KC 細胞
一般資訊
| 說明 | KC(Kc167)是一種源自背側閉合期雌性胚胎的果蠅(Drosophila melanogaster)胚胎細胞系,於 Cellosaurus 登錄編號為 CVCL_Z833。 該細胞系最初由他人建立,並廣泛應用於果蠅細胞生物學、基因篩選及功能基因組學研究。Kc167 細胞經 SV40 病毒永生化處理,呈半附著生長狀態,形成由附著細胞與鬆散漂浮細胞混合而成的細胞群。 它們是特性最為明確的果蠅細胞系之一,且完全適用於 RNAi 介導的基因沉默,使其成為無脊椎動物生物學中全基因組 RNAi 篩選的基石模型。 KC 細胞適用於果蠅細胞生物學、全基因組 RNAi 及 CRISPR 篩選、訊號傳導路徑研究(Wnt/Wingless、Hedgehog、Notch、JAK/STAT、Toll/NF-κB)、先天免疫研究,以及進化上保守路徑的比較研究。 由於果蠅基因組已完成全序列定序與註釋,加上豐富的公開 RNAi 試劑資料庫(例如 DRSC/TRiP),KC 細胞在進行無偏見的功能基因組探索方面尤為強大。由於採用 SV40 進行永生化處理,因此該細胞系歸類為 BSL-2 等級。 KC 細胞培養於添加 2 mM 谷胺醯胺及 10% FBS 的施奈德果蠅培養基中。關鍵在於,果蠅細胞系應在 25°C 的常溫空氣中(不含 CO₂)進行培養(而非如哺乳動物細胞那樣在 37°C / 5% CO₂ 環境下培養)。 細胞透過輕柔重懸與稀釋進行傳代(半附著生長)。每 2–3 天更換培養基或稀釋細胞一次。 |
|---|---|
| 生物體 | 黑腹果蠅(Drosophila melanogaster) |
| 組織 | 胚胎 |
| 疾病 | 正常 |
| 轉移部位 | 胚胎(背側閉合期) |
| 應用 | 果蠅細胞生物學;全基因組 RNAi 篩選;CRISPR 篩選;訊號傳導(Wnt/Wingless、Hedgehog、Notch、JAK/STAT、Toll/NF-κB);先天免疫;無脊椎動物功能基因組學 |
| 同義詞 | KC、K C |
特徵
| 年齡 | 背側閉合階段 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 形態學 | 半黏附性上皮樣 |
| 細胞類型 | 胚胎細胞 |
| 生長特性 | 半附著型 |
監管數據
| 引用 | KC(Cytion 型號 300604) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_Z833 |
| 轉基因狀態 | GMO-S2:此果蠅細胞系含有穩定整合的 SV40 不死化基因盒。須實施 BSL-2 等級的生物安全管控。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類標準可能有所不同。 |
生物分子資料
| 對病毒的易感性 | SV40 細胞永生化 |
|---|
處理方式
| 培養基 | 施耐德果蠅培養基 + 2mM 谷氨醯胺 + 10% 胎牛血清 (FBS)。 |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 2 mM 谷胺醯胺及 10% FBS |
| 解離試劑 | 無需處理(半附著;輕柔重懸) |
| 倍增時間 | 約 24 至 48 小時 |
| 傳代培養 | 用移液管輕輕吸取培養液,使半貼壁細胞重新懸浮。 將適當體積的培養液移入新的培養瓶中,並加入新鮮且已預先加熱的施奈德培養基。稀釋至細胞密度為 5 × 10⁵ 至 1 × 10⁶ 細胞/毫升。於 25°C 環境下,在無二氧化碳的空氣中進行培養。 |
| 拆股比例 | 1 至 3 |
| 播種密度 | 5 × 10⁵ 至 1 × 10⁶ 個細胞/毫升 |
| 流體更新 | 每 2 至 3 天 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
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| 培養環境 | 25°C,環境空氣(無需二氧化碳)。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |