DU-145 细胞
研究雄激素受体对人类前列腺癌细胞系 DU-145 的影响
| 说明 | DU145 是一种人前列腺癌细胞,具有前列腺癌研究中常用的上皮形态。该细胞系是从一名 69 岁男性前列腺癌患者的大脑中提取的。它们表达雄激素受体,被认为具有中度转移潜能的致瘤性,注射到裸鼠体内会形成与前列腺原发癌一致的腺癌(II 级)。 在核型方面,DU145 细胞为低三倍体,有多个标记染色体,包括 t(11q12q)、del(11)(q23)、16q+、del(9)(p11)、del(1)(p32)等。它们表达多种同工酶,包括 AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1 和 PGM3。不过,这些细胞不表达前列腺抗原。 DU145 细胞的酸性磷酸酶呈弱阳性,能在软琼脂中形成菌落。超微结构分析表明,DU145 细胞中存在微绒毛、细丝、脱绒毛体、线粒体、发达的高尔基体和异源性溶酶体。DU145 细胞的倍增时间约为 30-40 小时,是合适的转染宿主。 DU145 细胞是前列腺癌治疗研究的重要工具。DU145 与 PC3 和 LNCaP 细胞系一样,是医学研究中使用的标准前列腺癌细胞系。与 PC-3 细胞一样,DU-145 细胞也表达雄激素受体蛋白。然而,当用雄激素配体处理时,这些细胞并没有显示出对 AR 反应报告基因活性的刺激。因此,这些细胞被认为对雄激素无反应。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 前列腺 |
| 疾病 | 癌症 |
| 转移部位 | 大脑 |
| 同义词 | DU145, Du-145, DU 145, DU_145, DU.145, 杜克大学 145 |
特点
| 年龄 | 69 岁 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
规格
| 引用 | DU-145(Cytion 目录号 300168) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0105 |
人类前列腺癌细胞系 DU-145 的基因型
| 抗原表达 | O 型血,Rh+ |
|---|---|
| 同工酶 | Me-2,1-2,PGM3,2,PGM1,1,ES-D,1,AK-1,1,G6PD,B,GLO-1,2,表型频率乘积: 0.0041 |
| 致肿瘤性 | 形成腺癌(II 级),与前列腺原发癌一致 |
| 核型 | (P75)低倍体至四倍体,有异常,包括断裂、双心、分钟和大型端心标记 |
处理 DU145 细胞
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 2×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,让细胞从冷冻过程中恢复至少 24 小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
遗传特征
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '03:21N, '33:03:01
B*: '50:01:01, '57:01:01
C*: '06:02:01
DRB1*: '01:01:01, '07:01:01
DQA1*: '01:01:01, '02:01:01
DQB1*: '03:03:02, '05:01:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01, '01:09
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300168-810 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300168 |
| 300168-260424 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300168 |