Neuro-2a 细胞系
Neuro-2a 是一种广泛应用于神经科学研究的小鼠来源神经细胞系。这些细胞主要用于研究神经发育、分化、神经毒性、细胞信号传导通路以及轴突生长。此外，它们还用于药物研发和筛选。
本文重点介绍了 Neuro-2a 神经母细胞瘤细胞的一些重要方面，这些信息可帮助您在开始相关研究前做好准备。本文主要涵盖以下内容：
- Neuro-2a 细胞的一般特性与来源
- Neuro-2a细胞系的培养信息
- Neuro-2a细胞系的优缺点
- Neuro-2a细胞系的研究应用
- 以Neuro-2a细胞为研究对象的学术文献
- Neuro-2a细胞相关资源：操作指南、视频等
Neuro-2a细胞的一般特性与来源
本文这一部分将介绍Neuro-2a细胞系的背景及其基本特征，这些内容在操作该细胞系前必须了解。您将在此了解：什么是Neuro-2a细胞系？ Neuro-2a 细胞系的来源是什么？ Neuro-2a细胞的分化过程是怎样的？Neuro-2a细胞的大小是多少？Neuro-2a细胞的形态特征是什么？
- Neuro-2a细胞源自一只白化小鼠（A品系）的自发性肿瘤（神经母细胞瘤）。该细胞系由R.J. Klebe和F.H. Ruddle建立。
- Neuro-2a神经母细胞瘤细胞呈现神经元和阿米巴样干细胞形态。
- Neuro-2a细胞的高度为12微米[1]。
- Neuro-2a细胞的染色体数范围为59至193，众数为95。这些神经母细胞瘤细胞的核型在94至98条染色体的范围内不稳定。
Neuro-2a细胞系培养信息
Neuro-2a细胞在神经科学研究实验室中被广泛应用。在操作这些细胞之前，您应了解以下必备的细胞培养信息。这将有助于您更轻松地进行操作。您将了解：什么是 Neuro-2a 细胞培养基？如何培养Neuro-2a细胞？ Neuro-2a 细胞的倍增时间是多少？ Neuro-2a 的接种密度是多少？Neuro-2a 细胞的培养方案是什么？Neuro-2a 细胞培养基是什么？
Neuro-2a细胞培养要点
倍增时间：
Neuro-2a细胞的倍增时间约为70小时。
贴壁还是悬浮：
Neuro-2a 是一种贴壁细胞系。
接种密度：
Neuro-2a细胞系的优化接种密度为1 × 10⁴个细胞/cm²。接种时，先用不含镁和钙的磷酸盐缓冲盐水（1×）洗涤细胞。 随后加入传代溶液（Accutase），并在室温下孵育8至10分钟。细胞解离后，加入新鲜培养基，并将细胞离心。将收获的细胞沉淀小心重悬，然后将细胞倒入培养容器中进行培养。
培养基：
Neuro-2a细胞的培养使用EMEM培养基。该培养基含有10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺、1.5 g/L NaHCO₃、EBSS、1 mM 丙酮酸钠以及NEAA，以确保细胞理想生长。 培养基应每周更换1至2次。
培养条件：
Neuro-2a细胞培养需置于37°C加湿培养箱中，并连接5% CO₂供气系统。
保存：
细胞应保存在-150 °C以下的超低温电冻柜中，或置于液氮气相中进行长期保存。
冷冻过程与培养基：
使用CM-1或CM-ACF培养基对Neuro-2a细胞进行冷冻。采用缓慢冷冻法，每分钟温度降幅不超过1 °C。此方法可保护细胞免受冷冲击，并维持其存活能力。
解冻过程：
要解冻冷冻细胞，将试管置于37 °C的水浴中40至60秒，直至仅剩一小块冰块。 随后加入培养基，并对细胞进行离心处理。此步骤有助于去除冷冻培养基中的成分。接着将细胞沉淀重新悬浮，并将细胞转移至装有培养基的新培养瓶中。之后，将细胞置于 37 °C 的培养箱中培养至少 24 小时。
生物安全等级：
处理和维护Neuro-2a细胞培养物必须在生物安全1级实验室环境中进行。
Neuro-2a细胞系的优缺点
Neuro-2a细胞具有一些优缺点，使其与其他神经元细胞系有所区别。以下列出了这些细胞的一些显著优缺点。
优点
Neuro-2a小鼠神经母细胞瘤细胞系的优点包括：
-
易于培养：
Neuro-2a细胞系无需复杂的细胞培养流程。在研究实验室中，该细胞系易于培养和维护。
-
体外神经元细胞模型：
Neuro-2a 是一种便捷的神经元细胞模型，被研究人员广泛应用于神经元发育和分化研究中。
缺点
Neuro-2a细胞的缺点包括：
-
小鼠来源：
Neuro-2a 源自小鼠，由于小鼠与人类的生物学特性可能存在显著差异，研究人员在将基于小鼠的研究结果外推至人类健康与疾病时应谨慎对待。
