MB49-Luc细胞
一般信息
| 说明 | MB49-Luc 是小鼠 MB49 膀胱移行细胞癌细胞系的生物发光衍生物,经基因工程改造后可稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因。 亲本MB49细胞系最初是在C57BL/6小鼠中通过7,12-二甲基苯并[a]蒽(DMBA)诱导产生的,被广泛用作免疫功能正常的C57BL/6宿主中尿路上皮癌的同基因型模型。 MB49细胞具有上皮细胞形态并表达MHC I类抗原,因此可被宿主免疫系统识别,从而成为研究膀胱癌中肿瘤-免疫相互作用、免疫治疗方法及免疫逃逸机制的宝贵模型。 MB49-Luc 中稳定的荧光素酶整合使人们能够对同基因 C57BL/6 小鼠的正位膀胱内和皮下模型中的肿瘤负荷进行灵敏、无创的生物发光成像 (BLI)。 发出的信号与存活肿瘤细胞数量相关,支持对肿瘤植入、膀胱肿瘤进展和治疗反应进行纵向评估,而无需重复进行侵入性操作。 MB49-Luc在免疫功能正常的临床前模型中,对于评估膀胱内免疫治疗方案、全身性检查点抑制剂以及针对肌层浸润性和非肌层浸润性膀胱癌的新型治疗方式具有特别重要的价值。 MB49-Luc 保留了亲本 MB49 系的核心生物学和免疫学特征,包括其与 C57BL/6 的同基因相容性以及 Y 染色体缺失的特征性核型特征。荧光素酶报告基因提高了实验灵敏度,并实现了肿瘤的实时追踪。 研究人员在进行大规模体内实验前,应根据具体实验条件确认荧光素酶活性、生长动力学及免疫表型。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 膀胱 |
| 疾病 | 小鼠膀胱过渡细胞癌 |
| 同义词 | MB49-荧光素酶,MB49 LucSH+ |
特点
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 近交小鼠品系(C57BL/6) |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | MB49-Luc(Cytion 产品编号 305681) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_E8D4 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该细胞系含有通过复制缺陷型慢病毒转导引入的、稳定整合的萤火虫荧光素酶报告基因盒(Luc2,经密码子优化)。 由此获得的多克隆细胞群在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选条件下维持。需采用S1级生物安全防护措施。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | 吕克 |
|---|---|
| 抗原表达 | Luc2(萤火虫,密码子优化版) |
| 核型 | 失去了 Y 染色体 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase,室温下10分钟 |
| 加倍时间 | 24-48小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305681-180526 | 分析证书 | 03. Jul. 2026 | 305681 |