PK-15 細胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USUSD$395.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 607426

安全資料表

產品說明書

分析證明書 (CoA)

說明	PK(15) 細胞系源自 PK-2A，後者是 1955 年從成年豬的腎臟建立的細胞系，該細胞系感染了豬 C 型腫瘤病毒（前稱豬內源性逆轉錄病毒，PERV），該病毒被歸類為第 2 類風險病原體。宿主細胞基因組中含有 62 份 pol 基因，該基因編碼逆轉錄酶及其他蛋白質。最初，PK(15) 細胞系所產生的病毒顆粒被描述為缺陷型，且對包括人類細胞系在內的各種哺乳動物細胞系均不具感染性，因此被歸類為第 1 風險組細胞系。然而，後續研究證實，PK(15) 細胞的無細胞上清液可有效感染人類 293 細胞。此發現促使德國生物安全中央委員會（ZKBS）於 2018 年 11 月重新將 PK(15) 細胞系重新分類。聚合酶鏈式反應（PCR）分析顯示，經傳遞的病毒屬於多嗜性亞型 PERV-A 和 PERV-B。此外，研究觀察到 293 細胞產生的病毒顆粒能抵抗人類補體系統的滅活作用。除了其病毒學上的重要性外，PK(15) 細胞系亦是轉染應用中的合適宿主。由於其具貼壁生長特性，在各種研究與實驗情境中具有極高的價值。
生物體	豬
組織	腎臟
同義詞	PK(15)、PK (15)、PK 15、PK15、豬腎-15

品種／亞種	漢普郡
年齡	成人
性別	男性
形態學	上皮樣
生長特性	單層，貼壁型

引用	PK-15（Cytion 型號 607426）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9823
Cellosaurus 編號	CVCL_2160

病毒	PCV1（豬圓環病毒1型）呈陽性，PCV2呈陰性，PCV3呈陰性
對病毒的易感性	豬瘟、非洲豬瘟、豬水皰性皮疹、口蹄疫（FMDV）、水皰性口炎（印第安納型）、牛痘病毒、輪狀病毒 2 型、3 型、腺病毒 4 型、5 型、柯薩奇病毒 B2 型、B3 型、B4 型、B5 型、B6 型
抗病毒性	小兒麻痺病毒 2 型
逆轉錄酶	正向

培養基	EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
營養補充品	在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
解離試劑	Accutase
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	2 × 10^⁴ 個^細胞/cm^²
流體更新	每週 2 至 3 次
解凍後的恢復	請讓細胞有至少 24 至 48 小時的時間從冷凍過程中恢復。
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

批次編號	證書類型	日期	型號
607426-721	分析證明書	23. May. 2025	607426
607426-090924	分析證明書	23. May. 2025	607426

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