Neuro-2a细胞系的研究应用
Neuro-2a细胞在神经科学研究领域具有广泛的应用前景。本文将探讨该细胞系的几种有前景的应用：
- 神经发育：Neuro-2a 是一种体外神经元细胞模型，被广泛用于研究神经元发育及相关过程，如分化、轴突生长和突触形成。 2020年的一项研究利用Neuro-2a细胞，探讨了微RNA-124在视黄酸诱导的神经元细胞分化中的作用[2]。 另一项研究则调查了神经母细胞瘤细胞系（N2A）中 Neuro-2a 视黄酸受体 γ（RARG）和 miRNA-124 的表达情况。该研究提出，RARG 是 miR-124 的靶点，且会抑制神经突的生长[3]。
- 神经毒性：Neuro-2a 细胞还被用于评估药物、化学物质或环境因素对神经细胞的毒性作用。 例如，尹志红及其同事开展的一项研究利用Neuro-2a细胞，调查了环境化学物质双酚A（BPA）的神经毒性。他们观察到，BPA通过破坏神经元细胞及其突触的完整性，从而抑制神经元细胞的分化和增殖[4]。
- 药物筛选：Neuro-2a细胞还被用于评估多种药物、化合物及天然产物的治疗活性。 例如，一项研究利用Neuro-2a细胞，探讨了银杏叶提取物的抗氧化潜力。此外，该研究指出，该提取物可减少Aβ的聚集，并可能成为治疗阿尔茨海默病的潜在疗法[5]。
5. 以Neuro-2a细胞为研究对象的科研论文
以下是一些以Neuro-2a细胞系为研究对象的有趣论文。
黑胡椒（Piper nigrum）中分离的胡椒碱样醛酰胺可诱导Neuro-2a细胞中BDNF启动子活性并促进神经突生长
这项发表于2018年《天然药物杂志》（Journal of Natural Medicines）的研究，探讨了从白胡椒（P. nigrum）中分离出的醛酰胺对Neuro-2a神经元细胞的治疗作用。
发表于2020年《中国生物化学与生物物理学报》的这项研究提出，Nkx2.1基因通过调节Shh信号级联在小鼠大脑发育中发挥重要作用。
双酚A暴露会诱导Neuro-2a细胞出现与突触和细胞骨架功能障碍相关的神经毒性
该论文发表于《毒理学与工业卫生》（2023年），指出环境化学物质双酚A会诱导Neuro-2a细胞发生神经毒性，并导致其突触和细胞骨架功能紊乱。
六肽林通过调节Neuro-2A细胞中的MAPK和PI3K/Akt信号通路抑制过氧化氢诱导的凋亡毒性
发表于《Pharmaceuticals》（2021年）的这篇论文提出，药物赫克萨雷林可调节神经母细胞瘤细胞（Neuro-2a）中的PI3K/AKT和MAPK信号级联反应，并抑制过氧化氢诱导的Neuro-2a细胞凋亡。
印度醋栗（Emblica officinalis）果实乙醇提取物可抑制小胶质细胞中的神经炎症并促进Neuro-2A细胞神经突生长
发表于《循证补充与替代医学》（2021年）的这篇研究论文指出，印度醋栗果实乙醇提取物可抑制Neuro-2a细胞中的神经炎症，因此对神经炎症性疾病具有治疗益处。
Neuro-2a细胞相关资源：操作指南、视频等
以下是关于Neuro-2a细胞的在线资源，其中包括Neuro-2a细胞培养和转染操作指南。
- Neuro-2a转染操作规程：Neuro-2a是适合转染的宿主细胞。此链接将指导您完成该细胞系的转染操作。Neuro-2a的转染效率因所用试剂而异。
以下链接包含Neuro-2a细胞培养操作规程。
- Neuro-2a细胞培养方案：此链接将帮助您了解Neuro-2a细胞的传代培养方案。
- Neuro-2a细胞：该网站包含关于Neuro-2a细胞培养基、接种密度，以及传代培养、冷冻保存和增殖性培养操作规程的全面知识。
参考文献
- Lulevich, V. 等，单细胞力学为探究β-淀粉样肽与神经元细胞之间的相互作用提供了一种灵敏且定量的手段。《美国国家科学院院刊》，2010年，107(31)：第13872-7页。
- You, Q. 等，miR-124在调节视黄酸诱导的Neuro-2A细胞分化中的作用。《神经再生研究》，2020年，15(6)：第1133-1139页。
- Su, X. 等，微RNA-124以视黄酸受体γ为靶标并抑制神经突生长。《神经药理学》，2020年，163期：第107657页。
- Yin, Z. 等，双酚A暴露诱导Neuro-2a细胞的神经毒性，并与突触及细胞骨架相关。《体外毒理学》，2020年，第67卷：第104911页。
- 陈，L. 等，银杏叶提取物（EGb）可抑制过表达APPsw的Neuro-2A细胞中的氧化应激。《国际生物医学研究》，2019年。