Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Linha celular Jurkat E6.1
A Jurkat E6.1 é um clone da linhagem celular Jurkat, uma linhagem de linfócitos T humanos imortalizados derivada do sangue periférico. Criada pela primeira vez em 1977, ela é utilizada em pesquisas relacionadas à sinalização do receptor de células T, terapias adotivas com células T e outros linfócitos contra o câncer, pesquisas sobre proto-oncogenes relacionados ao sangue, sobrevivência celular e diferenciação celular.
Neste artigo, apresentaremos todas as informações e pré-requisitos que você precisa conhecer antes de iniciar seu trabalho com as linhas celulares clonadas Jurkat E6.1, incluindo:
- Origem, história e informações gerais
- Características da cultura celular
- Aplicações das linhagens celulares Jurkat E6.1
- Publicações de pesquisa
- Vantagens e limitações
- Recursos: protocolos, vídeos e muito mais
1. Origem, história e informações gerais
Aqui estão todas as informações necessárias relacionadas à história, origem e características gerais da linha celular Jurkat E6.1 e seu manuseio em cultura celular.
- A Jurkat E6.1 é uma linhagem celular imortalizada de linfócitos T humanos. Essa linhagem celular clonada é um derivado da linhagem Jurkat, obtida do sangue periférico de um menino de 14 anos que sofria de leucemia linfoblástica aguda em 1976. Após o isolamento do sangue, essa linha celular foi inicialmente denominada JM, já que JM e Jurkat indicam que essas linhas celulares foram isoladas do mesmo paciente. A linha celular Jurkat E6.1 foi clonada a partir de derivados celulares conhecidos como Jurkat-FHCRC.
- As linhas celulares E6.1 são derivadas de leucemia; essas linhas celulares são utilizadas para aumentar a expressão de IL-2 por meio de estimulação com anticorpos monoclonais ou lectina. Elas expressam receptores de antígenos de células T; portanto, essas linhas celulares podem ser utilizadas no estudo de distúrbios do sistema imunológico e em pesquisas de imuno-oncologia.
- Morfologia celular das células Jurkat E6.1: As células Jurkat E6.1 foram isoladas de um paciente com leucemia e apresentam morfologia alterada em comparação com os linfócitos T, o que as torna linhas celulares imortais. A célula linfoblasto se forma quando linfócitos virgens são ativados pela apresentação de antígenos por células apresentadoras de antígenos. Isso resulta em aumento do crescimento do núcleo, do citoplasma, do mRNA e das proteínas.
- Tamanho celular: As linhagens celulares Jurkat E6.1 são clonadas e imortalizadas, apresentando, mais comumente, um diâmetro que varia de 10 a 16 μm (o diâmetro pode variar de acordo com o tipo de suspensão). Essas linhagens celulares apresentam uma forma celular altamente esférica.
- Genoma e número de cromossomos: Essas linhas celulares são linhas pseudodiplóides de linfócitos T humanos, tendo o cromossomo 46 como cromossomo modal. Elas também apresentam o cromossomo modal em cerca de 74% dos casos e apresentam uma taxa de poliploidia de aproximadamente 5,3%. Os estudos de cariótipo revelaram um cariótipo com 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). Os cromossomos X e Y normalmente apresentam uma cópia regular na maioria das linhagens celulares.
- Linhas celulares Jurkat vs. E6.1 Jurkat: As linhas celulares Jurkat são as linhas celulares parentais primárias, isoladas inicialmente de um paciente com leucemia linfoblástica aguda. No entanto, as linhas celulares E6.1 Jurkat são derivados clonados das linhas celulares Jurkat-FHCRC.
Características da cultura celular
Pontos-chave para a cultura de células B16
Tempo de duplicação da população
O tempo de duplicação populacional das linhagens celulares Jurkat é de aproximadamente 20,7 horas, o que permite um desenvolvimento celular relativamente rápido.
Aderentes ou não aderentes
As linhagens celulares E6.1 Jurkat crescem no modo não aderente, existindo em suspensão, seja como uma camada única ou como aglomerados flutuantes.
Densidade de semeadura
A densidade de semeadura recomendada para as linhagens celulares Jurkat E6.1 é de 1,0–2,0 × 10⁵ células viáveis/mL, a fim de garantir uma adesão saudável e um crescimento celular ideal.
Meio de crescimento
O meio de crescimento necessário para as linhagens celulares Jurkat E6.1 é o meio RPMI-1640 formulado pela ATCC (ATCC 30-2001). O meio completo é preparado pela adição dos componentes especificados, incluindo soro fetal bovino (ATCC 30-2002), para atingir uma concentração final de 10%.
Condições de crescimento
As linhagens celulares E6.1 Jurkat podem ser cultivadas em uma incubadora adequada com 5% de ar e disponibilidade de CO₂, utilizando o meio RPMI-1640 e soro fetal bovino.
