HEK293-Rpn11-HTBH 細胞
USUSD$800.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | 穩定型 HEK293 細胞-Rpn11-HTBH 是 HEK293 (人類胚胎腎臟 293)細胞系的穩定轉染衍生物,經基因工程改造後可表達帶有標記的 Rpn11(亦稱為 PSMD14 或 POH1),該蛋白質為 26S 蛋白酶體蓋複合體中的去泛素化酶亞基。 Rpn11 是一種 Zn²⁺ 依賴性的 JAMM 結構域去泛素化酶,可在蛋白酶體降解過程中,從與蛋白酶體結合的底物上移除泛素鏈。 HTBH 標籤(六組歷史丁胺酸-TEV-生物素受體肽-六組歷史丁胺酸)可在天然條件下對含有 Rpn11 的複合體進行親和純化,使該細胞系特別適合用於蛋白酶體複合體的純化及相互作用組研究。 此細胞系適用於 26S 蛋白酶體生物學、泛素-蛋白酶體通路(UPS)調控、Rpn11/PSMD14 在蛋白質品質控制中的功能、蛋白酶體組裝與動態,以及蛋白酶體抑制劑作用機制等研究。 它亦可用於親和純化天然蛋白酶體複合體,並作為研究蛋白酶體背景下去泛素酶生物學的模型。HTBH 標記系統可透過基於鏈霉親和素的拉下法,對生物素標記的複合體進行高度嚴格的純化。 穩定型 HEK293 細胞-Rpn11-HTBH 以貼壁培養方式,在添加 10% FBS 及適當篩選抗生素的 DMEM 培養基中維持,並於 37°C、加濕的 5% CO₂ 環境中培養,以維持轉基因表達。 當細胞匯合度達 80–90% 時,使用 Accutase 進行傳代(傳代比例為 1:5 至 1:10)。每 2–3 天更換一次培養基。 |
|---|---|
| 生物體 | 人類 |
| 組織 | 腎臟 |
| 疾病 | 經轉化/永生化的胎兒腎臟(HEK293 背景;Rpn11-HTBH 轉基因) |
| 應用 | 26S 蛋白酶體生物學;Rpn11/PSMD14 功能;泛素-蛋白酶體途徑;蛋白酶體複合體純化;去泛素酶生物學;HTBH-tag 親和純化;蛋白酶體相互作用組研究 |
特徵
| 形態學 | 上皮樣 |
|---|---|
| 細胞類型 | 上皮細胞 |
| 生長特性 | 依附者 |
監管數據
| 引用 | 穩定 HEK293 細胞-Rpn11-HTBH(Cytion 型號 305719) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| 轉基因狀態 | GMO-S1:此 HEK293 衍生物含有穩定整合的 Rpn11-HTBH 表達盒(六組組胺酸-TEV-生物素受體肽-六組組胺酸標記的 Rpn11/PSMD14)。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類可能有所不同。 |
生物分子資料
處理方式
| 培養基 | DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a) |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS) |
| 解離試劑 | 大多數細胞在 PBS 中會脫落,如有需要,請加入 Accutase,於室溫下作用 5 分鐘 |
| 倍增時間 | 約 24 至 36 小時 |
| 傳代培養 | 移除培養基,用不含鈣和鎂的PBS清洗,加入Accutase覆蓋,於室溫下孵育 8–10 分鐘,重新懸浮於培養基中,以 300×g 離心 3 分鐘,棄去上清液,再將細胞接種於新鮮培養基中。 |
| 拆股比例 | 1 至 10 |
| 播種密度 | 2 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm² |
| 流體更新 | 每 2 至 3 天 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。 |
| 細胞解凍與培養 |
|
| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 305719-040526 | 分析證明書 | 24. Jun. 2026 | 305719 |