Células U87MG – Pesquisa sobre glioblastoma utilizando a linha celular U87MG e seu impacto nos estudos sobre câncer cerebral
A U-87 MG, linha celular primária de glioblastoma humano, é amplamente utilizada em pesquisas biológicas. Em particular, essas células são empregadas nos campos da neurociência e da imuno-oncologia.
- Meio de crescimento
- A linha celular U-87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) suplementado com 1,0 g/L de L-glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e 10% de solução de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias.
- Tempo de duplicação
- As células U 87 MG apresentam um tempo de duplicação populacional que varia de 18 a 38 horas.
- Tipo de crescimento
- A U 87 MG é uma linhagem celular aderente. As células possuem formato alongado e crescem em monocamadas.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende a U-87 MG
- Características gerais e origem da linhagem celular U-87 MG
- Informações sobre o cultivo das células U-87 MG
- Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
- Aplicações de pesquisa com as células U-87 MG
- Encomende hoje mesmo sua linha celular de glioma U-87 MG
- Linha celular U-87 MG: Publicações de pesquisa
- Recursos para as células U-87 MG: protocolos, vídeos e muito mais
- Informações sobre a pesquisa com o glioma U-87 MG: perguntas frequentes
- Referências
- Perguntas frequentes
Características gerais e origem da linhagem celular U-87 MG
Esta seção abordará a origem e as características gerais da linhagem celular U-87 MG. Você aprenderá: O que são as células U-87 MG? De onde vêm as células U-87? Qual é a sigla completa de U-87 MG? Qual é o tamanho das células U-87? Qual é a morfologia da linhagem celular U-87 MG?
- A linhagem celular U87 é uma linhagem de glioblastoma, mais especificamente de astrocitoma. Ela foi estabelecida em 1966 na Universidade de Uppsala. As células foram obtidas de um homem caucasiano de 44 anos que sofria de glioblastoma. Essa linha celular é formalmente chamada de U 87 MG, sigla para Uppsala 87 Malignant Glioma.
- As células U 87 MG apresentam morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O diâmetro das células U 87 MG varia entre 12 e 14 µm.
- Essa linhagem celular de glioblastoma humano é hipodiplóide e possui um número modal de cromossomos de 44 em aproximadamente 48% da população celular. No entanto, também existem ploidiões mais elevados em 5,9% da população celular.
Informações sobre o cultivo de células U-87 MG
Antes de trabalhar com células U 87 MG, você deve conhecer os seguintes pontos-chave para a cultura dessas células de glioblastoma. Em particular, você deve saber: Qual é o tempo de duplicação populacional das células U 87 MG? Qual meio é utilizado para a cultura das células U87? Qual é a densidade de semeadura da linhagem celular U-87 MG?
Pontos-chave para a cultura de células U-87 MG
Tempo de duplicação populacional:
As células U 87 MG apresentam um tempo de duplicação populacional que varia de 18 a 38 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A U 87 MG é uma linhagem celular aderente. As células possuem formato alongado e crescem em monocamadas.
Densidade de semeadura:
Recomenda-se que a linha celular de glioblastoma U 87 MG seja semeada a uma densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm². As células U87 aderentes são lavadas com PBS 1x e incubadas com solução de Accutase. Em seguida, as células dissociadas são centrifugadas e recuperadas. As células são cuidadosamente ressuspensas e adicionadas a novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
A linhagem celular U 87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) suplementado com 1,0 g/L de L-glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e 10% de solução de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias.
Condições de crescimento:
As células U-87 MG requerem uma incubadora umidificada com suprimento de 5% de CO₂ e temperatura de 37 °C para um crescimento ideal.
Armazenamento:
As células U87 são mantidas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a temperatura inferior a -150 °C para preservar a viabilidade máxima das células de glioblastoma.
