K7M2 wt-Luc 細胞
一般資訊
| 說明 | K7M2 wt-Luc 是小鼠 K7M2 骨肉瘤細胞系的生物發光衍生物,經基因工程改造後可穩定表達螢火蟲螢光素酶報告基因。 原始的 K7M2 細胞系是從一隻 BALB/c 小鼠的自發性骨肉瘤腹水中建立的,其特徵為具成骨細胞形態及高度轉移潛能,特別是轉移至肺部。 K7M2 是少數基於 BALB/c 背景的同基因骨肉瘤模型之一,使其成為研究骨肉瘤生物學、腫瘤與免疫系統的相互作用,以及在免疫功能正常的宿主中評估免疫療法策略的寶貴工具。 K7M2 wt-Luc 中穩定的螢光素酶整合,可對同基因型 BALB/c 小鼠的原發性腫瘤生長及肺部轉移擴散進行高靈敏度、非侵入性的生物發光成像(BLI)。 在給予螢光素底物後,發出的訊號與存活腫瘤細胞數量呈正相關,有助於在各時間點無需侵入性程序的情況下,對腫瘤植入、轉移定植及治療反應進行縱向監測。 這使得 K7M2 wt-Luc 特別適合用於評估骨肉瘤中抗腫瘤和抗轉移藥物、檢查點抑制劑以及聯合治療策略的臨床前研究。 K7M2 wt-Luc 保留了親本 K7M2 系的生物學和免疫學特性,包括補體成分 C3 和 Fc γ 受體 I (FcgRI) 的表達,這些特徵可能會影響與先天免疫系統的相互作用。螢光素酶報告基因顯著提高了實驗靈活性與靈敏度,可即時追蹤腫瘤進展。 研究人員應在進行大規模體內實驗前,先根據其特定實驗條件驗證螢光素酶活性、生長動力學及轉移行為。 |
|---|---|
| 生物體 | 滑鼠 |
| 組織 | 腹水 |
| 疾病 | 小鼠骨肉瘤 |
| 轉移部位 | 肺 |
| 應用 | 骨肉瘤研究;同源性 BALB/c 腫瘤模型;透過生物發光技術進行肺轉移成像;抗腫瘤及抗轉移藥物評估;檢查點抑制劑測試;先天免疫相互作用研究(C3、FcgRI);小兒骨癌免疫療法 |
| 同義詞 | K7M2-WT、K7M2 |
特徵
| 品種/亞種 | BALB/c |
|---|---|
| 年齡 | 895 天 |
| 性別 | 女性 |
| 細胞類型 | 成骨細胞 |
| 生長特性 | 依附者 |
監管數據
| 引用 | K7M2 wt-Luc(Cytion 型號 305684) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| Cellosaurus 編號 | 未指定(K7M2 wt-Luc 報告基因衍生物;親本 K7M2 同系 BALB/c 骨肉瘤) |
| 轉基因狀態 | GMO-S1:此細胞系含有透過複製缺陷型慢病毒轉導導入、已穩定整合的螢火蟲螢光素酶報告基因片段(Luc2,經密碼子優化)。 由此產生的多克隆細胞群在嘌呤酶篩選(1–5 µg/mL)條件下維持。需採用 S1 級別的生物安全防護措施。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類標準可能有所不同。 |
生物分子資料
| 受體的表達 | 補體(C3),已表達;Fc受體,IgG,高親和力I型(Fcgr1),已表達 |
|---|---|
| 抗原表達 | Luc2(螢火蟲,密碼子優化) |
| 致瘤性 | 是的 |
處理方式
| 培養基 | DMEM |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS) |
| 解離試劑 | Accutase |
| 傳代培養 | 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。 |
| 拆股比例 | 1 至 3 |
| 播種密度 | 1 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm² |
| 流體更新 | 每週 2 至 3 次 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。 |
| 細胞解凍與培養 |
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| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 轉移部位: | 肺 |
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