拉莫斯细胞 - B 细胞淋巴瘤研究：拉莫斯细胞的重要性
拉莫斯细胞是一种广泛应用于生物医学研究的 B 淋巴细胞系。特别是，它们主要应用于免疫学和癌症研究。研究人员利用这些细胞评估细胞毒性药物，研究 B 细胞表面抗原、突变和凋亡机制。
了解细胞系的起源和基本属性对决定其是否适合您的研究起着至关重要的作用。因此，在开始对其进行任何研究之前，最好对这些信息进行全面评估。本节包括以下常见问题：什么是拉莫斯癌细胞系？什么是拉莫斯细胞系 CD19？什么是拉莫斯细胞系CD20？拉莫斯细胞的来源是什么？拉莫斯细胞系有哪些标记？拉莫斯细胞的大小是多少？拉莫斯细胞系的形态是怎样的？
- 拉莫斯细胞系建立于 1972 年。这些细胞来源于一名患有美国型伯基特淋巴瘤的 3 岁高加索男孩的腹水[1]。
- 它们表达主要的 B 细胞标记，包括免疫球蛋白 M（IgM）、CD19、CD20 和 CD22。
- 拉莫斯细胞是爱泼斯坦巴氏病毒阴性细胞。不过，它们可以永久性地转变为 Epstein-Barr 病毒阳性细胞。
- 这些 B 淋巴母细胞具有圆形形态。
拉莫斯蓝细胞与拉莫斯 B 细胞
拉莫斯蓝细胞和拉莫斯 B 细胞都是人类伯基特淋巴瘤细胞。两者对爱泼斯坦巴氏病毒均呈阴性。这两种细胞的区别在于，拉莫斯蓝细胞表达一种名为 SEAP（分泌型胚胎碱性磷酸）的 NF-κB/AP-1 诱导报告基因，而拉莫斯白细胞则不表达。
培养拉莫斯细胞
本节文章旨在帮助您了解有关拉莫斯细胞的必要细胞培养信息。在这里，您将了解到细胞系的倍增时间是多少？推荐的培养基是什么？如何培养拉莫斯细胞？
培养拉莫斯细胞的要点
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加倍时间： |
拉莫斯细胞的倍增时间大约为 20.4 ± 1.5 小时。但根据所提供的细胞培养条件，可能会有偏差。 |
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粘附或悬浮： |
拉莫斯细胞在悬浮状态下生长。 |
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细胞密度： |
拉莫斯细胞系的最佳细胞密度为 3 x105 cells/ml 。亚培养时，通过离心收集悬浮细胞。细胞加入新鲜培养基并小心重悬。然后，以 3-9 x105 个细胞/毫升 的密度将细胞倒入新的培养瓶中。 |
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生长培养基： |
培养 Ramos 细胞的培养基为 RPMI 1640，添加 10% 胎牛血清、2.1 mM 稳定谷氨酰胺和 2.0 g/L NaHCO3。 |
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生长条件： |
人伯基特淋巴瘤细胞系（Ramos）在 5%二氧化碳和 37°C 温度的湿润培养箱中培养。 |
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储存： |
冷冻的拉莫斯细胞保存在摄氏零下 150 度或液氮气相中，以保护细胞存活更长时间。 |
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冷冻过程和培养基： |
建议使用 CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基冻存拉莫斯细胞。冷冻过程缓慢，每分钟温度逐渐下降 1 摄氏度。这种慢速冷冻可保护细胞免受任何冲击并提高其活力。 |
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解冻过程： |
解冻时，将冷冻 细胞放在 37 摄氏度的预热水浴中 40 至 60 秒，直到剩下一小块冰。然后，加入新鲜培养基，离心去除细胞中的冷冻培养基成分。再次重悬细胞团，并将细胞分装到装有培养基的新烧瓶中。 |
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生物安全等级： |
生物安全一级实验室对于维持 Epstein-Barr 病毒阴性的拉莫斯细胞培养至关重要。但是，当拉莫斯细胞永久性地转为 Epstein-Barr 病毒阳性时，生物安全级别就会转为 2 级。 |
拉莫斯优势与局限
与其他细胞系一样，拉莫斯细胞也有明显的优势和局限性。本节将探讨可能对其研究用途产生重大影响的一些显著限制。
