Vero细胞：在病毒研究和疫苗创新领域的开拓之路

Vero细胞系是一种源自非洲绿猴肾上皮细胞的永生化哺乳动物细胞模型，处于病毒学、微生物学以及细胞与分子生物学研究的最前沿。 其广泛的应用涵盖疫苗研发、药物筛选，以及病毒与寄生虫生物学、肿瘤免疫学和免疫治疗策略的探索。

Vero细胞的起源与主要特征

深入探讨Vero等细胞系时，人们往往会产生诸多疑问：Vero细胞究竟是什么？Vero细胞系是如何建立的？“Vero”这个名称背后有什么故事？本节旨在阐明Vero细胞的起源及其主要特征。

Vero细胞系的起源可追溯至1962年，源自非洲绿猴的肾上皮细胞。该细胞系由日本千叶大学的Y. Kawakita和Yasumura培育而成。 “Vero”一词源自世界语中的“Verda reno”，意为“绿色肾脏”，不过“Vero”也与“真理”这一概念相呼应。

Vero细胞通常形成单层，但也能适应悬浮培养，呈现上皮样结构。这些细胞的特征是形状呈圆形至细长形，平均直径约为17 µm。 值得注意的是，Vero细胞的染色体数为次二倍体，约66%的细胞群体中染色体数模值为58，但一小部分（1.7%）细胞存在染色体数较高的变异。

Vero细胞克隆及其独特特性

源自 Vero 细胞系的各个克隆均表现出独特的特征，使其与原始细胞系有所区别。其中，两个值得注意的 Vero 细胞克隆是：

• Vero E6细胞系：又称Vero C1008，该克隆源自Vero 76细胞，由P.J. Price于1979年采用微孔板稀释法分离获得。 Vero E6细胞特别适合培养复制速度较慢的病毒。

• Vero 76 细胞：该细胞系于 1968 年从非洲绿猴的肾脏中分离获得，保留了 Vero 细胞特有的上皮细胞形态。

这些Vero细胞的变体，连同其亲本系，在推动病毒学研究和开发医疗干预措施方面继续发挥着关键作用，彰显了其在科学界的重要性。

培养信息

培养Vero细胞（一种猴细胞系）需要熟悉一些具体参数，例如倍增时间、接种密度以及合适的培养基。

• 细胞倍增时间：Vero细胞的倍增时间约为24小时。

• 贴壁性：Vero细胞会附着于培养基表面，培养时通常形成单层。

• 接种密度：建议初始接种密度为 1 × 10^4 个细胞/cm^2。要培养贴壁的 Vero 细胞，应先用 PBS 洗涤，然后用 Accutase 处理以使其脱附。 脱附后，将细胞离心，用新鲜培养基重悬，并转移至新的培养瓶中。

• 培养基：Ham’s F12和DMEM均适合用于培养Vero细胞。为促进最佳生长，应向培养基中补充2.5 mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清（FBS）。培养基应每周更换两到三次。

• 培养条件：Vero细胞在37°C、含5% CO₂的加湿环境中生长最佳。

• 保存：长期保存时，Vero细胞应保存在-150°C以下的温度环境中，可置于超低温冷冻柜中，或保存在液氮的蒸气相中。

• 冷冻过程与培养基：进行冷冻保存时，应使用CM-1或CM-ACF，或含FBS和DMSO的生长培养基作为冷冻培养基。采用慢速冷冻技术，以每分钟1°C的速度逐渐降低温度。

• 解冻过程：将容器浸入 37°C 水浴中，轻轻摇动 40-60 秒，使 Vero 细胞解冻。 随后，将细胞用新鲜培养基稀释，离心去除冷冻保护剂，重新悬浮于新鲜培养基中，并将其置于新的烧瓶中进行恢复和培养。

• 生物安全等级：Vero细胞应在符合1级生物安全要求实验室中操作。

Vero细胞系在研究中的应用

Vero细胞系在细胞生物学和病毒学领域有着广泛的研究应用。本文将探讨其中的一些具体应用。

Vero细胞在病毒研究和疫苗生产中的应用

Vero细胞源自非洲绿猴肾细胞，已成为包括脊髓灰质炎病毒和日本脑炎病毒在内的多种病毒疫苗生物工艺开发中的重要基础。 它们既适用于贴壁培养，也适用于悬浮培养，且具有广泛的病毒支持能力（包括对小反刍兽病毒等病原体的支持），这凸显了其在病毒分离和疫苗开发中的重要性。

大量研究已利用维罗细胞生产人类疫苗。例如，2019年发表的一项重要研究展示了维罗细胞在黄热病病毒灭活疫苗开发中的应用[2]。

Vero细胞常用于病毒感染研究，例如2020年的一项研究，通过让Vero细胞感染不同分离株的SARS-CoV-2病毒来研究该病毒的增殖特性[4]。同样，另一项研究也利用Vero细胞培养体系探究了细胞对SARS-CoV-2感染的反应[5]。

