Neuro-2a 細胞系
Neuro-2a 是一種源自小鼠的神經細胞系，廣泛應用於神經科學研究。這些細胞主要用於研究神經發育、分化、神經毒性、細胞訊號傳導路徑以及軸突生長。此外，它們亦被用於藥物開發與篩選。
本文將聚焦於 Neuro-2a 神經母細胞瘤細胞的重要面向，以協助您在開始使用該細胞進行研究前做好準備。內容主要涵蓋：
- Neuro-2a 細胞的一般特性與來源
- Neuro-2a 細胞系的培養資訊
- Neuro-2a 細胞系的優點與缺點
- Neuro-2a 細胞系的研究應用
- 以 Neuro-2a 細胞為主題的研究文獻
- Neuro-2a 細胞相關資源：操作手冊、影片及其他
Neuro-2a 細胞的一般特性與來源
本文此部分將介紹 Neuro-2a 細胞系的背景與基本特性，這些是進行相關實驗前必須了解的關鍵資訊。您將在此了解：什麼是 Neuro-2a 細胞系？ Neuro-2a 細胞系的來源為何？ 何謂 Neuro-2a 細胞分化？Neuro-2a 細胞的大小為何？Neuro-2a 細胞的形態為何？
- Neuro-2a 細胞源自一隻白化小鼠（A 品系）的自發性腫瘤（神經母細胞瘤）。該細胞系由 R.J. Klebe 與 F.H. Ruddle 建立。
- Neuro-2a 神經母細胞瘤細胞呈現神經元及阿米巴狀幹細胞的形態。
- Neuro-2a 細胞的高度為 12 微米 [1]。
- Neuro-2a 細胞的染色體數目範圍為 59 至 193，最常見數目為 95。這些神經母細胞瘤細胞的核型在 94 至 98 條染色體的範圍內不穩定。
Neuro-2a 細胞系培養資訊
Neuro-2a 細胞廣泛應用於神經科學研究實驗室。在操作這些細胞之前，您應先了解以下所述的關鍵細胞培養資訊。這將有助於您更輕鬆地進行操作。您將了解：何謂 Neuro-2a 細胞培養基？如何培養 Neuro-2a 細胞？ Neuro-2a 細胞的倍增時間是多少？ Neuro-2a 的接種密度是多少？Neuro-2a 細胞培養流程為何？Neuro-2a 細胞培養基是什麼？
培養 Neuro-2a 細胞的重點
倍增時間：
Neuro-2a 細胞的倍增時間約為 70 小時。
貼壁或懸浮：
Neuro-2a 屬於貼壁型細胞系。
接種密度：
Neuro-2a 細胞系的最佳接種密度為 1 × 10⁴ 細胞/cm²。接種時，需先以不含鎂和鈣的磷酸鹽緩衝生理鹽水（1×）洗滌細胞。 隨後加入傳代溶液（Accutase），並於室溫下孵育 8 至 10 分鐘。細胞解離後，加入新鮮培養基，並將細胞離心。將收集到的細胞沉澱物小心重懸，再將細胞倒入培養容器中進行培養。
生長培養基：
Neuro-2a 細胞的培養使用 EMEM 培養基。該培養基含有 10% 胎牛血清（FBS）、2 mM L-谷氨醯胺、1.5 g/L 碳酸氫鈉（NaHCO₃）、EBSS、1 mM 丙酮酸鈉，以及 NEAA，以促進細胞理想生長。 培養基應每週更換 1 至 2 次。
培養條件：
Neuro-2a 細胞培養需置於 37°C 加濕培養箱中，並連接 5% CO₂ 供應系統。
儲存：
細胞應儲存於超低溫電動冷凍櫃中，溫度需低於 -150 °C，或置於液態氮的氣相中進行長期保存。
冷凍流程與培養基：
使用 CM-1 或 CM-ACF 培養基來冷凍 Neuro-2a 細胞。細胞透過每分鐘溫度僅下降 1 °C 的緩慢冷凍過程進行冷凍。此方法可保護細胞免受冷凍衝擊，並維持其存活率。
解凍程序：
要解凍冷凍培養物，需將試管置於 37 °C 水浴中 40 至 60 秒，直至僅剩一小塊冰塊。 接著，加入培養基並對細胞進行離心處理。此步驟有助於去除冷凍培養基中的成分。隨後將細胞沉澱重新懸浮，並將細胞轉移至裝有培養基的新培養瓶中。之後，將細胞置於 37 °C 的培養箱中，至少培養 24 小時。
生物安全等級：
處理及維護 Neuro-2a 細胞培養時，必須在生物安全等級 1 的實驗室環境中進行。
Neuro-2a 細胞系的優點與缺點
Neuro-2a 細胞具備若干優點與缺點，使其有別於其他神經元細胞系。此處列出該細胞系的一些顯著優點與缺點。
優點
Neuro-2a 小鼠神經母細胞瘤細胞系的優點包括：
-
易於養護：
Neuro-2a 細胞系無需複雜或繁瑣的細胞培養程序，在研究實驗室中便於培養與維護。
-
體外神經元細胞模型：
Neuro-2a 是一種便捷的神經元細胞模型，廣泛應用於神經元發育與分化研究中。
缺點
Neuro-2a 細胞的缺點包括：
-
小鼠來源：
Neuro-2a 源自小鼠，由於小鼠與人類的生物學特性可能存在顯著差異，研究人員在將小鼠研究結果外推至人類健康與疾病時應謹慎行事。
Neuro-2a 細胞系的研究應用
