CHO-K1 細胞(懸浮培養適應型)
一般資訊
| 說明 | CHO-K1 細胞是源自 CHO 細胞系的亞系,該細胞系最初於 1950 年代初期由中國倉鼠卵巢建立。CHO-K1 細胞廣泛應用於治療性單克隆抗體及其他生物製劑的生產。 該細胞系在生物製劑蛋白質生產及疫苗製造中被廣泛應用,這歸因於其真核細胞的特性,此特性能確保蛋白質正確摺疊、組裝,並進行糖基化等翻譯後修飾,這些過程皆會影響所生產蛋白質的穩定性、療效及安全性。 在重組蛋白生產領域,CHO-K1 細胞系被用於表達多種蛋白質,包括單克隆抗體、生長因子、細胞因子及酶。這些蛋白質可應用於治療、診斷檢測及疫苗製劑。 CHO-K1 細胞具有強勁的生長速率,並能適應各種培養條件,包括懸浮培養和貼壁培養,使其在大規模生物生產過程中極具價值。 該細胞線具有高度的遺傳穩定性,並被用於開發穩定細胞系,因其能高效擴增及表達外源基因,這對於高產量生產重組蛋白至關重要。 中國倉鼠 CHO-K1 細胞可輕鬆轉染多種載體以進行基因表達,從而促進基因編輯或基因敲低。這種靈活性使研究人員能夠在 CHO-K1 宿主細胞中導入特定基因、沉默基因,甚至利用 CRISPR-Cas9 等技術進行靶向基因編輯。 總而言之,中國倉鼠 CHO-K1 細胞與 CHO 細胞在生物技術研究及生物製藥生產中扮演關鍵角色,為基因功能研究及重組蛋白的大規模生產提供了多功能的平台。 |
|---|---|
| 生物體 | 中國倉鼠 |
| 組織 | 卵巢 |
| 應用 | 該細胞系是毒理學、工業生物技術及生物生產領域的最佳選擇。 |
| 同義詞 | CHO K1、CHOK1、CHO 細胞克隆 K1、GM15452 |
特徵
| 年齡 | 成人 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 形態學 | 上皮樣 |
| 生長特性 | 停權 |
監管數據
| 引用 | 經調整的 CHO-K1 懸浮培養液(Cytion 型號 603486) |
|---|---|
| 生物安全等級 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| Cellosaurus 編號 | CVCL_0214 |
生物分子資料
| 對病毒的易感性 | 水疱性口炎(印第安納州),蓋塔病毒 抗病毒性:小兒麻痺病毒 2 型、莫多克病毒、鈕扣柳病毒 |
|---|---|
| 逆轉錄酶 | 否 |
| 核型分析 | 50 個細胞的染色體頻率分佈:2n = 22。該系號為次二倍體 |
處理方式
| 培養基 | ThermoFisher 抗體稀釋液 (CD CHO),無血清配方,開瓶即用。 |
|---|---|
| 營養補充品 | L-谷氨醯胺:使用前需將濃度調整至最終 8 mM(通常每公升 200 mM 母液需添加 40 毫升)。此步驟對於 CD CHO 細胞而言是必須的。請向細胞懸浮液中加入 1:100 比例的抗結塊劑及 1:100 比例的 HT 補充劑。 |
| 解離試劑 | 無 |
| 倍增時間 | 22 小時 |
| 傳代培養 | 透過移液管上下吸放,輕柔地將燒瓶中的細胞懸浮液均質化,然後取一份具代表性的樣本,以測定每毫升的細胞密度。使用新鮮培養基將懸浮液稀釋至細胞濃度為 1 × 10⁵ 個細胞/毫升,並將調整後的懸浮液分裝至新的燒瓶中,以供進一步培養。 |
| 播種密度 | 4 × 10⁵ 個細胞/毫升 |
| 流體更新 | 每週 2 至 3 次 |
| 冷凍培養基 | 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。 |
| 細胞解凍與培養 |
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| 培養環境 | 37°C,5% CO₂,加濕環境。細胞必須置於帶擋板的埃倫邁耶搖瓶中,以每分鐘 110 轉的速度在軌道搖床上記育。 |
| 運送條款 | 冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。 |
| 儲存條件 | 若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。 |
品質控制與分子分析
| 不孕症 | 透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。 為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。 |
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分析證明書 (CoA)
| 批次編號 | 證書類型 | 日期 | 型號 |
|---|---|---|---|
| 603486-160126 | 分析證明書 | 26. Mar. 2026 | 603480 |