Processo de congelamento e meio:
Os meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF são adequados para o congelamento das células U 87 MG. Recomenda-se um processo de congelamento lento, pois evita que as células sofram qualquer choque e protege a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
Os frascos congelados da linhagem celular U-87 MG são descongelados em banho-maria a 37 °C. As células recebem meio de crescimento, são ressuspensas e transferidas para novos frascos de cultura. Alternativamente, as células U87 podem ser centrifugadas para remoção do meio de congelamento e, em seguida, cultivadas.
Nível de biossegurança:
É necessário o nível de biossegurança 1 para o manuseio de culturas de células U-87 MG.
Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
Quando pensamos em uma linhagem celular, a primeira coisa que nos vem à mente é: quais são as vantagens de usar células U-87 MG? Quais são as desvantagens das células U-87?
Vantagens
As linhagens celulares U-87 MG são amplamente utilizadas em pesquisas. Algumas vantagens associadas a essa linhagem celular são:
Vantagens
- Fácil de cultivar: as células U-87 MG são fáceis de manter em cultura. Elas não exigem requisitos de cultura celular exigentes ou complicados.
- Homogeneidade: a U-87 MG é uma linha celular homogênea. A maioria das células de uma população possui a mesma composição genética e, portanto, compartilha características semelhantes. Essas células são utilizadas para o estudo de processos celulares, triagem de medicamentos e testes.
- Bem caracterizada: essa linha celular de glioblastoma é bem caracterizada quanto às características de crescimento, morfologia e expressão gênica, o que a torna uma valiosa ferramenta de pesquisa.
Desvantagens
- Aplicabilidade limitada: A U-87 MG é uma linhagem celular de glioblastoma; portanto, suas aplicações limitam-se principalmente ao estudo de glioblastomas e dos mecanismos moleculares subjacentes. Ela pode não ser adequada para a investigação de outros tipos de câncer.
Aplicações de pesquisa com células U-87 MG
A linhagem celular de glioblastoma U87MG é amplamente utilizada em estudos sobre câncer, particularmente na pesquisa do glioblastoma. Algumas das aplicações de pesquisa das células U 87 MG são:
- Pesquisa em biologia do câncer: A linhagem celular U-87 é utilizada para estudar o crescimento e o desenvolvimento do câncer, os mecanismos moleculares subjacentes, as vias de sinalização e o microambiente tumoral. Um estudo publicado em 2020 utilizou um modelo in vitro de glioblastoma, a linhagem celular U-87 MG, para investigar o gene BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) como alvo terapêutico. Os resultados mostraram que o gene BMAL1 inibe a proliferação, a migração e a invasão das células do glioblastoma ao suprimir a expressão gênica da ciclina B1, da metaloproteinase-9 e da fosfo-AKT [1]. Outra pesquisa realizada em 2019 utilizou a linhagem celular U87 e investigou que a regulação negativa da expressão do fator de transcrição LITAF (fator de necrose tumoral alfa induzido por lipopolissacarídeo) pode aumentar a radiossensibilidade das células de glioma por meio da regulação positiva da via FOXO-1. O LITAF também é conhecido como gene 7 induzido por p53 (PIG7) [2].
- Descoberta e desenvolvimento de medicamentos: as células U-87 MG podem ser utilizadas para fins de triagem e testes de medicamentos, permitindo que os pesquisadores identifiquem novos medicamentos anticâncer em potencial e avaliem sua eficácia e toxicidade. Uma pesquisa utilizou a linhagem celular de glioblastoma U-87 MG para avaliar o potencial anticâncer e antioxidante do extrato de Inula helenium (L.) [3]. Da mesma forma, outra publicação mencionou o uso da linhagem celular U-87 para testar o efeito citotóxico e apoptótico de extratos vegetais [4]. Além disso, uma pesquisa publicada em 2018 estudou o efeito citotóxico de alcalóides sesquiterpênicos extraídos de plantas do gênero Nuphar em linhagens celulares U-87 MG sensíveis e resistentes a medicamentos [5].
