HCT116-Luc 細胞
USUSD$800.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | HCT 116-Luc 是人類結直腸癌細胞系 HCT 116 的螢火蟲螢光素酶表達衍生物。 該細胞系是透過轉導含有螢火蟲螢光素酶(源自 Photinus pyralis)及嘌呤黴素抗性基因片段(pac)的構建體而建立,因此報告基因的表達屬構成性表達,而非取決於特定代謝途徑。 因此,生物發光訊號與活細胞數成正比,這使得該模型適合用於體內腫瘤負荷的無創追蹤,以及體外細胞存活率和增殖率的快速、基於培養板的定量分析。 親本 HCT 116 細胞系在此衍生物中保留了其特徵性表徵,包括伴隨 DNA 錯配修復缺陷的微衛星不穩定性、野生型 TP53 以及近二倍體的核型。其突變背景包含 KRAS p.Gly13Asp、 PIK3CA p.His1047Arg、可穩定 β-catenin 並驅動持續性 Wnt 訊號傳導的異合子 CTNNB1 p.Ser45del,以及 TGFBR2 和 ACVR2A 中常見於 MSI 結直腸腫瘤的純合子移碼突變。 此外,CDKN2A、EP300、BRCA2 及 PPM1D 基因中亦存在其他變異。報告基因的穩定整合,使得在同一隻動物身上對原位及皮下異種移植瘤進行縱向成像成為可能,從而減少了研究群體規模,並免除了在每個時間點進行終點評估的必要。 在常規擴增過程中,採用普魯邁辛篩選以維持轉基因。 該細胞系廣泛應用於腫瘤學前臨床研究、細胞毒性藥物與靶向藥物的療效研究、轉移與腫瘤歸巢模型,以及高通量細胞毒性篩選——在這些應用中,發光讀數所提供的動態範圍比比色法更廣。 由於螢火蟲螢光酶的表達不受誘導性控制,其訊號反映的是細胞數量和代謝狀態,而非特定途徑的活性;因此,改變 ATP 水平或細胞代謝的化合物,即使不殺死細胞,仍可能影響發光。 建議採用正交存活率檢測進行確認,且在解讀對 DNA 損傷劑及免疫調節治療的反應時,應考量 HCT 116 細胞具有錯配修復缺陷的背景。 |
|---|---|
| 生物體 | 人類 |
| 組織 | 冒號 |
| 疾病 | 結腸癌 |
特徵
| 年齡 | 48年 |
|---|---|
| 性別 | 男性 |
| 族裔 | 高加索人 |
| 形態學 | 上皮樣 |
| 生長特性 | 依附者 |
監管數據
| 引用 | HCT116-Luc(Cytion 型號 305787) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_C8WT |
| 轉基因狀態 | GMO-S1:此細胞系含有透過複製缺陷型慢病毒轉導導入、已穩定整合的螢火蟲螢光素酶報告基因片段(Luc2,經密碼子優化)。 由此產生的多克隆細胞群在嘌呤酶篩選(1–5 µg/mL)條件下維持。需採用 S1 級別的生物安全防護措施。此分類僅適用於德國境內,其他地區的分類標準可能有所不同。 |
生物分子資料
| 抗原表達 | Luc2(螢火蟲,密碼子優化) |
|---|---|
| 突變譜 | 突變:p.Lys437Argfs*5,純合子;突變:p.Ile2675Aspfs*6,雜合子;突變:p.Arg24Serfs*20,雜合子; 突變:p.Ser45del,雜合子;突變:p.Met1470Cysfs*22,雜合子;突變:p.Asn1700Thrfs*9,雜合子; 突變:p.Gly13Asp,雜合子;突變:p.His1047Arg,雜合子;突變:p.Leu450Ter,雜合子;突變:p.Lys128Serfs*35,純合子 |
處理方式
| 培養基 | 麥考伊 5a 培養基,含:3.0 g/L 葡萄糖,含:穩定型谷氨酰胺,含:2.0 mM 丙酮酸鈉,含:2.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820200a) |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS) |
| 解離試劑 | Accutase |
| 播種密度 | 1-3×10⁴/cm² |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
|
| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
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| 產品變體: | 停權 |
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分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 305787-080526 | 分析證明書 | 24. Jun. 2026 | 305787 |
| 305787-080526 | 分析證明書 | 23. Sep. 2026 | 305787 |