HK EGFP-α-微管蛋白/H2B-mCherry 細胞
USUSD$800.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | HK EGFP-α-微管蛋白/H2B-mCherry HeLa Kyoto 細胞系是一種經過精心設計的模型,旨在詳細呈現細胞過程。此克隆細胞系已透過穩定轉染,可表達兩種螢光蛋白融合蛋白,從而實現對染色質及微管網絡的即時成像。 紅色螢光蛋白 mCherry 與核心組蛋白 H2B 融合,形成 H2B-mCherry。 此融合蛋白由 pH2B-mCherry-IRES-neo3 質體表達,用作染色質標記物,在活細胞成像中突顯核 DNA,並有助於研究染色質動力學與核結構。 此外,此細胞系透過 pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b 質體,表達與 α-微管蛋白融合的單體增強型 GFP(綠色螢光蛋白)。 GFP-α-微管蛋白融合蛋白會發出鮮豔的綠色螢光,勾勒出細胞內的微管結構輪廓。此特性對於研究微管的組織、動態及其在細胞分裂與細胞內運輸中的作用至關重要。 這些構建體的穩定整合,使得無需反覆轉染即可持續、長期地觀察這些細胞成分,從而降低變異性並提高實驗結果的可靠性。轉染後的抗藥性篩選,確保了該細胞系中各細胞的表達穩定性與均一性。 |
|---|---|
| 生物體 | 人類 |
| 組織 | 子宮頸 |
| 疾病 | 癌 |
| 同義詞 | HeLa Kyoto EGFP-α-微管蛋白/H2B-mCherry、HeLa H2B-mRFP 及 mEGFP-α-微管蛋白 |
特徵
| 年齡 | 30年 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 族裔 | 非裔美國人 |
| 形態學 | 呈馬賽克狀石塊形狀的類上皮細胞 |
| 生長特性 | 單層,貼壁型 |
監管數據
| 引用 | HK EGFP-α-微管蛋白/H2B-mCherry(Cytion 型號 300670) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_L802 |
| 存款人 | 艾倫伯格實驗室(EMBL) |
| 轉基因狀態 | GMO-S1:此 HeLa Kyoto 細胞系含有 EGFP-α-微管蛋白及 H2B-mCherry 構建體,可用於同時對微管與染色質進行成像。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類可能有所不同。 |
生物分子資料
| 蛋白質表達 | EGFP-α-微管蛋白、H2B-mCherry: 位置/基因:1..589 / Pcmv,652..1029 H2B,1042..1752 / mCherry,2983..3777 / KanR/NeoR |
|---|---|
| 病毒 | 愛滋病毒、B型肝炎病毒及C型肝炎病毒檢測結果均為陰性。 |
| 產品 | CMV 啟動子、組蛋白 H2B、新黴素、磷酸轉移酶 |
處理方式
| 培養基 | DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a) |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS) |
| 解離試劑 | Accutase |
| 倍增時間 | 24小時 |
| 傳代培養 | 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。 |
| 播種密度 | 1 × 10⁴ 個細胞/cm² |
| 流體更新 | 每週 2 至 3 次 |
| 解凍後的恢復 | 解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
|
| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
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分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 300670-201123 | 分析證明書 | 23. May. 2025 | 300670 |
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