NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 細胞
USUSD$800.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 細胞系是一種源自正常大鼠腎臟(NRK)細胞、透過轉染環狀質體所衍生的克隆穩定細胞系。 該質體含有基因構建體,編碼四個串聯重複的 lambda N22 RNA 結合位點,以及三個與 M9 核定位訊號融合的 mEGFP(單體增強型綠色螢光蛋白)標籤的串聯重複序列。轉染後,細胞經過抗藥性篩選,以確保基因改造的穩定性。 此克隆穩定細胞系中約有 50% 的細胞會表達螢光標記 4xλN22-3xmEGFP-M9,這表明質體已成功整合。 透過 mEGFP 強勁的螢光訊號,該標記的表達可實現細胞內過程的即時可視化。M9 核定位訊號確保所表達的融合蛋白能被運輸至細胞核,使此細胞系特別適用於研究核-細胞質運輸、RNA 動態以及基因表達調控。 此 NRK-4xλN22-3xmEGFP-M9 細胞系對於專注於 RNA 結合蛋白質相互作用、RNA 代謝,以及核內進出口機制之研究人員而言極具價值。 mEGFP 標記的存在使研究人員能夠運用共焦顯微鏡和活細胞成像等先進成像技術,從而深入了解細胞成分的時空動態。儘管存在斑駁現象,該細胞系仍是剖析複雜分子途徑並更深入理解細胞功能的強大工具。 |
|---|---|
| 生物體 | 鼠 |
| 組織 | 腎臟 |
| 同義詞 | NRK 4xlN22-3xmEGFP-M9 |
特徵
| 品種/亞種 | 奧斯本·門德爾 |
|---|---|
| 形態學 | 呈紡錘形的成纖維細胞樣細胞 |
| 生長特性 | 單層,貼壁型 |
監管數據
| 引用 | NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9(Cytion 型號 500672) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_AV97 |
| 存款人 | 艾倫伯格實驗室(EMBL) |
生物分子資料
| 受體的表達 | 表皮生長因子(EGF)、增殖刺激活性(MSA) |
|---|---|
| 蛋白質表達 | 4xλN22-3xmEGFP-M9: 位置/基因:937..1009、1066..1138、1194..1261、1323..1390 / λ肽、1462..2176、2179..2890, 2896..3612 / mEGFP, 3612..3815 / M9-His, 5090..5884 / KanR/NeoR, 7195..584 / Pcmv |
| 產品 | 位於 BsrG1/HindIII 之間的 M9-His 標籤、新黴素、磷酸轉移酶、CMV 啟動子 |
處理方式
| 培養基 | DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a) |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% FBS 及 0.5 mg/mL G418 |
| 解離試劑 | Accutase |
| 傳代培養 | 倒掉舊培養基,並用PBS洗滌細胞。 加入新鮮配製並加熱至 37 攝氏度的 0.025% 胰蛋白酶/0.02% EDTA 溶液,並等待細胞脫落,此過程通常約需 5 分鐘。加入新鮮培養基以中和胰蛋白酶,然後將細胞混合物轉移至離心管中並進行離心。 離心後,倒去上清液,將細胞沉澱用新鮮培養基重懸,並將懸浮液轉移至新的培養瓶中。在培養基中加入 G418,使其最終濃度達到 0.5 mg/ml |
| 播種密度 | 2 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm² |
| 流體更新 | 每週 2 至 3 次 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
|
| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
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