MRC-5 细胞系：病毒研究中的人胎肺成纤维细胞

MRC-5细胞是一种人类二倍体细胞系，广泛应用于病毒疫苗的生产（包括甲型肝炎、脊髓灰质炎和狂犬病疫苗），以及生物医学领域的研究。它们是研究病毒感染和疾病不可或缺的工具，并在药物筛选和疗效测试中具有重要应用。 本文将全面介绍MRC-5人二倍体细胞系的详细信息，以助力您的研究。

MRC-5细胞的一般特征与来源

在评估细胞系在研究中的适用性时，了解其来源和一般特征至关重要。本节将深入探讨 MRC-5 细胞的成纤维细胞特征及其来源。您将了解到：

• 来源：这些原代细胞由 J.P. Jacobs 于 1966 年从一名 14 周大的白人男性胎儿的肺组织中培养获得，而非此前所述的 1996 年。
• MRC-5细胞形态：MRC-5细胞呈现成纤维细胞样形态。
• 细胞直径：MRC-5细胞的直径约为18 μm。
• 核型：MRC-5具有正常的二倍体核型，模态染色体数为46，这与正常的人类细胞系特征一致。

MRC-5细胞系的培养指南

要高效培养 MRC-5 细胞系，必须全面了解其特定要求。以下是成功培养该细胞系需考虑的关键要点：

• 倍增时间：MRC-5细胞系的倍增时间约为45小时。根据培养条件的不同，该时间可能在35至45小时之间波动。

• 贴壁特性：MRC-5胎儿细胞属于贴壁细胞，需要附着在表面上才能生长，这与成纤维细胞的典型特征一致。

• 最佳细胞密度：接种时，建议最佳密度为 1 × 10⁴ 个细胞/cm²。 传代过程包括用PBS洗涤贴壁细胞，用Accutase处理8-10分钟使其脱落，随后进行离心。然后将细胞沉淀用生长培养基重悬，并转移至新的培养瓶中继续培养。

• 培养基：MRC-5细胞推荐使用的培养基为EMEM，其中需补充10%胎牛血清、2.2 g/L NaHCO₃、2 mM L-谷氨酰胺以及Earle’s平衡盐溶液（EBSS）。

• 培养条件：将培养物置于37°C、5% CO₂的加湿培养箱中，以模拟生理条件。

• 储存条件：长期储存时，MRC-5细胞应保存在液氮的蒸汽相中，或于-150°C以下的温度下保存。

• 冷冻与解冻：使用 CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基，采用慢速冷冻法以保持细胞存活率。解冻时，将细胞置于 37°C 水浴中加热，直至仅剩一小块冰团，然后转移至新鲜培养基中，并离心去除冷冻保护剂。 在将细胞接种到新的培养容器前，应将其重新悬浮于新鲜的生长培养基中。

• 生物安全等级：MRC-5细胞系的操作和维护需在生物安全1级实验室进行，并确保遵守安全规程。

本指南旨在协助研究人员在最佳条件下维持 MRC-5 细胞系，从而促进其科学研究中获得可靠且可重复的结果。

发布日期：2023年 | 最后审阅日期：2026年5月

MRC-5细胞系：优点与局限性

与其他细胞系类似，MRC-5人二倍体细胞既有诸多优势，也存在一些局限性。在本节中，我们将详细探讨其中一些值得注意的方面，这些信息或许能帮助您决定是否在研究中使用该细胞系。

优点

MRC-5细胞的主要优势包括：

• 源自人类的正常细胞系

  MRC-5胎儿细胞源自正常的人类肺组织，因此对于研究人类特异性疾病的研究人员而言，它是一种宝贵的工具。作为一种正常的二倍体细胞系，它能密切模拟人体细胞的生理特征和反应，与癌细胞或转化细胞系相比，为生物医学和药物研究提供了更准确的模型。

• 易感性

  MRC-5成纤维细胞对多种人类病毒具有较高的易感性，包括导致呼吸道感染和疾病的病毒，如流感病毒和冠状病毒。这一特性使其在研究病毒致病机制、筛选抗病毒药物以及开发病毒疫苗方面具有特别重要的价值。 MRC-5细胞能够支持高效的病毒复制，这使研究人员能够理解病毒感染的潜在机制，并评估潜在治疗药物的疗效。

局限性

寿命有限：尽管用途广泛，但 MRC-5 成纤维细胞系在体外具有有限的寿命。它们通常经历约 42 至 46 次细胞倍增后，便会进入复制性衰老状态。这种有限的复制能力对需要持续细胞培养的长期实验构成了挑战。 研究人员需要仔细考虑实验的持续时间并据此制定计划，以避免因细胞衰老导致的细胞行为改变所引发的问题。此外，MRC-5细胞寿命有限，需要定期用新鲜培养的细胞进行补充，这可能会影响实验的一致性和可重复性。

MRC-5细胞在研究中的应用

利用MRC-5细胞推进抗病毒研究与疫苗开发

MRC-5细胞源自一例14周大流产胎儿的肺组织，已成为抗病毒研究和疫苗研发领域的基石。这些二倍体细胞株是风疹病毒疫苗和萨宾小儿麻痹病毒疫苗生产不可或缺的组成部分。 由于源自人类组织，MRC-5细胞成为研究病毒行为的绝佳模型，例如脊髓灰质炎病毒的复制、SARS-CoV的扩增机制，以及在实验室条件下单纯疱疹病毒的产生。

