Hep-70.4 細胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USUSD$650.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 400207

安全資料表

產品說明書

分析證明書 (CoA)

說明	Hep-70.4 肝癌細胞系源自小鼠肝臟腫瘤，具體而言是來自 C57BL/6J 小鼠品系。該細胞系因 p53 基因的突變而備受矚目，這些突變是在體外傳代過程中於不同傳代次數時被鑑定出來的。在第 8 代傳代時，單鏈構象多態性（SSCP）分析中檢測到一項微弱的額外訊號，顯示存在 p53 突變。到了第 38 代，已鑑定出兩種明顯的 p53 點突變：外顯子 5 的第 135 個密碼子處出現 G:C 轉為 C:G 的轉位突變，以及第 138 個密碼子處出現 C:G 轉為 G:C 的轉位突變。這些突變分別導致氨基酸從丙胺酸變為脯胺酸，以及從半胱胺酸變為色氨酸。 Hep-70.4 細胞系在傳代過程中，其形態表型會發生顯著變化。部分亞系呈現上皮細胞形態，而其他亞系則呈現成纖維細胞樣外觀。這種異質性反映了該細胞系的複雜性質，以及其在不同培養條件下的適應能力。在早期傳代中同時存在正常和突變的 p53 等位基因，這表明這些突變賦予了選擇性的生長優勢，導致突變克隆隨時間推移逐漸佔據主導地位。對 Hep-70.4 細胞系進行的中間絲蛋白分析顯示，該細胞系表達正常肝細胞特有的簡單角蛋白 K8 和 K18，同時也以不同程度表達維曼汀和角蛋白 K19。這些蛋白質模式證實了該細胞系的肝細胞起源，並確認其歸類為肝癌細胞系。透過DNA指紋分析進一步評估了Hep-70.4的基因組穩定性，結果未發現任何重大的結構異常，儘管隨著傳代次數增加，某些條帶的相對強度出現了變化。
生物體	滑鼠
組織	肝臟
疾病	肝細胞癌
同義詞	HEP-70.4、70.4

品種／亞種	C57BL/6J
年齡	成人
性別	女性
形態學	上皮樣
生長特性	依附者

引用	Hep-70.4（Cytion 型號 400207）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	10090
Cellosaurus 編號	CVCL_5772

致瘤性	是的，在 C3H/He 小鼠中
突變譜	P53

培養基	DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
營養補充品	在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
解離試劑	Accutase
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	1 × 10^⁴ ^個細胞/cm^²
流體更新	每 3 至 5 天
解凍後的恢復	讓細胞恢復至少 24 至 48 小時。
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

批次編號	證書類型	日期	型號
400207-314	分析證明書	23. May. 2025	400207

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Hep-70.4 細胞

一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析

分析證明書 (CoA)