HT-29 细胞系
HT-29是一种人类结直肠癌细胞系，在癌症和毒理学研究中具有广泛的应用。例如，这些细胞对针对结直肠癌的标准化疗方案敏感。 此外，HT-29细胞系作为一种特征明确的体外模型，可用于研究肠上皮细胞对细菌感染的反应。HT-29细胞模拟了成熟肠细胞（即肠上皮细胞）的特性，因此适用于细胞附着及机制研究。
- 培养基
- 参见产品页面
- 倍增时间
- 参见产品页面
- 生长类型
- 贴壁
- 生物安全等级
- BSL-1
HT-29细胞：来源与基本信息
在使用任何细胞系之前，您应了解该细胞系的一般特征及其来源。本节将帮助您了解：什么是 HT-29 细胞？HT-29 是否为结直肠癌细胞系？HT-29 细胞的形态特征如何？
什么是 HT-29 细胞系？HT-29 是一种结直肠腺癌细胞系，由 Trempe 和 Fogh 于 1964 年建立。 该细胞最初源自一名患有结直肠腺癌的44岁白人女性的原发肿瘤[1]。自建立以来，该细胞系一直被用于研究癌症生物学。
HT-29细胞的形态：HT-29细胞系通常具有上皮样形态。 分化细胞以单层生长，形成紧密的细胞-细胞连接，并具有顶端刷状缘。如果这些细胞在缺乏葡萄糖的培养基中生长，或给予丁酸或酸等诱导剂，它们就会表现出肠细胞样特征。
细胞大小：HT-29结直肠癌细胞系的直径为11 μm。
基因组与倍性：HT-29细胞系的模态染色体数为71，范围可能在68-72之间。此外，HT-29细胞的简化染色体数为超三倍体，其中2S组分的发生率为2.4%。
什么是HT29 MTX？HT29 MTX是一种甲氨蝶呤耐药细胞系，通过使原始HT-29人结肠癌细胞系适应10 µM甲氨蝶呤而分离获得。这些细胞表现出分泌黏液的成熟杯状细胞特征。
HT-29细胞系的细胞培养信息
了解细胞系的基本培养要求，能让您的实验工作事半功倍。您需要了解：HT-29细胞系的倍增时间是多少？HT-29细胞的接种密度是多少？HT-29细胞应使用哪种培养基？
倍增时间
HT-29细胞系的平均倍增时间为24小时。
贴壁/悬浮
HT-29 属于贴壁型细胞系。
接种密度
HT-29 细胞的推荐接种密度为 3 x 104 细胞/cm2。用 1X PBS 洗涤生长中的细胞，与 Accutase 孵育 8-10 分钟后使其脱落。 加入新鲜培养基，然后将细胞离心。将细胞沉淀重新悬浮，并按照推荐的细胞密度将细胞分装到新的培养瓶中。
培养基
HT-29 细胞的最佳培养基为添加了 2.5 mM L-谷氨酰胺和 10% FBS 的 Eagle 最小必需培养基 (EMEM)。培养基应每周更换 2 至 3 次。
培养条件
HT-29细胞生长需要37°C、5% CO₂的恒湿培养箱。
保存
这些细胞保存在低于 -195°C 的液氮气相中。
解冻过程
冷冻的 HT-29 细胞在设定为 37°C 的水浴中解冻。这些细胞可重新悬浮，并直接分装到新鲜的生长培养基烧瓶中。 此外，也可将解冻后的细胞离心以去除冷冻培养基成分，随后用新鲜培养基重悬，再在培养瓶中进行培养。
生物安全等级
HT-29细胞系的处理和维护采用1级生物安全标准。
HT-29 细胞：优点与局限性
每种细胞系都有其独特的优缺点，使其与其他细胞系区别开来。本节将介绍与 HT-29 细胞相关的主要优点和局限性。
优势
HT-29细胞的主要优势包括：
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易于培养
HT-29细胞系操作简便、易于维护，培养要求不复杂。该细胞系在研究实验室中被广泛培养。
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肠细胞体外模型
在特定培养条件下，HT-29细胞可分化为成熟的肠细胞（肠上皮细胞和黏液分泌细胞）。它们被用作细胞模型，用于研究食物消化和生物利用度。
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高转染效率
HT-29结肠癌细胞具有较高的转染效率，使其适用于基因表达和调控研究。可通过多种方法进行瞬时转染和稳定转染实验。
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药物敏感性
HT-29细胞对氟尿嘧啶和奥沙利铂等常用于结肠癌治疗的化疗药物敏感。它们被用于研究药物耐药性，并筛选结直肠癌的潜在治疗药物。
局限性
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异质性
与其他癌细胞系一样，HT-29细胞具有异质性，可能无法形成均匀的细胞群体。这可能会影响某些检测中结果的可重复性，并导致实验结果出现轻微差异。
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分化能力有限
HT-29细胞的分化潜能有限。它们无法完全分化为肠细胞或结肠细胞，仅表现出少数特征性表型。这一局限性可能限制其在研究更复杂生物过程中的应用。
