HMC3 細胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USUSD$550.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 300102

安全資料表

產品說明書

分析證明書 (CoA)

說明	人類小膠質細胞克隆 3（HMC3）細胞系是由 Tardieu 教授的團隊於 1995 年開發的，其方法是利用 SV40 使來自 8 至 12 週大胚胎的人類脊髓及皮質組織中的小膠質細胞實現永生化。這些原代細胞以分裂緩慢和形態複雜為特徵，在進行不朽化處理前，最初會先培養 10 至 15 天。 HMC3 細胞保留了原代小膠質細胞的幾項關鍵特徵，例如 CD68、CD11b 和 CD14 等髓系標記物的多樣化表達，儘管表達水平會因所選的一抗而顯著變化，尤其是 CD68。永生化後，HMC3 細胞的增殖率有所提升，倍增時間介於 24 至 48 小時之間，同時仍保留了其原代對應細胞的許多表型和形態特徵。值得注意的是，與原代細胞相比，CD68 EBM/11 陽性細胞的比例較高，且吞噬活性有所降低。經 35 次傳代後，抗原表達的穩定性已獲確認，在基準條件下，這些細胞仍對 NSE、CD68 和 CD11b 呈陽性，但對 CD14、MHCII 和 CD4 呈陰性。然而，接觸干擾素-γ（IFNγ）會提高 MHCII 的表達，這與原代培養細胞對相同處理的反應更為接近。在功能方面，HMC3 細胞系與其他克隆相比，其特點是在基礎條件下能產生更高水平的白細胞介素-6 (IL-6)。儘管如此，由於方法上的差異，與原代小膠質細胞的細胞因子產量進行直接比較仍然具有挑戰性。相較於原代培養細胞，這些不朽化細胞系對脂多醣（LPS）刺激的反應似乎有所減弱。與原代小膠質細胞的特徵一致，HMC3 及其他克隆系無論在自發狀態下或經促炎刺激後，均未產生腫瘤壞死因子-α（TNFα），這突顯了人類胚胎小膠質細胞的一項特定特徵。
生物體	人類
組織	胎兒大腦
應用	3D 細胞培養、神經科學、神經發炎
同義詞	人類小膠質細胞克隆 3，CHME-3，CHME3

年齡	胎兒
性別	未指定
形態學	巨噬細胞
細胞類型	小膠質細胞
生長特性	依附者

引用	HMC3（Cytion 型號 300102）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_II76
轉基因狀態	GMO-S1：此人類胎兒腦微膠細胞系（HMC3）透過轉染引入了 SV40 T 抗原構建體，以支持細胞永生化。該插入片段在微膠細胞衍生的細胞中穩定存在。此分類僅適用於德國境內，其他地區的分類可能有所不同。

病毒	SV40 的遺傳物質會穩定地整合到細胞基因組中。不會有完整的病毒顆粒被主動產生或釋放，這減輕了潛在的生物安全疑慮。

培養基	DMEM：Ham's F12（1:1），重量比：3.1 g/L 葡萄糖，重量比：2.5 mM L-谷氨酰胺，重量比：15 mM HEPES， w: 0.5 mM 丙酮酸鈉，w: 1.2 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820400a）
營養補充品	在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
解離試劑	Accutase
倍增時間	24 小時和 48 小時
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

批次編號	證書類型	日期	型號
300102-220524	分析證明書	23. May. 2025	300102
300102-230623	分析證明書	23. May. 2025	300102
300102-290125	分析證明書	23. May. 2025	300102

HMC3 細胞

一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析

分析證明書 (CoA)