Vero 細胞：在病毒研究與疫苗創新領域開闢新路

Vero 細胞系是一種源自非洲綠猴腎上皮細胞的不朽哺乳動物細胞模型，在病毒學、微生物學以及細胞與分子生物學研究領域中處於最前沿。 其廣泛應用涵蓋疫苗開發、藥物篩選，以及病毒與寄生蟲生物學、腫瘤免疫學和免疫治療策略的探索。

Vero 細胞的起源與主要特徵

深入探討 Vero 這樣的細胞系時，往往會引發若干疑問：Vero 細胞究竟是什麼？Vero 細胞系是如何建立的？「Vero」這個名稱背後有何故事？本節旨在闡明 Vero 細胞的起源及其主要特性。

Vero 細胞系的起源可追溯至 1962 年，源自非洲綠猴的腎上皮細胞。該細胞系由日本千葉大學的 Y. Kawakita 和 Yasumura 培育而成。 「Vero」一詞源自世界語（Esperanto）中的「Verda reno」，意為「綠色腎臟」，而「Vero」一詞也蘊含著「真理」的意涵。

Vero 細胞通常形成單層，但也能適應懸浮培養，並呈現上皮樣結構。這些細胞的特徵是形狀呈圓形至細長狀，平均直徑約為 17 µm。 值得注意的是，Vero 細胞的染色體數目為次二倍體，約 66% 的細胞群體其模式染色體數為 58，但一小部分（1.7%）細胞則存在染色體數目較高的變異。

Vero 細胞克隆及其獨特特性

源自 Vero 細胞系的各異克隆展現出獨特特徵，使其有別於原始細胞系。其中，有兩個值得注意的 Vero 細胞克隆為：

• Vero E6 細胞系：亦稱為 Vero C1008，此克隆源自 Vero 76 細胞，由 P.J. Price 於 1979 年透過微孔板稀釋技術分離出來。 Vero E6 細胞特別適合培養複製速度較慢的病毒。

• Vero 76 細胞：源自 1968 年一隻非洲綠猴的腎臟，這些細胞保留了 Vero 細胞特有的上皮形態。

這些 Vero 細胞的變異株，連同其親本系，持續在推動病毒學研究及開發醫療干預措施方面發揮關鍵作用，彰顯了其在科學界的重要性。

培養資訊

培養 Vero 細胞（一種猴細胞系）時，必須熟悉特定參數，例如倍增時間、接種密度以及適當的培養基。

• 細胞倍增時間：Vero 細胞的倍增時間約為 24 小時。

• 黏附性：Vero 細胞會附著於表面，培養時通常會形成單層。

• 接種密度：建議初始接種密度為 1 × 10⁴ 細胞/cm²。若要培養貼壁型 Vero 細胞，應先以 PBS 洗滌細胞，並使用 Accutase 處理以使其脫附。 脫附後，將細胞離心，用新鮮培養基重懸，並轉移至新的培養瓶中。

• 生長培養基：Ham’s F12 和 DMEM 均適合作為 Vero 細胞的培養基。為促進最佳生長，應在其中添加 2.5 mM L-谷氨醯胺及 5% 胎牛血清 (FBS)。培養基應每週更換兩至三次。

• 培養條件：Vero 細胞在 37°C、含 5% CO₂ 且加濕的環境中生長最佳。

• 儲存：若需長期儲存，Vero 細胞應保存在低於 -150°C 的溫度下，可存放於超低溫冷凍櫃或液態氮的氣相中。

• 冷凍程序與培養基：進行冷凍保存時，請使用 CM-1 或 CM-ACF，或添加 FBS 和 DMSO 的生長培養基作為冷凍培養基。採用緩慢冷凍技術，以每分鐘 1°C 的速度逐步降低溫度。

• 解凍過程：將容器浸入 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，以解凍 Vero 細胞。 隨後，將細胞稀釋於新鮮培養基中，離心去除冷凍保護劑，再懸浮於新鮮生長培養基中，並置於新燒瓶中進行恢復與培養。

• 生物安全等級：Vero 細胞應在符合生物安全等級 1 要求的實驗室中進行操作。

Vero 細胞系在研究中的應用

Vero 細胞系在細胞生物學和病毒學領域有眾多研究應用。本文將探討其中一些具體應用。

Vero 細胞在病毒研究與疫苗生產中的應用

Vero 細胞源自非洲綠猴腎細胞，已成為多種病毒疫苗（包括小兒麻痺病毒和日本腦炎病毒）生物製程開發中的重要基礎。 其既能適應貼壁培養亦能適應懸浮培養的特性，以及廣泛的病毒支持能力（包括對小型反芻動物病毒等病原體），凸顯了其在病毒分離與疫苗開發中的重要性。

眾多研究已利用 Vero 細胞生產人類疫苗。例如，2019 年發表的一項重要研究，便展示了 Vero 細胞在黃熱病毒滅活疫苗開發中的應用 [2]。

Vero細胞常被用於病毒感染研究，例如2020年的一項研究，該研究透過讓Vero細胞感染不同分離株的SARS-CoV-2病毒，以探究該病毒的增殖特性[4]。同樣地，另一項研究則利用Vero細胞培養來探究細胞對SARS-CoV-2感染的反應[5]。