优势
- 伯基特淋巴瘤细胞模型：拉莫斯细胞是从一名伯基特淋巴瘤患者身上培育出来的，因此是研究淋巴恶性肿瘤的相关细胞模型。
- 易于培养：拉莫斯细胞易于在实验室中培养和维护。它们的细胞培养要求和条件简单明了。
局限性
- 体外模型：拉莫斯细胞可能无法完全代表患者肿瘤的遗传复杂性，因此限制了其适用性。此外，使用拉莫斯细胞系进行的实验结果可能无法完全反映体内情况，从而可能导致转化方面的挑战。
拉莫斯细胞在研究中的应用
拉莫斯细胞在生物医学领域的应用前景广阔。拉莫斯细胞的一些必要研究用途包括
- 淋巴瘤生物学： 拉莫斯细胞广泛用于研究淋巴瘤生物学。它们被用来探索淋巴恶性肿瘤的遗传和分子因素。此外，研究人员还可利用这些伯基特淋巴瘤细胞深入了解疾病的发生、发展和异质性。研究人员还对基因突变和信号通路进行了调查，从而有可能开发出更精确的诊断和治疗方法。2019 年进行的一项研究发现，GCN5（General control non-depressible 5）组蛋白乙酰转移酶抑制剂通过破坏 BCR 信号传导，降低了人类伯基特淋巴瘤细胞（Ramos）的致瘤性。因此，GCN5 被认为是开发淋巴瘤药物治疗的可行靶点 [2]。
- 药物筛选和测试： 拉莫斯细胞系被广泛用于药物筛选和测试。研究人员评估潜在治疗化合物在抑制淋巴瘤细胞增殖和生长以及诱导细胞死亡方面的疗效。这有助于确定有希望的候选药物，从而促进淋巴瘤患者靶向治疗的开发。例如，研究表明，安诺娜果的果皮、果肉和种子甲醇提取物对拉莫斯细胞的增殖有温和的抑制作用，而氯仿提取物则表现出强大的抑制作用。因此，该研究提出，安诺娜果实可能被证明对淋巴瘤的预防和治疗有效[3]。
用于研究的拉莫斯细胞
以拉莫斯细胞为特色的出版物
本节文章列举了一些以拉莫斯细胞系为主题的有趣研究论文：
伯基特淋巴瘤B细胞的健康需要CD 79b和CD 19的持续信号传导
这项研究发表在 2018 年的《EMBO》杂志上。研究发现，Ramos B细胞的适存性和竞争性生长需要Ramos细胞CD19和CD79b（BCR信号转导成分Igβ）标记物的表达。
Smac模拟物和TRAIL合作诱导伯基特淋巴瘤细胞系中的MLKL依赖性坏死
这项发表在《Neoplasia》（2021年）上的研究利用Ramos细胞，提出了混合系激酶结构域（MLKL）在伯基特淋巴瘤细胞（Ramos）中受表观遗传调控。因此，它是坏死相关疗法治疗成功与否的一个有希望的预后标志物。
JAK2对PBK/TOPK Tyr74的磷酸化促进伯基特淋巴瘤肿瘤的生长
癌症通讯》（Cancer Letters）（2022年）上的这篇研究文章指出，JAK2/TOPK/组蛋白H3信号轴在体外B淋巴瘤细胞系的增殖中起着至关重要的作用。
Verotoxin-1诱导的ER应激触发伯基特淋巴瘤细胞的凋亡或存活途径
这篇文章发表于 2020 年的《毒素》（Toxins）杂志。研究提出，verotoxin-1能诱导拉莫斯B细胞产生内质网（ER）应激。这导致淋巴瘤细胞系中凋亡或存活信号的启动。
水飞蓟素抑制拉莫斯癌细胞系中 Toll 样受体 8 基因的表达和细胞凋亡
阿维森纳植物医学杂志》（Avicenna Journal of Phytomedicine）（2020年）上的这篇研究报告称，一种天然化合物水飞蓟素可抑制TLR8（Toll样受体8）在拉莫斯细胞系中的表达和细胞凋亡。
拉莫斯细胞系的资源：程序、视频等
以下是一些有关拉莫斯细胞的在线资源：
- 拉莫斯细胞转染：本文档将帮助您了解转染拉莫斯细胞系的方案。
以下链接包含拉莫斯细胞培养方案：
- 拉莫斯细胞：该网站包含有关拉莫斯细胞系的基本信息。它还包含了对拉莫斯细胞进行亚培养以及处理增殖和低温保存培养物的方案。此外，还提供有关拉莫斯细胞培养基、倍增时间和细胞密度的信息。
关于拉莫斯细胞的重要见解：常见问题
参考文献
- Kerntke, C.G.,膜 IgE 与 B 淋巴细胞 CD19 和 CD23 相互作用过程中的组织和信号能力分析。2021 年，哥廷根大学。
- Farria, A.T., et al.,GCN5 HAT抑制通过减少MYC靶基因表达和阻碍BCR信号通路降低人类伯基特淋巴瘤细胞存活率。Oncotarget, 2019.10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al.，胭脂虫果的植物化学成分和抗氧化活性及其对淋巴瘤细胞增殖的影响。食品科学与营养》，2020 年。8(1): p. 58-68.