Vero细胞在组织工程与上游生物工艺开发中的作用

除了疫苗生产外，Vero细胞还为组织工程及更广泛的生物工艺开发领域做出了贡献，这凸显了持续研究其特性和应用的必要性。选择合适的Vero细胞亚系是充分发挥其在生物技术和制药行业潜力的关键。

Vero细胞在药物疗效与安全性测试中的应用

Vero细胞常被用于药物测试，以评估药用化合物的有效性和安全性。在研究各种药物和治疗剂的细胞毒性作用时，这些细胞通常被视为正常肾细胞的标准模型。 例如，一项研究对比了Terminalia avicennioides植物根提取物对肝癌细胞系HepG2和源自猴肾上皮的Vero细胞的影响，结果发现该提取物对癌细胞的损害程度大于对正常细胞的损害。

Vero细胞的局限性

尽管Vero细胞被广泛应用，但它们也存在一些局限性，例如Vero毒素的产生以及可能影响某些应用的基因组改变。了解Vero细胞（包括Vero系F6亚系）的具体亚系和基因组特征，对于优化其在各种生物工艺中的应用至关重要。

探索我们的Vero细胞及其衍生物，用于开创性的研究应用

研究论文

以下是近期以Vero细胞为研究对象且被引用次数最多的部分研究论文。

Vero细胞适应悬浮培养以在不同无血清培养基中生产狂犬病病毒

这项发表于《疫苗杂志》（2019年）的研究，通过将Vero细胞适应悬浮培养，利用多种无血清培养基成功生产了高滴度的狂犬病毒。

Vero细胞中弓形虫（Toxoplasma gondii）对卷叶藤（Tinospora crispa）乙醇提取物的敏感性

该论文于2019年发表在《循证补充与替代医学》期刊上。 研究提出，植物Tinospora crispa的乙醇提取物对弓形虫（Toxoplasma gondii）寄生虫具有抑制作用。然而，该提取物对宿主细胞（Vero细胞系）是安全的。

Colchicum baytopiorum叶提取物对C-4 I和Vero细胞系细胞毒性及细胞死亡通路的影响

该文章于2021年发表在《巴尔干肿瘤学联盟杂志》上。在这项研究中，Ozlem Dagdeviren Ozsoylemez和Gul Ozcan探讨了Colchicum baytopiorum叶提取物对C-4I和Vero细胞系的细胞毒性作用。

白藜芦醇抑制严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）在体外培养的Vero细胞中的复制

这项发表于《植物疗法研究》（2021年）的研究利用感染了SARS-CoV-2的Vero细胞，探讨了白藜芦醇对病毒复制的治疗效果。

亲脂性他汀类药物可抑制Vero细胞中寨卡病毒的产生

发表于《自然-科学报告》（2019年）的这篇论文提出，亲脂性他汀类药物（即西立伐他汀、洛伐他汀、富伐他汀、辛伐他汀和美伐他汀）可抑制Vero细胞中寨卡病毒的产生。

Vero细胞相关资源：实验方案、视频等

• Vero细胞转染：此链接将引导您了解Vero细胞的转染操作流程。
• Vero细胞系的转染：本视频讲解了Vero细胞系的转染操作流程。
• Vero细胞传代：本视频介绍了贴壁细胞系的一般传代建议。

细胞培养操作规程

• Vero细胞培养：该网站提供了一份详尽的Vero细胞培养操作规程。
• Vero细胞培养：本文档可帮助您了解Vero细胞的扩增、维持和冷冻操作流程。

参考文献

1. Ammerman, N.C.、M. Beier‐Sexton 和 A.F. Azad，《Vero 细胞系的培养与维持》。《微生物学最新实验方案》，2008 年，11(1)：A. 4E. 1–A. 4E. 7 页。
2. Pato, T.P. 等，为灭活疫苗生产而纯化Vero细胞中培养的黄热病病毒。《疫苗》，2019年，37(24)：第3214–3220页。
3. Aliyu-Amoo, H. 等，Terminalia avicennioides（Combretaceae）Guill 和 Perr. 根的提取物和分馏物对 HepG2 和 Vero 细胞系的抗增殖作用。 《临床植物科学》，2021年，7(1)：第1–7页。
4. Yao, P. 等，SARS-CoV-2 在 Vero 细胞中的分离与生长特性。《病毒学报》，2020，35(3)：第 348–350 页。
5. Park, B.K. 等，SARS-CoV-2 感染后 Calu-3 细胞与 Vero 细胞中信号传导及病毒产量的差异。《生物分子与治疗学》，2021，29(3)：第 273 页。