Neuro-2a 細胞在神經科學研究領域具有廣泛的應用。以下將探討此細胞系幾項具潛力的應用：
- 神經發育：Neuro-2a 是一種體外神經元細胞模型，廣泛用於研究神經發育及相關過程，例如分化、軸突生長和突觸形成。 一項於 2020 年進行的研究利用 Neuro-2a 細胞，探討微小 RNA-124 在視黃酸誘導的神經元細胞分化中的作用 [2]。 另一項研究則探討了神經母細胞瘤細胞系（N2A）中 Neuro-2a 的視黃酸受體 γ（RARG）與 miRNA-124 的表達情況。該研究提出，RARG 會被 miR-124 靶向，並抑制神經突的生長 [3]。
- 神經毒性：Neuro-2a 亦用於評估藥物、化學物質或環境因素對神經細胞的毒性影響。 例如，尹志紅及其同事進行的一項研究，利用 Neuro-2a 細胞探究了環境化學物質雙酚 A（BPA）的神經毒性。他們觀察到，BPA 透過破壞神經細胞及其突觸的完整性，從而抑制神經細胞的分化與增殖 [4]。
- 藥物篩選：Neuro-2a 細胞亦被用於評估多種藥物、化合物及天然產物的治療活性。 例如，某項研究利用 Neuro-2a 細胞，探討了銀杏葉植物萃取物的抗氧化潛力。此外，該研究指出，此萃取物能減少 Aβ 聚集，並可能成為治療阿茲海默症的潛在療法 [5]。
5. 以 Neuro-2a 細胞為主題的研究論文
以下是一些以 Neuro-2a 細胞系為研究對象的有趣論文。
來自黑胡椒（Piper nigrum）的胡椒鹼樣醛酰胺可誘導 BDNF 啟動子並促進 Neuro-2a 細胞的神經突起生長
這項發表於 2018 年《天然藥物期刊》（Journal of Natural Medicines）的研究，探討了從白胡椒（P. nigrum）中分離出的醛酰胺對 Neuro-2a 神經元細胞的治療效果。
這項發表於2020年《中國生物化學與生物物理學報》的研究提出，Nkx2.1基因透過調節Shh訊號傳導級聯，在小鼠腦部發育中扮演重要角色。
雙酚A暴露會誘發Neuro-2a細胞中與突觸及細胞骨架功能障礙相關的神經毒性
這篇發表於《毒理學與工業衛生》（2023年）的文章指出，環境化學物質雙酚A會觸發Neuro-2a細胞的神經毒性，並導致其突觸與細胞骨架功能失調。
六肽雷林透過調控 Neuro-2A 細胞中的 MAPK 與 PI3K/Akt 路徑，抑制過氧化氫誘導的凋亡毒性
這篇發表於《藥學》（2021年）的論文提出，藥物六肽雷林可調控神經母細胞瘤細胞（Neuro-2a）中的PI3K/AKT與MAPK級聯反應，並抑制過氧化氫誘導的Neuro-2a細胞凋亡。
印度醋栗（Emblica officinalis）果實的乙醇萃取物可抑制小膠質細胞的神經發炎，並促進 Neuro-2A 細胞的神經突起生長
這篇發表於《循證補充與替代醫學》（2021年）的研究論文指出，印度醋栗果實乙醇萃取物能抑制Neuro-2a細胞中的神經發炎反應，因此對神經發炎性疾病具有治療效益。
Neuro-2a 細胞相關資源：操作手冊、影片及其他
以下是關於 Neuro-2a 細胞的線上資源，其中包括 Neuro-2a 細胞培養與轉染操作手冊。
- Neuro-2a 轉染操作手冊：Neuro-2a 是一種適用的轉染宿主。此連結將引導您了解該細胞系的轉染操作手冊。Neuro-2a 的轉染效率會因試劑而異。
以下連結包含 Neuro-2a 細胞培養操作指南。
- Neuro-2a 細胞培養操作手冊：此連結將協助您了解 Neuro-2a 細胞的傳代培養操作手冊。
- Neuro-2a 細胞：該網站提供關於 Neuro-2a 細胞培養基、接種密度，以及亞培養、冷凍保存與增殖性培養操作流程的全面資訊。
參考文獻
- Lulevich, V. 等，單細胞力學提供了一種敏感且定量的方法，用於探測澱粉樣-β肽與神經元細胞之間的相互作用。《美國國家科學院院刊》（Proc Natl Acad Sci U S A），2010年，107(31)：第13872-7頁。
- You, Q. 等，miR-124 在調節視黃酸誘導的 Neuro-2A 細胞分化中的作用。《神經再生研究》（Neural Regen Res），2020 年，15(6)：第 1133-1139 頁。
- 蘇，X.等人，微RNA-124以視黃酸受體γ為靶點並抑制神經突起生長。《神經藥理學》，2020年，163期：第107657頁。
- Yin, Z.等人，雙酚A暴露誘導的神經毒性及其與Neuro-2A細胞中突觸與細胞骨架的關聯。《體外毒理學》，2020年，第67卷：第104911頁。
- 陳，L.等人，銀杏葉萃取物（EGb）可抑制過度表達APPsw之Neuro-2A細胞中的氧化壓力。《國際生物醫學研究》，2019年。