HT-29 细胞：应用
由于应用范围广泛，HT-29细胞系在研究实验室中被广泛培养。本节仅介绍HT-29细胞的几个重要应用。
癌症研究：HT-29 是一种结直肠腺癌细胞系，因此常用于研究癌症的进展、发展及其潜在分子机制。2018 年的一项研究利用 HT-29 细胞系，探究了导致转移的细胞分子。 该研究发现，波形蛋白（vimentin）和CXCR4基因可调控细胞转移。而转染microRNA-193a-5p模拟物可降低这些基因的mRNA水平，并成功抑制癌细胞转移[2]。
毒理学研究：HT-29细胞系在毒理学研究中被广泛应用。这些结直肠癌细胞常被用于通过不同检测方法评估各类候选药物的毒性。例如，有研究探讨了植物Syzygium cumini乙醇提取物对HT-29细胞系的潜在毒性。 结果显示该提取物显著抑制了HT-29细胞的增殖，表明其具有良好的抗癌特性[3]。
微生物学：HT-29可作为宿主细胞系统，用于研究潜在微生物（即细菌和病毒）的致病机制。 研究人员可通过让微生物感染 HT-29 细胞来研究其致病性和宿主反应。一项研究就利用 HT-29 细胞探索了乳酸菌的益生菌特性 [4]。另一项研究则利用 HT-29 细胞评估了噬菌体治疗的疗效和安全性 [5]。
5. 关于HT-29细胞的研究文献
本节将介绍一些关于HT-29细胞的知名文献，这些文献将有助于您设计研究方案。
Syzygium cumini乙醇提取物对HT-29结直肠癌细胞系的抗癌效应评价
该研究提出，Syzygium cumini乙醇提取物可能是针对结直肠癌细胞系HT-29的潜在抗癌药物。该提取物显著抑制了癌细胞的生长。
四氢萜胺通过Bcl-2/Caspase 3/PARP通路及G1/S期抑制结肠癌HT-29细胞的生长
《生物科学报告》刊载的这项研究测试了化合物四氢萜（Tetrandrine）对HT-29细胞的抗癌活性。结果表明，四氢萜通过调节细胞信号传导通路来抑制癌细胞的增殖和生长。
microRNA-193a-5p通过抑制转移通路来抑制人HT-29结肠癌细胞的迁移
该研究提出，miRNA-193a-5p可能通过调控与转移相关的基因来调节HT-29细胞的转移。
噬菌体对携带人类细胞的细菌比在细菌培养基中更具致病性：来自HT-29细胞的启示
本文发表于2018年的《自然-科学报告》。本研究利用HT-29致瘤细胞系作为肠道细胞模型，评估了所提出的噬菌体治疗方案的疗效。
乳酸菌的益生菌特性及其抑制肠致病菌附着于Caco-2和HT-29细胞的能力
在这项研究中，研究人员利用HT-29细胞探究了乳酸菌的益生活性。有趣的是，研究表明乳酸菌能阻止致病菌附着于结肠细胞。
HT-29细胞资源：实验方案、视频及其他
本节将介绍关于HT-29细胞的在线资源，这些资源有助于学习其维护、培养及转染操作规程。
细胞培养方案
以下资源将指导您进行HT-29细胞的传代培养。
- HT-29细胞培养：此链接将提供关于HT-29细胞培养基、解冻及传代的基本知识。
- HT-29 细胞培养的维护：本文包含有关 HT-29 细胞培养和维护的所有有用信息。
转染方案
HT-29细胞系具有极高的转染效率，常用于基因表达研究。以下资源介绍了针对该细胞系的转染方案。
- HT-29转染：此网站链接包含HT-29细胞转染的详细方案。
- HT-29细胞系的转染：本文档描述了使用质粒DNA对HT-29细胞系进行转染的操作规程。
与HT-29细胞系相关的视频
以下是关于该致瘤细胞系培养与维护的视频。
- 细胞传代：本视频展示了贴壁细胞系的细胞传代操作流程。
- HT-29 细胞转染：本视频将指导您如何对 HT-29 细胞进行转染。
我们希望本文中的信息对您处理和维护 HT-29 细胞系有所帮助。如果您计划在研究中使用 HT-29 细胞，请向我们订购。
参考文献
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29细胞系。《食品生物活性物质对健康的影响：体外与离体模型》，2015年：第113-124页。
- Shirafkan, N. 等，microRNA-193a-5p 通过抑制转移通路来抑制人类 HT-29 结肠癌细胞的迁移。《细胞生物化学杂志》，2019 年，120(5): 第 8775-8783 页。
- Khodavirdipour, A., R. Zarean 及 R. Safaralizadeh，Syzygium cumini乙醇提取物对HT-29结直肠癌细胞系的抗癌效应评价。《胃肠癌杂志》，2021年，第52卷：第575-581页。
- Fonseca, H.C. 等，乳酸杆菌的益生菌特性及其抑制肠致病菌附着于Caco-2和HT-29细胞的能力。 《益生菌与抗菌蛋白》，2021. 13: 102-112页。
- Shan, J. 等，噬菌体在含有人体细胞的环境中比在细菌培养基中对细菌更具致病性；来自 HT-29 细胞的见解。《科学报告》，2018. 8(1): 第 5091 页。