Vero 細胞在組織工程與上游生物製程開發中的角色

除了疫苗生產之外，Vero細胞在組織工程及更廣泛的生物製程開發領域中亦發揮重要作用，這凸顯了持續研究其特性與應用之必要性。選擇合適的Vero細胞亞系，是充分發揮其在生物技術與製藥產業潛力的關鍵。

Vero 細胞在藥物療效與安全性測試中的應用

Vero 細胞常被用於藥物測試，以評估藥用化合物的有效性和安全性。在研究各種藥物和治療劑的細胞毒性作用時，這些細胞通常被視為正常腎細胞的標準模型。 例如，一項研究比較了 Terminalia avicennioides 植物根部萃取物對肝癌細胞系 HepG2 以及源自猴腎上皮的 Vero 細胞的影響，結果發現該萃取物對癌細胞的損害程度大於對正常細胞的損害。

Vero細胞的局限性

儘管 Vero 細胞被廣泛應用，但仍存在某些限制，例如 Vero 毒素的產生以及可能影響特定應用的基因組改變。了解 Vero 細胞（包括 Vero 系 F6）的具體亞系與基因組特徵，對於優化其在各種生物製程中的應用至關重要。

探索我們的 Vero 細胞及其衍生物，用於開創性的研究應用

研究論文

以下是近期以 Vero 細胞為主題且被引用次數最多的研究論文。

Vero細胞適應懸浮培養以在不同無血清培養基中生產狂犬病毒

這項發表於《疫苗期刊》（2019年）的研究，將 Vero 細胞適應懸浮培養，並利用各種無血清培養基生產高滴度的狂犬病毒。

Vero細胞中弓形蟲（Toxoplasma gondii）對波斯藤（Tinospora crispa）乙醇萃取物的敏感性

這篇論文於2019年發表於《循證補充與替代醫學》期刊。 該研究指出，植物 Tinospora crispa 的乙醇萃取物對弓形蟲（Toxoplasma gondii）寄生蟲具有抑制作用。然而，對宿主細胞（Vero 細胞系）而言則屬安全。

Colchicum baytopiorum 葉提取物對 C-4 I 及 Vero 細胞系的細胞毒性與細胞死亡途徑之影響

本文於2021年發表於《巴爾幹腫瘤學聯盟期刊》。在這項研究中，Ozlem Dagdeviren Ozsoylemez 與 Gul Ozcan 探討了 Colchicum baytopiorum 葉提取物對 C-4I 及 Vero 細胞系的細胞毒性作用。

白藜蘆醇抑制嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒 2 型（SARS-CoV-2）在培養 Vero 細胞中的複製

這項發表於《植物療法研究》（2021年）的研究，利用感染 SARS-CoV-2 的 Vero 細胞，探討白藜蘆醇對病毒複製的治療效果。

親脂性他汀類藥物可抑制 Vero 細胞中的茲卡病毒產生

這篇發表於《自然科學報告》（2019年）的論文提出，親脂性他汀類藥物（即西立伐他汀、洛伐他汀、富伐他汀、辛伐他汀和美伐他汀）可阻礙寨卡病毒在 Vero 細胞中的產生。

Vero 細胞相關資源：操作手冊、影片等

• Vero細胞轉染：此連結將引導您了解Vero細胞的轉染操作流程。
• Vero 細胞系的轉染：此影片說明 Vero 細胞系的轉染操作流程。
• Vero 細胞的傳代：此影片介紹了針對貼壁細胞系的一般傳代建議。

細胞培養操作指南

• Vero 細胞培養：此網站提供一份說明詳盡的 Vero 細胞培養操作指南。
• Vero 細胞培養：此文件可協助您了解 Vero 細胞的擴增、維持及冷凍保存操作流程。

參考文獻

1. Ammerman, N.C.、M. Beier‐Sexton 及 A.F. Azad，《Vero 細胞系的培養與維護》。《微生物學現行協議》，2008 年，11(1)：第 A. 4E. 1–A. 4E. 7 頁。
2. Pato, T.P. 等，為製造滅活疫苗而純化 Vero 細胞中產生的黃熱病病毒。《疫苗》，2019 年，37(24)：第 3214–3220 頁。
3. Aliyu-Amoo, H.等人，Terminalia avicennioides（Combretaceae）Guill and Perr. 根部萃取物及分餾物對HepG2與Vero細胞系的抗增殖作用。 《臨床植物科學》，2021年，7(1)：第1–7頁。
4. Yao, P. 等，SARS-CoV-2 在 Vero 細胞中的分離與生長特性。《中國病毒學雜誌》，2020 年，35(3)：第 348–350 頁。
5. Park, B.K.等人，SARS-CoV-2 感染後 Calu-3 細胞與 Vero 細胞中的差異性訊號傳導與病毒產量。《生物分子與治療學》，2021，29(3)：第 273 頁。