imWilms1 細胞
USUSD$800.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | Wilms1 細胞系最初源自一例原發性威爾姆斯腫瘤,該腫瘤取自一名被診斷出患有大型雙側腎腫瘤的患者,此為威爾姆斯腫瘤(腎母細胞瘤)的典型臨床表現。 該細胞系在 WT1 基因中攜帶一個純合子無義突變(c.149 C>A, p.S50X),導致產生截短且無功能的 WT1 蛋白。 WT1 是腎臟發育的關鍵基因,其突變與威爾姆斯腫瘤的病理機制密切相關,特別是在表現出間質分化的腫瘤中。Wilms1 細胞具有穩定的核型,無顯著的染色體異常,其特徵為間質表型,會表達維曼汀,但缺乏細胞角蛋白等上皮標記物。 該細胞系展現出有限但顯著的間質分化能力,包括在特定條件下分化為類肌肉細胞的潛力,使其成為研究 WT1 突變分子後果的關鍵模型。 為克服原代 Wilms1 細胞的有限壽命,研究人員透過將三重突變的 SV40 大 T 抗原(U19dl89-97tsA58)導入原始腫瘤細胞,建立了 imWilms1 細胞系,從而促進其永生化。 此項修飾使 imWilms1 細胞能在維持染色體穩定的同時無限增殖,從而為長期研究提供了一個可靠的模型。這些永生化的 imWilms1 細胞持續表現相同的 WT1 突變,並保留了親本 Wilms1 細胞系的間質特徵。 除了其遺傳和表型特徵外,imWilms1 細胞系在訊號傳導路徑活性方面也經過廣泛分析。蛋白質體學研究揭示了數種受體酪胺酸激酶(RTKs)的磷酸化與活化,包括 EGFR、PDGFRβ 和 AXL,並伴隨下游 MAPK 訊號傳導路徑的活化。 imWilms1 細胞中這些路徑的一致性活化,凸顯了其對探索威爾姆斯腫瘤靶向治療策略的重要性。總體而言,imWilms1 作為一個穩健且可長期使用的模型,用於探究威爾姆斯腫瘤發生與進展背後的分子機制,特別是那些由 WT1 突變及異常訊號傳導路徑所驅動的機制。 |
|---|---|
| 生物體 | 人類 |
| 組織 | 腎臟 |
| 疾病 | 威爾姆斯腫瘤 |
| 同義詞 | IM-WT-1 |
特徵
| 年齡 | 10個月 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 族裔 | 高加索人 |
| 形態學 | 紡錘狀 |
| 細胞類型 | 威爾姆斯細胞 |
| 生長特性 | 依附者 |
監管數據
| 引用 | imWilms1(Cytion 型號 300412) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_A5SN |
| 轉基因狀態 | GMO-S1:此 imWilms1 人源性威爾姆斯腫瘤細胞系含有三重突變的 SV40 T 抗原片段,可實現條件性永生化,用於腎母細胞瘤研究。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類可能有所不同。 |
生物分子資料
| 突變譜 | WT1 突變狀態:c. 149 C>A 純合子,p.S50x;LOH:11p11-11pter;CTNNB1 突變狀態:TCT>TTT 雜合子,p.S45F |
|---|
處理方式
| 培養基 | MSCGM 套組(由 Lonza 提供) |
|---|---|
| 解離試劑 | Accutase |
| 傳代培養 | 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。 |
| 流體更新 | 每週 1 至 2 次 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
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| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
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分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 300412-221 | 分析證明書 | 23. May. 2025 | 300412 |
| 300412-030624 | 分析證明書 | 18. Aug. 2025 | 300412 |