iPSC-hDPSC

為改善細胞脫附與重新接種的流程，請依照以下步驟操作：

1. 移除用過的培養基，並用不含鈣和鎂的 PBS 沖洗細胞。
2. 加入脫附溶液，並依照製造商的指示靜置作用。
3. 小心地向細胞中加入新鮮培養基。
4. 輕柔地將細胞解離，以確保損傷降至最低。
5. 在全新的 6 孔培養板表面塗佈維特羅內克汀，並將解離後的細胞接種至其中兩個孔中，以進行後續培養。

為確保細胞生長狀況最佳且實驗結果具一致性，建議在細胞適應培養條件後，將接種密度設定為 5,000 至 10,000 個細胞/cm²。

1. 請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。

2. 收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。

3. 若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。

4. 後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。

5. 小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。

6. 將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。

7. 將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。

8. 請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。