这些细胞对多种病毒的易感性简化了疫苗研发流程，为麻疹和风疹等病毒的复制提供了可靠的细胞基质。MRC-5细胞的非癌变特性对于确保疫苗安全至关重要，因为其反应能够反映病毒在人体细胞中的实际表现。

借助MRC-5细胞开展的研究，在理解病毒感染和增强疫苗效力方面取得了重大进展。例如，2021年的一项研究表明，通过干扰素抑制剂抑制特定的细胞蛋白，可以提高狂犬病毒的生产规模，从而获得更高的病毒产量[3]。 此外，2019年一项研究考察了MRC-5细胞对狂犬病毒感染的反应，强调了外泌体、miR-423-5p以及I型干扰素信号通路作为靶点，在提高狂犬病疫苗产量方面的潜力[4]。

MRC-5细胞在细胞治疗与疾病研究中的应用

MRC-5细胞在细胞治疗领域也发挥着关键作用。将其与脐带来源的间充质干细胞进行比较——特别是在分化潜能方面——已引发了人们对其在治疗应用中使用的浓厚兴趣。细胞治疗领域的立场声明已认可这些细胞在治疗多种疾病方面的治疗潜力。 例如，在多发性硬化症等疾病中，它们有望调节免疫系统反应，并增强巨核细胞激活因子活性，这对血小板生成至关重要。

除了治疗应用外，MRC-5细胞还丰富了疾病研究领域，特别是在理解病毒治疗和抗原虫药物方面。作为一种难培养细胞系，MRC-5细胞的寿命有限，但它们对医学研究的贡献是巨大的。 它们在抗病毒药物的发现中发挥着关键作用，并被用于巨核细胞集落实验，以深化我们对血小板形成的理解。MRC-5细胞留下的持久遗产继续塑造着医学科学的格局，提升了我们应对复杂疾病和病症的能力。

深入探索科学：进一步了解MRC-5细胞及相关研究工具

关于MRC-5细胞系的文献

MRC-5细胞系作为医学研究中的基础细胞系，一直是多项重要研究的焦点。以下是部分在研究中利用该细胞系的值得关注的文献：

• “人二倍体2BS和MRC-5细胞中猪环状病毒的检测及其在疫苗生产
  中的应用” 该研究发表于2019年的《中国生物制品杂志》， 该研究深入探究了2BS和MRC-5人类二倍体细胞系中I型和II型猪环状病毒的存在情况，并强调了其对疫苗研发的意义。

• 通过miR-326/PDCD4/NF-κB通路
  敲低circ-UQCRC2可减轻脂多糖诱导的MRC-5细胞损伤 在2021年发表于《国际免疫药理学》的这篇论文中， 研究人员探讨了靶向环状RNA（特别是circ-UQCRC2）如何通过miR-326/PDCD4/NF-κB信号通路减轻脂多糖在MRC-5细胞中诱发的细胞损伤。

• 库拉林酮通过抑制病毒诱导的自噬流，从而抑制HCoV-OC43对MRC-5人肺细胞
  的感染。这项发表于2020年《临床医学杂志》的研究深入探讨了库拉林酮在MRC-5细胞中对抗人类冠状病毒HCoV-OC43的治疗功效，突显了该化合物在调节病毒诱导的自噬过程。

• 奥拉普汀在MRC-5细胞
  中对人类冠状病毒OC43具有抗病毒活性 该研究于2023年刊载于《营养素》杂志， 该研究指出，在MRC-5人二倍体细胞中测试时，奥拉普汀对冠状病毒HCoV-OC43表现出抗病毒能力，为抗病毒策略开辟了一条新途径。

• 富含白藜芦醇的欧亚葡萄（Vitis vinifera）修剪废料提取物对HeLa、MCF-7和MRC-5细胞的影响： 凋亡、自噬与坏死的相互作用
  这项发表于2022年《Pharmaceutics》期刊的研究，考察了源自欧亚葡萄（Vitis vinifera）的富含白藜芦醇提取物对包括MRC-5细胞系在内的三种人类细胞系的影响，为该类提取物在癌症及其他疾病中的潜在治疗应用提供了见解。

这些研究成果凸显了MRC-5细胞系的多功能性，它促进了病毒学、肿瘤学及其他领域的多样化与开创性研究，为我们理解细胞反应和治疗潜力做出了重要贡献。

关于MRC-5细胞的常见问题解答

参考文献

1. Yang, X. 等，干扰素抑制可提高人二倍体MRC-5细胞中狂犬病毒的试点规模生产。《Viruses》，2021年，14(1)：第49页。
2. Wang, J. 等，《外泌体介导的可诱导miR-423-5p递送增强了MRC-5细胞对狂犬病毒感染的抵抗力》。《国际分子科学杂志》，2019年，20(7)：第1537页。
3. 麦肯纳（McKenna, K.C.），《疫苗和医学研究中使用流产胎儿组织掩盖了所有人类生命的价值》。《林纳克季刊》（Linacre Q），2018年，第85卷第1期：第13-17页。
4. 乔丹，I. 和 V. 桑迪格，《基质与幕后：病毒疫苗的细胞基质》。《病毒》，2014年，第6卷第4期：第1672-700页。