A375-GFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USUSD$800.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 305665

安全資料表

產品說明書

分析證明書 (CoA)

說明	A375-GFP 是人類惡性黑色素瘤細胞系 A375 的基因工程變異株，可穩定表達增強型綠色螢光蛋白（eGFP）。親本 A375 細胞系源自一名成人患者的皮膚黑色素瘤腫瘤，因其攜帶 BRAF V600E 突變，故被廣泛用作皮膚黑色素瘤的模型，特別適用於涉及致癌性 BRAF 訊號傳導的研究。此突變會導致 MAPK/ERK 路徑的持續活化，從而驅動細胞增殖與存活，使 A375 細胞成為研究 BRAF 及 MEK 抑制劑等標靶療法的重要模型。此表達 GFP 的衍生細胞系在保留這些分子與表型特徵的同時，亦能應用於螢光相關研究。透過穩定整合 eGFP 報告基因，可在體外與體內系統中對 A375-GFP 細胞進行即時可視化觀察。螢光成像技術有助於監測細胞增殖、遷移、侵襲及形態變化，並能追蹤異種移植模型中的腫瘤生長與轉移擴散。相較於早期 GFP 構建體，這種增強型 GFP 變體具有更高的亮度與穩定性，即使在細胞數量較低的情況下也能實現高靈敏度的檢測。這使得 A375-GFP 在共培養實驗、高內容成像平台，以及需要精確空間解析度來觀察腫瘤細胞行為的研究中尤為實用。 A375-GFP 保留了親代黑色素瘤細胞系的侵襲性與增殖性表型，包括對 MAPK 路徑抑制劑的反應性，以及在實驗模型中的侵襲與轉移能力。加入 GFP 擴展了其在藥物篩選、活細胞成像及腫瘤與微環境相互作用研究中的應用範圍。與其他標記有報告基因的細胞系一樣，建議針對特定實驗應用，驗證螢光在各傳代過程中的穩定性與一致性。基因改造：透過複製無能的慢病毒轉導進行穩定改造，以表達 ZsGreen1 綠色螢光蛋白報告基因；在嘌呤酶篩選（1–5 µg/mL）下維持為多克隆細胞群。S1/BSL-1 防護等級。
生物體	人類
組織	腿、皮膚
疾病	無色素性黑色素瘤

年齡	54年
性別	女性
族裔	高加索人
生長特性	依附者

引用	A375-GFP（Cytion 型號 305665）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_QZ67
轉基因狀態	GMO-S1：此細胞系含有透過複製缺陷型慢病毒轉導所導入、穩定整合的 ZsGreen1 綠色螢光蛋白報告基因。由此產生的多克隆細胞群在嘌呤酶（1–5 µg/mL）篩選條件下維持。必須採用 S1 級生物安全防護措施。此分類僅適用於德國境內，其他地區的分類標準可能有所不同。

抗原表達	ZsGreen1（綠色螢光蛋白）
突變譜	突變：BRAF，單一突變，p.Val600Glu (c.1799T>A)，純合子（源自親代細胞系）。突變，CDKN2A，簡單型，p.Glu61Ter (c.181G>T) (p.Gly75Val, c.224G>T)，純合子（源自親代細胞系）。突變，CDKN2A，簡單型，p.Glu69Ter (c.205G>T) (p.Gly83Val, c.248G>T)，純合子（源自親本細胞系）。突變，TERT，簡單型，c.1-146C>T (c.250C>T) (C250T)，未指定，註：位於啟動子區域（源自親代細胞系）。

培養基	DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
營養補充品	在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
解離試劑	Accutase
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
播種密度	1 至 3 × 10^⁴ ^個細胞/cm^²
流體更新	每週 2 至 3 次
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜（DMSO），以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥中進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至裝有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 200 x g 離心 5 分鐘，小心地倒掉含有冷凍介質的上清液。請依照「解凍後恢復」章節所述的程序操作
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

批次編號	證書類型	日期	型號
305665-200426	分析證明書	24. Jun. 2026	305665

A375-GFP

一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析

分析證明書 (CoA)