A375 细胞系 - 黑色素瘤研究指南
A375是一种人类黑色素瘤细胞系，广泛用于毒理学和免疫肿瘤学研究。研究人员利用该细胞系研究癌症生物学和信号通路，测试或筛选潜在的抗癌药物，并开发新的有效疗法。
A375 细胞的起源和一般特征
了解细胞系的起源和一般特征有助于规划其在研究中的用途。本节将介绍 A375 细胞系的起源和特点。例如，什么是 A375 细胞系？A375 细胞系有哪些特征？A375 细胞来自哪里？A375 黑色素瘤细胞的形态是怎样的？A375 细胞的大小是多少？
- 皮肤癌细胞系 A375 起源于一名 54 岁女性恶性黑色素瘤患者实体瘤的外植体培养[1]。
- A375 细胞具有上皮样形态。
- 与其他细胞系相比，A375 细胞的体积相对较小。它们的直径大约为 12 微米。
- A375 黑色素瘤细胞是低倍体。该细胞系的染色体数为 62。通常，每个细胞有九条标记染色体和一份正常的 N2、N6 和 N22 染色体。
A375 细胞细胞培养信息
A375 细胞培养物易于维护。它们没有任何苛刻的细胞培养要求。本节将帮助您了解必要的细胞培养信息。例如，A375 的倍增时间是多少？A375 细胞系培养基是什么？A375 的播种密度是多少？A375 黑色素瘤细胞是否具有粘附性？
培养 A375 细胞的要点
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群体倍增时间： |
A375 倍增时间为 20 小时。 |
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粘附或悬浮： |
A375 是一种粘附性人类黑色素瘤细胞系。 |
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接种密度： |
A375细胞培养 的理想细胞密度为 1 x104cells/cm2。粘附细胞用 1 x 磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，并与传代溶液（Accutase）一起培养。然后将细胞加入培养基并离心。将收获的细胞重悬于培养基中，然后分装到新的烧瓶中进行生长。 |
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生长培养基： |
推荐使用 DMEM 作为理想的 A375 培养基，其中添加 10%胎牛血清（FBS）、4.5 克/升葡萄糖、1.5 克/升 NaHCO3、4 毫摩尔 L-谷氨酰胺和 1.0 毫摩尔丙酮酸钠。A375 培养基应每周更新 2-3 天。 |
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生长条件： |
A375 黑色素瘤细胞在加湿培养箱（37°C）中生长，培养箱中二氧化碳浓度为 5%。 |
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储存： |
冷冻的 A375 细胞应保存在低于 -150°C 的液氮气相或电冰箱中。 |
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冷冻过程和培养基： |
CM-1 或 CM-ACF 培养基用于冷冻 A375 细胞系。为保护细胞活力，可选择温度逐渐下降 1°C 的缓慢冷冻过程。 |
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解冻过程： |
将冷冻的 A375 黑色素瘤细胞瓶在水浴中快速搅拌 40-60 秒，直到只剩下一小块冰。将细胞加入新鲜培养基并离心以去除冷冻培养基成分。得到的细胞团再次重悬并倒入新的烧瓶中。 |
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生物安全等级： |
A375 培养物在生物安全 1 级实验室环境中处理和维护。 |
A375 细胞系的优势和局限性
与其他细胞系一样，A375 黑色素瘤细胞系也具有独特的优势和局限性，使其成为黑色素瘤癌症研究的重要工具。本节仅列举了 A375 细胞系的一些重要优点和缺点。
优点
A375 细胞的主要优点如下：
- 黑色素瘤肿瘤模型：A375 细胞系来源于恶性黑色素瘤肿瘤，因此是研究黑色素瘤生物学和治疗干预的宝贵肿瘤模型。这些细胞具有类似黑色素瘤的特性，如高增殖率和侵袭性。
- 致瘤性：A375 细胞具有高度致瘤性，这意味着它们可以形成肿瘤。据报道，在使用抗胸腺细胞血清（一种免疫抑制剂）治疗的 NIH 瑞士小鼠体内，A375 细胞可产生侵袭性黑色素瘤。
- 特征明确：A375 是一种基因特性良好的细胞系。它与黑色素瘤一样具有特定的基因突变。A375 基因突变包括 A375 BRAF 基因改变，使其对 BRAF 特异性抑制剂敏感。因此，这种遗传特征使 A375 细胞成为研究潜在分子通路和靶向疗法的绝佳癌症研究工具。
