HK-CRISPR-Nup188-mEGFP 細胞
USUSD$800.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | HK-CRISPR-Nup188-mEGFP 是一種經基因改造的 Hela Kyoto 細胞系。該細胞系利用 CRISPR/Cas9 技術,將 mEGFP(單體增強型綠色螢光蛋白)整合至 Nup188 基因座。 Nup188 是一種參與核孔複合體的關鍵核孔蛋白,對於核與細胞質之間的分子運輸至關重要。透過 mEGFP 標記,可實現 Nup188 的即時可視化,有助於研究核孔複合體的動態與功能。 此細胞系對於專注於核轉運及核孔複合體生物學的研究人員尤為實用。其螢光標記功能可讓研究人員在各種條件下(包括藥物處理及基因改造)觀察 Nup188。應用範圍涵蓋高內容篩選、活細胞成像及其他基於螢光的技術,為核質轉運及核膜完整性提供寶貴的見解。 |
|---|---|
| 生物體 | 人類 |
| 組織 | 子宮頸內口 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 轉移部位 | 不適用(HeLa 京都衍生株;原發性腫瘤部位為子宮頸管) |
| 應用 | 核孔複合體(NPC)生物學;核質運輸;Nup188 的動態與功能;核膜的活細胞螢光成像;高內容篩選;CRISPR 敲入驗證研究;核運輸抑制劑評估 |
特徵
| 年齡 | 30年 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 族裔 | 非裔美國人 |
| 形態學 | 呈馬賽克狀石塊形狀的類上皮細胞 |
| 細胞類型 | 上皮細胞 |
| 生長特性 | 依附者 |
監管數據
| 引用 | HK-CRISPR-Nup188-mEGFP(Cytion 型號 300657) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Cellosaurus 編號 | 未指定(HK-CRISPR-Nup188-mEGFP 是一種經 CRISPR 修飾的 HeLa Kyoto 衍生物;親本為 HeLa Kyoto CVCL_1922) |
| 存款人 | 艾倫伯格實驗室(EMBL) |
| 轉基因狀態 | GMO-S1:此 HeLa Kyoto 細胞系在 Nup188 基因座上透過 CRISPR 技術進行了 mEGFP 敲入,從而能夠觀察核孔支架的動態變化。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類可能有所不同。 |
生物分子資料
| 蛋白質表達 | Nup188,mEGFP-tag |
|---|
處理方式
| 培養基 | DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a) |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS) |
| 解離試劑 | Accutase |
| 傳代培養 | 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
|
| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
|---|
分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 300657-171123 | 分析證明書 | 23. May. 2025 | 300657 |