HaCaT-ras A5 細胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USUSD$550.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 300494

安全資料表

產品說明書

說明	HaCaT-ras A5 細胞是一種自發性永生化、無致瘤性的人類皮膚角質形成細胞系，對於研究腫瘤微環境的相互作用及皮膚癌的進展至關重要。這些細胞源自一名 62 歲的白人男性，經過克隆選擇和突變處理，並結合自分泌生長因子的調節，可在 Balb/c-nu/nu 小鼠體內形成生長緩慢、高度分化的良性囊腫性腫瘤。這使它們成為研究體內腫瘤進展的細胞動態與分子機制之寶貴模型。 HaCaT-ras A5 細胞對於闡明腫瘤細胞與周圍基質細胞（包括成纖維細胞、免疫細胞和內皮細胞）之間的複雜相互作用特別有用。這些相互作用是由各種訊號分子的分泌所介導的，例如生長因子、細胞因子和蛋白酶，其中白細胞介素-6（IL-6）扮演著關鍵角色。已知在許多癌症類型中，IL-6 會出現調控失常，主要透過 STAT3 轉錄因子的過度表達或持續活化所致。研究顯示，IL-6 刺激 HaCaT-ras A5 細胞後，會透過 JAK/STAT 訊號傳導路徑顯著增加其增殖；而成纖維細胞則因該路徑的負調節因子 SOCS3 產生更強效的抑制作用，因而不受影響。這種差異性反應已被納入一個描述 STAT3 與 SOCS3 動態的數學模型中，有助於更深入地理解細胞特異性的訊號傳導級聯反應。此外，IL-6 不僅直接影響 HaCaT-ras A5 細胞的增殖，還透過激活包括 HGF、KGF、VEGF 和 IL-8 在內的生長因子網絡，間接影響細胞環境。針對超過 16,000 個基因的基因表達分析顯示，IL-6 刺激會同時在 HaCaT-ras A5 細胞和成纖維細胞中上調 19 個與干擾素訊號傳導路徑相關的基因，這與成纖維細胞中觀察到的生長抑制現象相吻合。 SerpinB4 在 HaCaT-ras A5 細胞增殖中扮演關鍵角色的發現，已透過 siRNA 敲低實驗得到證實，這凸顯了 IL-6 在腫瘤細胞和基質細胞中複雜的調控作用。對 IL-6 作用機制的全面理解，增強了開發針對性治療策略的潛力，旨在調控腫瘤微環境中的 IL-6 訊號傳導路徑。總體而言，HaCaT-ras A5 細胞為探索腫瘤微環境內的複雜相互作用提供了一個可靠的模型，為癌症研究與治療開發的新方法鋪平了道路。
生物體	人類
組織	皮膚
同義詞	HaCaT-ras 克隆 A-5、HaCaT A-5、A-5、A5

年齡	62年
性別	男性
族裔	高加索人
細胞類型	角質形成細胞
生長特性	依附者

引用	HaCaT-ras A5（Cytion 型號 300494）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_xK16
轉基因狀態	GMO-S1：此 HaCaT-ras A5 細胞系含有由質體攜帶的 c-Ha-ras 致癌基因構建體，用於上皮轉化研究。此分類僅適用於德國境內，其他地區的分類可能有所不同。

蛋白質表達	P53 (+)，CEA (+)，
致瘤性	Balb/c-nu/nu 小鼠中良性腫瘤的形成。
核型分析	非整倍體（假四倍體）

培養基	DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
營養補充品	在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
解離試劑	每次在利用不含 Ca²⁺ 和 Mg²⁺ 的 PBS 剝離細胞之前，必須先配製 EDTA（母液：0.05%）與胰蛋白酶（母液：0.1%）的 1:1 混合液，以確保其滲透壓符合生理狀態。不建議使用即用型胰蛋白酶/EDTA混合液，因為這可能會導致細胞結塊。作為替代方案，可使用 TrypLETM Express（Life Technologies）取代胰蛋白酶/EDTA。應遵循製造商的操作說明。
傳代培養	棄置舊培養基：將舊培養基從培養瓶中倒出。洗滌細胞：向 T25 培養瓶中加入 3-5 毫升 PBS（不含鈣和鎂），或向 T75 培養瓶中加入 5-10 毫升，以洗滌貼壁細胞。加入 EDTA 溶液：用新調製的 0.05% EDTA 溶液完全覆蓋細胞層——T25 燒瓶使用 1-2 毫升，T75 燒瓶使用 2.5 毫升。孵育：將燒瓶於 37 攝氏度下孵育 10 分鐘。加入胰蛋白酶/EDTA 溶液：孵育完成後，向培養瓶中加入新鮮配製的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA），確保細胞完全被覆蓋——T25 培養瓶使用 1 毫升，T75 培養瓶使用 2.5 毫升。監測細胞脫落：觀察細胞，細胞應在 1-2 分鐘內脫落。中和胰蛋白酶：加入含胎牛血清（FBS）的細胞培養基以停止胰蛋白酶活性。轉移細胞：將細胞懸浮液分裝至預先注入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	1 × 10^⁴ ^個細胞/cm^²
流體更新	每週 2 次
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

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HaCaT-ras A5 細胞

一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析