。
- 重组马绒毛膜促性腺激素在三种宿主系统--大肠杆菌 BL21C、Sf 昆虫细胞裂解液和 COS-1 哺乳动物细胞--中的表达分析： 在这项研究中，研究人员比较了重组生殖激素（如马绒毛膜促性腺激素）在不同表达系统（包括 COS-1 哺乳动物细胞）中的生产和翻译后修饰情况。
- 研究蜱传黄病毒样颗粒作为基因治疗的传递系统： 这项研究利用 COS-1 细胞生产蜱传脑炎病毒（TBEV）样颗粒。建议将这些颗粒作为传递所需复制子（即治疗基因）的穿梭器。
- 产生针对 H9N2 禽流感病毒神经氨酸酶的重组鸡化单克隆抗体： 这篇发表在《AMB Express》杂志上的文章利用 COS-1 细胞产生了针对 H9N2 型禽流感病毒神经氨酸酶的重组鸡化单克隆抗体。
- 哺乳动物细胞中表达的人类 Kv 通道的无洗涤剂溶解： 本研究使用 COS-1 哺乳动物细胞系表达人 Kv 通道，并进行了一些增溶实验。
5.COS-1 细胞系的资源，包括操作规程、视频等
细胞培养方案
- COS-1 细胞培养：该链接包含有关 COS-1 细胞分裂、冷冻和解冻的宝贵信息。
- COS-1 细胞：该链接包含有关 COS-1 细胞系的基本信息。
转染方案
以下是一些介绍 COS-1 细胞转染方法的资料。
- COS-1 细胞的瞬时转染：本文档包括 COS-1 细胞系的瞬时转染方案。
与 COS-1 细胞系相关的视频
以下视频资源有助于获取有关 COS-1 细胞培养、维护和转染的一般信息。
6.培养 COS-1 细胞
|
特征 |
信息 |
|
倍增时间 |
约 48 小时 |
|
粘附或悬浮 |
粘附在培养瓶表面，以单层形式生长 |
|
接种密度 |
2 到 4 x 10^4 个细胞/平方厘米；粘附细胞用 1x PBS 冲洗，用 Accutase 处理，离心，重悬，然后分装到新的培养瓶中。 |
|
生长培养基 |
含 10% FBS 的杜氏改良鹰培养基（DMEM）；每周更换 2 到 3 次培养基 |
|
生长条件（温度、二氧化碳） |
需要 5%二氧化碳加湿培养箱，温度为 37°C |
|
储存 |
在低于 -150°C 温度的液氮气相中保存 |
|
冷冻过程和培养基 |
使用 CM-1 或 CM-ACF 培养基进行缓慢冷冻，温度仅下降 1°C |
|
解冻过程 |
将冷冻细胞放入 37°C 的水浴中快速搅拌培养 40-60 秒，使其解冻。离心细胞以除去冷冻培养基，重悬细胞团，并将其倒入装有新鲜培养基的培养瓶中。粘附大约需要 24 小时。 |
|
生物安全等级 |
处理 COS-1 细胞时建议采用生物安全 1 级。 |
我们希望这篇文章能提供大量信息，帮助您开始使用 COS-1 细胞。如果您想在研究中使用该细胞系，请向我们订购。
参考文献
- Smith, S.L. and T. Shioda,Advantages of COS-1 monkey kidney epithelial cells as packaging host for small-volume production of high-quality recombinant lentiviruses.病毒学方法杂志》，2009 年。157(1): p. 47-54.
- MacKenzie, C.J. and T. Shioda,COS-1Cells as Packaging Host for Production of Lentiviruses.当前细胞生物学协议》，2011 年。50(1): p. 26.7.1-26.7. 15.
- Bhardwaj, A., et al.,Expression analysis of recombinant equine chorionic gonadotropin in three host systems：大肠杆菌 BL21C、Sf 昆虫细胞裂解物和 COS-1 哺乳动物细胞。印度动物研究杂志》，2021 年。55(1): p. 40-45.
- Wang, F., et al.，针对 H9N2 禽流感病毒神经氨酸酶的重组鸡化单克隆抗体的产生。AMB Express, 2020.10: p. 1-7.
- Galula, J.U., G.-J.J. Chang, and D.-Y.Chao,Production and Purification of Dengue Virus-like Particles from COS-1 Cells.Bio-protocol, 2019.9(12): p. e3280-e3280.