Condições de armazenamento
O armazenamento de longo prazo das linhagens celulares Jurkat em estado de cultura congelada deve ser feito a -130 graus Celsius ou em nitrogênio líquido na fase de vapor. Armazená-las a -70 graus Celsius pode levar à perda da viabilidade celular.
Congelamento
Uma alíquota de aproximadamente 0,5–1,0 mL da suspensão da linhagem celular é armazenada em tubos criogênicos para preservação das linhagens. Esses tubos são então colocados em um recipiente de armazenamento criogênico a -70 graus Celsius. No dia seguinte, os tubos são transferidos para um tanque de nitrogênio líquido e armazenados na fase de vapor.
Descongelamento
Para descongelar as linhagens celulares Jurkat, os frascos com a suspensão celular devem ser colocados em um banho-maria a 37 graus Celsius. A suspensão pode ser descongelada por 2 minutos com agitação suave. É essencial manter a tampa do frasco fora do banho-maria para evitar a contaminação das linhagens celulares.
Nível de biossegurança
O cultivo das linhagens celulares Jurkat requer um nível de biossegurança BSL-1 em ambiente laboratorial, garantindo que as precauções básicas de segurança sejam seguidas.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Aplicações das linhas celulares Jurkat E6.1
A linha celular Jurkat E6.1 é utilizada principalmente em pesquisas e estudos de doenças relacionadas ao sistema imunológico e aos cânceres a ele associados. Além disso, tem se mostrado adequada para o estudo de algumas complexidades relacionadas à infecção pelo HIV, uma vez que o receptor das células T CD4 é necessário para a entrada do retrovírus.
Algumas áreas-chave em que essas linhagens celulares são utilizadas são discutidas a seguir:
Sistema modelo para sinalização de células T e vias apoptóticas: Essa linha celular derivada de leucemia de células T é amplamente utilizada em pesquisas envolvendo a cascata de sinalização do TCR. A Jurkat E6.1 libera mais IL-2 e IL-8, o que, subsequentemente, auxilia na ativação das células T e aciona as vias inflamatórias. Essa linhagem celular também é conhecida por sua Pyk2 hiperfosforilada e pela produção aumentada de Vav1, o que influencia de maneira crucial o rearranjo do citoesqueleto de actina nas células T. A segregação do TCR na linhagem celular Jurkat E6-1 também pode ser aprimorada pela expressão forçada de LFA-1, o que, consequentemente, potencializa a sinalização do TCR e a expressão de IL-2. Estudos de proliferação celular e do ciclo celular também são realizados nas linhas celulares Jurkat E6.1. Elas têm sido preferidas no estudo de vias apoptóticas e na indução de danos ao DNA por compostos derivados de fontes marinhas e vegetais. Um estudo de 2013 avaliou o impacto de meios condicionados epigonais de tubarão em células humanas utilizando essas linhagens celulares. Da mesma forma, o efeito supressor da hirsutina, de origem vegetal, sobre a proliferação celular foi estudado nas linhagens celulares Jurkat E6.1. Frequentemente, estudos anticâncer também utilizam a Jurkat E6.1 para avaliar seus alvos selecionados. A influência de neurotoxinas marinhas, como as brevetoxinas (PbTx), também foi estudada nessas linhagens celulares.
Estudos sobre o HIV: Uma das aplicações mais significativas das linhagens celulares Jurkat E6.1 é sua capacidade de servir como um modelo adequado para estudos sobre o HIV, devido à sua propriedade de selecionar diferentes eventos de sinalização que induzem a ativação do TCA. As linhagens celulares Jurkat E6.1 têm sido utilizadas não apenas para compreender a ativação do HIV, mas também para analisar os mecanismos por trás da latência do HIV. A replicação e a infecção pelo HIV têm sido amplamente estudadas nessas linhagens celulares, nas quais podem ser submetidas a edição e inativação de genes, conforme realizado em um estudo de 2021. O impacto da administração de medicamentos na infecção pelo HIV, como as nanopartículas híbridas de polímero-lipídeo (PLN) com carga conjunta de efavirenz (Efa) de ação prolongada e enfuvirtida (Enf) na entrada viral, utilizou as linhagens celulares Jurkat E6.1. As células Jurkat E6.1 modificadas com CRISPR/Cas9 têm sido utilizadas repetidamente para estudar os mecanismos envolvidos na entrada, replicação e infecção pelo HIV.
Publicações de pesquisa
Aqui estão alguns exemplos notáveis da vasta coleção de pesquisas, incluindo as linhagens celulares Jurkat E6.1.
Utilizando Jurkat E6.1, incubadas em diferentes compostos de selênio para estudar a expressão de ligantes e a expressão de superfície de MICA/B.
Compreensão da citotoxicidade induzida pelo ácido caracasínico em linhagens de células T humanas, como Jurkat E6.1 e HL-60.
Utilizou-se a linha celular Jurkat E6.1, incubada por longo prazo com o medicamento AZT, para estudar a resistência à azidotimidina (AZT) em pacientes infectados pelo HIV-1.
