HBL-100 細胞
USUSD$395.00*
產品以乾冰冷藏,並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10⁶ 個細胞(適用於貼壁細胞系)或 5 × 10⁶ 個細胞(適用於懸浮細胞系)(詳情請參閱該批次的分析證書)。
一般資訊
| 說明 | HBL-100 是一種人類乳腺上皮細胞系,最初源自一名哺乳期母親的母乳。該母乳於分娩後三天收集,儘管捐贈者並無乳腺病變跡象,且無乳腺癌家族病史,但這些細胞在第 7 代傳代時即呈現異常核型。 該細胞系的顯著特徵在於其能合成少量乳糖,並在受到催乳素或雌激素刺激時,透過增加酪蛋白的產量來作出反應。 透過電子顯微鏡等顯微分析已證實,這些細胞中存在微絨毛、張力纖維及橋粒,突顯其典型的上皮細胞特徵。 然而,HBL-100 細胞系在鑑定與特性描述方面遭遇了重大問題。研究發現該細胞系含有 Y 染色體,這表明其鑑定存在錯誤——因為該細胞系最初被認為源自女性。 此外,該細胞系中存在 SV40 基因組序列,這與先前認為其為自發性永生化的觀點相矛盾,進一步增加了複雜性。這些發現引發了關於 HBL-100 來源及其遺傳組成的爭議,使得在未對其特徵與來源進行徹底驗證之前,該細胞系成為一項具爭議性的研究對象。 |
|---|---|
| 生物體 | 人類 |
| 組織 | 乳房 |
| 疾病 | 癌 |
| 同義詞 | HBL 100、HBL100 |
特徵
| 年齡 | 27年 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 族裔 | 高加索人 |
| 形態學 | 上皮樣 |
| 生長特性 | 單層,貼壁型 |
監管數據
| 引用 | HBL-100(Cytion 型號 300178) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_4362 |
生物分子資料
| 抗原表達 | HLA A1、A10、A11、B7、B8 |
|---|---|
| 同工酶 | G6PD、B、PGM1、1、PGM3、2、ES-D、1、Me-2、0、GLO-1、2、AK-1、1-2、表型頻率積:0.0008 |
| 致瘤性 | 是的,在裸鼠身上。當傳代數低於 35 時,該菌株在裸鼠身上不具致瘤性,但在軟瓊脂中可形成菌落。據報導,當傳代數超過 35 時,其致瘤性會增加。 |
| 病毒 | 這些細胞內含一個串聯整合的 SV40 基因組;據報導,它們可能還含有一種 D 型逆轉錄病毒,該病毒與梅森-輝瑞猴病毒(MPMV)相似或完全相同。 |
| 逆轉錄酶 | 正向 |
| 倍性狀態 | 非整倍體 |
| MSI 狀態 | 穩定版 (MSS) |
| 核型分析 | 該莖系染色體數接近三倍體,模式數為 67 條染色體,其中 2S 成分佔 0.6%。大多數染色體組由約 39 條正常染色體和 28 條標記染色體組成。 諸如 2q、11q+、11q、t(2q.12)、t(2q.5q?)、t(6p?.16)、16pt 以及許多其他標記,在大多數中期相中均常見。 正常第11、14、15及16號染色體缺失;第2、12、17及19號染色體呈單體性,而X染色體則為雙體性。 針對牙釉質蛋白(amelogenin)進行的 DNA 分析——這是一種性染色體特異性 PCR 檢測,可區分 X 染色體特異性產物與 Y 染色體特異性產物——顯示,在這條推定源自女性的細胞系中存在 Y 染色體。 透過 QM 染色、C 帶染色及 FISH(使用針對人類 Y 染色體的全染色體塗色探針)等方法,確認了上述一般性發現。 |
處理方式
| 培養基 | 麥考伊 5a 培養基,含:3.0 g/L 葡萄糖,含:穩定型谷氨酰胺,含:2.0 mM 丙酮酸鈉,含:2.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820200a) |
|---|---|
| 營養補充品 | 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS) |
| 解離試劑 | Accutase |
| 傳代培養 | 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。 |
| 播種密度 | 1 × 10⁴ 個細胞/cm² |
| 流體更新 | 每週 2 至 3 次 |
| 解凍後的恢復 | 解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
|
| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
|---|
分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 300178-619 | 分析證明書 | 23. May. 2025 | 300178 |