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U-87 MG cell line: Research Publications
Here are some prominent research publications featuring U 87 MG cell line.
This article published in Neuroreport 2018 proposed that hypoxia could increase human glioblastoma cells migration and invasion by regulating the PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α signaling pathway.
This study is published in the Frontiers in Pharmacology in 2020. The research findings state that a flavonoid, Eriodictyol, exerts anticancer effects on the U87 cell line and suppresses cell proliferation and metastasis. The compound mediates its antitumor properties by modulating PI3K/Akt/NF-κB pathway.
This research in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) suggests that a Chinese herbal formula called Xihuang pill can induce apoptosis in U87 cells by targeting ROS-activated Akt/mTOR/FOXO1 cascade.
LITAF enhances radiosensitivity of human glioma cells via the FoxO1 pathway
This research paper was published in the Cellular and Molecular Neurobiology journal in 2019. The study proposed that a transcription factor, LITAF, downregulates and enhances the radiosensitivity of glioma cells by regulating the FOXO-1 signalling pathway.
This article was published in Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). The researchers used U 87 MG cells to investigate the cytotoxic effect of curcumin-loaded PLGA nanoparticles.
Resources for U-87 MG cells: Protocols, Videos, and More
U87MG glioblastoma cell line is used in many cancer research laboratories. A few resources featuring this cell line are:
- Transfection of U87 cell line: This document will describe to you a transfection protocol for U 87 MG cells.
- U 87 MG cell line transfection: This video is a tutorial explaining step by step transfection protocol of U87 cells.
The resource for the cell culture protocol of U87 cells is listed below:
- U87 MG cells: This link contains basic information about U 87 MG cell line. It includes brief cell splitting, freezing, and cell thawing protocols.
Glioma cell lines, such as U87 glioblastoma cells, are cultured cells derived from human gliomas used extensively in cancer research to study tumor biology, genetics, and drug responses. They serve as models to understand tumor behavior and test therapeutic strategies.
An isogenic cell line refers to cells derived from a single cell, ensuring genetic uniformity. In glioma research, isogenic lines provide a consistent model for studying genetic changes and their impacts on tumor growth and response to treatments.
The DNA profile of glioma cell lines is critical for identifying genetic alterations, understanding tumor evolution, and developing targeted therapies. It aids in the classification of tumors based on genetic markers like IDH1 mutations.
Serum in cell culture media provides essential growth factors, hormones, and nutrients to glioma cells. However, its composition can affect experimental reproducibility, which is why serum-free or defined serum conditions are increasingly used.
Cell cytotoxicity in glioma cell lines is assessed using assays like flow cytometry, which measures cell health, viability, and death after treatment with drugs or immune cells like natural killer (NK) cells.
NK cell cytotoxicity plays a critical role in glioma treatment research as NK cells can recognize and kill tumor cells without prior sensitization. Studying NK cell interactions with glioma cells helps develop strategies to enhance NK cell-mediated tumor clearance.
The tumor of origin provides context about the original biological environment and characteristics of the tumor. Understanding this helps in correlating findings from cell line studies with actual tumor behavior and patient prognosis.
Electron microscopy offers detailed visualization of cellular and subcellular structures in glioma cell lines, which is crucial for examining cell morphology, organelle health, and changes following treatments.
The NKG2D ligand is expressed on tumor cells and binds to the NKG2D receptor on NK cells, triggering a cytotoxic response. Studying this interaction helps to understand and potentially enhance immune responses against glioma.
3D cell culture models more accurately mimic the tumor microenvironment, providing better insights into glioma growth, migration, and drug resistance. This technique is crucial for more relevant translational oncology studies.
References
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 Suppresses Proliferation, Migration, and Invasion of U87MG Cells by Downregulating Cyclin B1, Phospho-AKT, and Metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioxidant and anticancer activities of extract of Inula helenium (L.) in human U-87 MG glioblastoma cell line. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants toward sensitive and drug-resistant cell lines. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.