HaCaT-ras II-4 細胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USUSD$550.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 300495

安全資料表

產品說明書

說明	HaCaT-ras II-4 細胞是生物科學領域中一個備受矚目且經廣泛研究的細胞模型。這些細胞源自自發性永生化的人類皮膚角質形成細胞（即 HaCaT 細胞），並透過轉染 c-Ha-ras (EJ) 致癌基因而進行了基因改造。如 Boukamp 等人於 1990 年進行的綜合研究所述，這些細胞的篩選是基於其對選擇性抗生素 G418 的抗性。 HaCaT-ras II-4 細胞的一個顯著特徵是其致瘤性。當這些克隆細胞被注射到 Balb/c-nu/nu 小鼠體內時，會展現出引人入勝的行為，形成高度分化且具有局部侵襲性的鱗狀細胞癌。這項獨特特性使研究人員能夠在受控的實驗環境中探索腫瘤的發育與進展機制。 HaCaT-ras II-4 細胞主要源自白人族群，確保其在科學研究中與特定族群具有相關性。其來源與特性使其成為對研究各種皮膚生物學及分化方面感興趣的研究人員不可或缺的資源。在典型培養條件下，這些細胞呈現部分至完全分化的表型。此表型歸因於傳統培養基及胎牛血清中鈣離子的豐富含量，這為細胞展現類似成熟皮膚細胞的特徵提供了理想環境。此特性使研究人員得以探究皮膚發育、傷口癒合及表皮分化所涉及的複雜過程。憑藉其致瘤性及在體外重現皮膚生物學的能力，HaCaT-ras II-4 細胞為探索與皮膚癌及其他皮膚相關疾病相關的分子途徑提供了獨特契機。透過運用此卓越的細胞模型，研究人員能更深入地了解腫瘤發生、侵襲潛能及治療干預措施的底層機制。 HaCaT-ras II-4 細胞是生物科學研究的重要工具，特別適用於皮膚生物學與分化研究。該細胞源自自發性永生化的人類皮膚角質形成細胞，經 c-Ha-ras (EJ) 致癌基因修飾後，並在小鼠體內展現出腫瘤形成行為，使其在研究皮膚相關疾病及治療方法方面具有無可替代的價值。透過運用 HaCaT-ras II-4 細胞的獨特特性，研究人員能更深入地理解皮膚生物學，並有助於推進醫學知識及各種皮膚疾病的治療方案。
生物體	人類
組織	皮膚
同義詞	HaCaT-ras 克隆 II-4、HaCaT II-4、II-4

年齡	62年
性別	男性
族裔	高加索人
細胞類型	角質形成細胞
生長特性	依附者

引用	HaCaT-ras II-4（Cytion 型號 300495）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_3868
轉基因狀態	GMO-S1：此人類角質細胞系（HaCaT-ras II-4）含有經轉染導入、編碼 c-Ha-Ras 致癌基因序列的質體，使其呈現轉化後的生長行為。該構建體已整合至源自 HaCaT 的角質細胞中。此分類僅適用於德國境內，其他地區的分類可能有所不同。

蛋白質表達	P53 (+)，CEA (+)，
致瘤性	Balb/c-nu/nu 小鼠中高度分化且具局部侵襲性的鱗狀細胞癌的形成。
核型分析	非整倍體（假四倍體）

培養基	DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
營養補充品	在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
解離試劑	每次在利用不含 Ca²⁺ 和 Mg²⁺ 的 PBS 剝離細胞之前，必須先配製 EDTA（母液：0.05%）與胰蛋白酶（母液：0.1%）的 1:1 混合液，以確保其滲透壓符合生理狀態。不建議使用即用型胰蛋白酶/EDTA混合液，因為這可能會導致細胞結塊。作為替代方案，可使用 TrypLETM Express（Life Technologies）取代胰蛋白酶/EDTA。應遵循製造商的操作說明。
傳代培養	棄置舊培養基：將舊培養基從培養瓶中倒出。洗滌細胞：向 T25 培養瓶中加入 3-5 毫升 PBS（不含鈣和鎂），或向 T75 培養瓶中加入 5-10 毫升，以洗滌貼壁細胞。加入 EDTA 溶液：用新調製的 0.05% EDTA 溶液完全覆蓋細胞層——T25 燒瓶使用 1-2 毫升，T75 燒瓶使用 2.5 毫升。孵育：將燒瓶於 37 攝氏度下孵育 10 分鐘。加入胰蛋白酶/EDTA 溶液：孵育完成後，向培養瓶中加入新鮮配製的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA），確保細胞完全被覆蓋——T25 培養瓶使用 1 毫升，T75 培養瓶使用 2.5 毫升。監測細胞脫落：觀察細胞，細胞應在 1-2 分鐘內脫落。中和胰蛋白酶：加入含胎牛血清（FBS）的細胞培養基以停止胰蛋白酶活性。轉移細胞：將細胞懸浮液分裝至預先注入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	1 × 10^⁴ ^個細胞/cm^²
流體更新	每週 2 次
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

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HaCaT-ras II-4 細胞

一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析