局限性
与 A375 细胞相关的限制包括
- 体外局限性：A375 是一种体外肿瘤模型。虽然它模拟了黑色素瘤的特征，但并不能完全代表黑色素瘤肿瘤的复杂性。因此，在将体外研究结果推广到临床研究时要谨慎。
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A375 细胞系的研究应用
A375 细胞系在癌症研究中有着广泛的研究应用。以下是一些常见的 A375 细胞应用领域。
- 癌症研究： A375 细胞在黑色素瘤研究中应用广泛。研究人员利用这些细胞研究皮肤癌生物学、过程和潜在的细胞信号机制，包括细胞增殖、迁移和侵袭。这也有助于研究人员确定新的分子治疗靶点。Lin Zhu及其同事在2019年进行的一项研究使用了高侵袭性黑色素瘤细胞A375，发现了microRNA-3662对A375黑色素瘤细胞生长和侵袭的作用。研究结果指出，microRNA-3662靶向ZEB1基因，在体外和体内A375肿瘤模型中调控黑色素瘤细胞的生长[2]。同样，2018年进行的研究发现，PI3K/AKT和MAPK/ERK通路参与了A375细胞系的增殖和转移[3]。
- 药物发现和测试： A375 细胞系是测试和筛选潜在抗癌药物的有用体外肿瘤模型。研究人员利用这些 A375 黑色素瘤细胞评估新型化疗药物、化合物和其他疗法的毒性和疗效。例如，一项研究探讨了葡萄柚提取的微颗粒和纳米颗粒对 A375 人类黑色素瘤癌细胞的抗癌特性。结果显示，微颗粒和纳米颗粒能诱导细胞周期停止和凋亡，并阻碍细胞增殖、迁移和侵袭中的基因表达[4]。
A375 细胞：研究论文
在此提及一些以 A375 细胞为主题的重要研究论文。
维生素 D 及其低血钙类似物调节顺铂和达卡巴嗪在人类黑色素瘤 A375 细胞系中的抗癌特性
这项研究发表在2019年的《肿瘤学杂志》（Journal of Oncology）上。研究提出，在A375黑色素瘤细胞中，维生素D和类似物的联合治疗可提高顺铂和达卡巴嗪的抗癌活性。
特定芦荟物种的凝胶和全叶提取物抗黑色素瘤作用（A375 细胞系）的体外评估
这项研究于 2022 年发表在《中草药杂志》（Journal of Herbal Medicine）上。这项研究探讨了芦荟凝胶在 A375 黑色素瘤细胞中的抗黑色素瘤作用。
费米汀家族成员2通过增强p-α-Pix与Rac1的结合激活MAPK通路促进黑色素瘤的进展
Oncogene》（2021年）上的这项研究提出，费米素家族成员2（FERMT2或kindlin-2）通过与p-α-Pix和Rac1结合激活MAPK，从而促进黑色素瘤的进展。
FARP1 通过调节皮肤黑色素瘤的 MAPK 信号通路促进细胞增殖
这项发表在《美国皮肤病理学杂志》（The American Journal of Dermatopathology）（2019年）上的研究提出，FARP1可能会促进皮肤黑色素瘤的发展和恶化。因此，它可以成为一个有用的治疗靶点。
Phyllodium elegans提取物对人类癌细胞株的细胞毒性和凋亡潜力
该研究文章发表于《生物工程》（2019年）。该研究探讨了一种植物Phyllodium elegans提取物对人类癌细胞株（包括A375）的细胞毒性和凋亡活性。
有关 A375 细胞系的资源：协议、视频等
以下是一些有关 A375 细胞的在线资源。
- A375 细胞转染：本视频教程将帮助您逐步学习 A375 细胞转染。
- 细胞培养： 该视频提供了有关细胞系培养的非常有用的信息。
此处列出了 A375 细胞的细胞培养方案。
- A375 细胞系：此链接包含有关 A375 细胞系培养和维护的有用信息，包括 A375 培养基以及冷冻和增殖 A375 培养物的处理。
A375 细胞的常见问题 (FAQ)
参考文献
- Avram, S., et al.，鸡胚绒毛膜和 Balb/c 裸鼠 A375 人类黑色素瘤模型的标准化。Oncol Rep, 2017.38(1): p. 89-99.
- Zhu, L., et al.，MicroRNA-3662靶向ZEB1并减弱高侵袭性黑色素瘤细胞系A375的侵袭。Cancer Manag Res, 2019.11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al.，Oxyfadichalcone C inhibits melanoma A375 cell proliferation and metastasis via suppressing PI3K/Akt and MAPK/ERK pathways.生命科学，2018.206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al.，葡萄柚衍生的微颗粒和纳米颗粒在 A375 人类黑色素瘤细胞系中显示出不同的代谢组特征和抗癌活性。细胞》，2020 年。9(12): p. 2722.