Esta pesquisa utilizou um sistema de análise de fluorescência polarizada para compreender o impacto dos bio-indóis, incluindo serotonina, triptofano e melatonina, na fluidez da membrana celular nas linhagens celulares Jurkat E6.1.
O extrato de alcalóides derivado de Tribulus terrestris induziu a apoptose nas células Jurkat E6.1 para compreender o mecanismo de ação subjacente.
A sinalização do receptor de células T nas células Jurkat E6.1 foi potencializada pelo aumento forçado da expressão de LFA-1.
Vantagens e limitações
Assim como outras linhagens celulares, a Jurkat E6.1 apresenta vantagens e limitações.
Vantagens
Existem muitas razões pelas quais ela é preferida nessas aplicações:
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Modo de crescimento
A Jurkat E6.1 é uma linha celular em suspensão e não aderente, o que significa que cresce em suspensão e não adere à superfície de cultura.
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Expressão de genes
A linhagem celular Jurkat E6.1 expressa genes que codificam a interleucina-2 (IL-2) e o CD3. Após estimulação com anticorpos monoclonais, lectinas ou ésteres de forbol contra o complexo antigênico T3, essas células demonstraram produzir IL-2 em quantidades amplificadas.
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Expressão de antígenos
A linha celular Jurkat E6.1 expressa o antígeno CD3, associado à ativação e sinalização das células T.
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Marcadores de expressão
A linhagem celular expressa os marcadores do receptor de antígenos das células T (TCR), que são cruciais para o reconhecimento das células T e a resposta imunológica.
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Aplicabilidade para transfecção
A linha celular Jurkat clone E6.1 é adequada para experimentos de transfecção, permitindo a introdução de material genético exógeno nas células para diversos fins de pesquisa.
Limitações
Após abordar as vantagens, vamos examinar as limitações associadas ao uso das linhas celulares Jurkat E6.1:
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Transfecção celular com vetor viral
A transfecção de células Jurkat E6.1 é desafiadora devido à sua origem em células T. Normalmente, são necessários vetores virais caros e demorados para a modificação genética. Vetores não virais têm demonstrado baixa eficiência de transfecção e toxicidade significativa nas células Jurkat.
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Contaminação bacteriana
As culturas de células Jurkat E6.1 devem ser monitoradas quanto a uma possível contaminação bacteriana para garantir a integridade dos resultados experimentais.
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Contaminações virais
As linhagens celulares Jurkat E6.1 expressam vários receptores de quimiocinas e baixos níveis de CD4, facilitando a entrada de vírus. Isso as torna suscetíveis a vírus que infectam células T, como o HTLV e o HIV.
6. Recursos: protocolos, vídeos e muito mais
Esta seção abordará os métodos e protocolos para cultura celular e transfecção, bem como vídeos educativos relacionados a esta linhagem celular:
Protocolos de cultura celular
Aqui estão alguns procedimentos básicos de cultura a serem seguidos para esta linha celular:
- SOP de cultura celular, propagação de Jurkat: A Universidade da Califórnia também disponibilizou um método em seu navegador USCS Genome para a cultura do clone E6-1 de Jurkat.
- Jurkat, Clone E6-1: Cultura e Manuseio: A Elabscience incluiu um protocolo de manuseio da cultura em seu site de descrição do produto.
Protocolos de Transfecção
Aqui está a lista dos diferentes protocolos de transfecção disponíveis:
- Protocolo de transfecção de células Jurkat com o reagente Lipofectamine LTX: Um protocolo de transfecção de células Jurkat utilizando o reagente Lipofectamine LTX, da ThermoFisher.
- Protocolo do Amaxa™ 4D-Nucleofector™ para o clone Jurkat E6.1 [ATCC®]: A Lonza Group AG forneceu o protocolo de transfecção para o clone Jurkat E6.1 da ATCC utilizando a unidade 4D-Nucleofector® X.
Vídeos sobre Jurkat E6.1
Existem vários vídeos excelentes que abordam conceitos de cultura celular, procedimentos, proliferação, semeadura e outros tópicos.
- Passagem de células: Noções básicas de cultura celular: Este é um ótimo vídeo com um guia básico para a passagem de linhagens celulares humanas, da ThermoFisher.
- Descongelamento de células: Noções básicas de cultura celular: Este vídeo fornece instruções básicas sobre cultura celular e descongelamento, da ThermoFisher.
- Protocolo de transfecção de DNA plasmídico: Este vídeo enfoca o protocolo de transfecção de DNA plasmídico com Lipofectamine® LTX e o reagente Plus™, da ThermoFisher.
- Medição da apoptose em células Jurkat em suspensão tratadas com 3 micromolares de estaurosporina: Este vídeo demonstra como realizar um ensaio de apoptose no citômetro de imagem Celigo utilizando os reagentes Hoechst e caspase 3/7, da Nexcelom Bioscience.