Células DU-145 – Um guia completo para pesquisadores
A DU-145 é uma linhagem celular de carcinoma de próstata humano amplamente utilizada na pesquisa biomédica. Essas células servem como um modelo inestimável para o estudo da biologia do câncer de próstata, testes de medicamentos e desenvolvimento de tratamentos. Além disso, os pesquisadores também utilizam as células DU-145 para investigar os mecanismos moleculares subjacentes ao desenvolvimento, crescimento e progressão do câncer de próstata.
- Meio de crescimento
- EMEM (Meio Essencial Mínimo de Eagle) com suplementos, ou seja, 10% de soro fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e EBSS. O meio é renovado de 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação da linha celular DU-145 varia entre 30 e 40 horas.
- Tipo de crescimento
- A DU-145 é uma linhagem celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende a DU-145
- Informações gerais e origem da linhagem celular DU-145
- Cultura de células DU-145
- Linha celular DU-145: vantagens e limitações
- Aplicações de pesquisa das células DU-145
- 5. Publicações científicas sobre as células DU-145
- Recursos para a linha celular DU-145: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Informações gerais e origem da linha celular DU-145
É essencial compreender os atributos fundamentais e a origem de uma linhagem celular antes de começar a trabalhar com ela. Esta seção fornecerá uma compreensão abrangente das características e da origem da linhagem celular DU-145. Você aprenderá: O que são as células cancerosas DU-145? Qual é a morfologia das células DU-145? Qual é a diferença entre PC-3 e DU-145?
- A DU-145, uma linha celular de câncer de próstata humano, foi derivada do cérebro de um homem caucasiano (69 anos) com carcinoma de próstata metastático. Essas células foram depositadas pela primeira vez por K.R. Stone e colegas em 1978.
- Assim como as células de câncer de próstata PC-3, as DU-145 também expressam receptores de andrógenos. No entanto, quando essas células são submetidas ao tratamento com ligantes androgênicos, elas não apresentam nenhuma atividade dos genes responsivos aos receptores de andrógenos; portanto, são consideradas células androgênico-independentes.
- As células DU-145 possuem morfologia epitelial.
- As células DU-145 são hipotriploides e apresentam um número modal de cromossomos de 64. Elas apresentam vários cromossomos marcadores, tais como del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) e del (9) (p11).
PC-3 x DU145
Ambas as linhagens celulares de câncer de próstata são independentes do receptor de andrógeno. Elas diferem em termos de seu potencial tumorigênico e metastático. Quando injetada em um camundongo imunocomprometido, a linhagem celular PC-3 forma um adenocarcinoma de grau IV altamente metastático. Em contrapartida, a linhagem celular DU-145 desenvolve câncer de próstata com potencial metastático moderado [1].
Cultura de células DU-145
A linhagem celular DU-145 é amplamente utilizada em laboratórios de pesquisa do câncer de próstata. É importante conhecer os seguintes pontos-chave para facilitar sua cultura de maneira fácil e eficiente. Esta seção incluirá informações sobre o meio de cultura DU-145, o tempo de duplicação, as condições de cultura celular e os protocolos.
Pontos-chave para a cultura de células DU-145
Tempo de duplicação populacional:
O tempo de duplicação das células DU-145 varia entre 30 e 40 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A DU-145 é uma linha celular aderente.
Densidade de semeadura:
As células DU-145 são semeadas a uma densidade celular recomendada de 2 x 10⁴ células/cm². A essa densidade, as células formam uma monocamada confluente em quase 4 dias. Para a semeadura, as células são lavadas com solução salina tamponada com fosfato 1x e incubadas com a solução de passagem Accutase. Após 8 a 10 minutos de incubação à temperatura ambiente, as células recebem meio de cultura fresco e são centrifugadas. O sedimento celular coletado é cuidadosamente ressuspenso, e as células são transferidas para novos frascos de cultura para crescimento.
Meio de crescimento:
EMEM (Meio Essencial Mínimo de Eagle) com suplementos, ou seja, 10% de soro fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e EBSS. O meio é renovado 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As culturas de DU-145 são mantidas em uma incubadora umidificada a 37 °C com uma fonte de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células DU-145 são armazenadas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a temperaturas inferiores a -150 °C em um freezer elétrico para manter a viabilidade celular por um período mais longo.
Processo de congelamento e meio:
Recomenda-se o uso dos meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF para as células de câncer de próstata DU-145. Para congelar as células, opta-se por um método de congelamento lento, que permite que a temperatura caia gradualmente a cada 1 °C. Isso evita que as células sofram qualquer choque e ajuda a manter sua viabilidade.
Processo de descongelamento:
Os frascos com células DU-145 congeladas são rapidamente descongelados em banho-maria a 37 °C por 40 a 60 segundos. Em seguida, os meios de cultura são adicionados às células, que são centrifugadas para remover os componentes do meio de congelamento. As células colhidas são ressuspensas em um meio de crescimento e transferidas para o frasco para cultivo. A recuperação após o congelamento leva quase 24 horas.
Nível de biossegurança:
São necessárias instalações com nível de biossegurança 1 para cultivar a linhagem celular DU145, independente do receptor de andrógeno.
Linha celular DU-145: vantagens e limitações
Assim como outras linhas celulares, a linha celular de câncer de próstata DU-145 apresenta alguns prós e contras. Essas características podem ajudá-lo a decidir sobre seu uso em sua pesquisa. As principais vantagens e desvantagens das células DU-145 estão listadas abaixo.
Vantagens
As vantagens das células DU-145 são:
Tumorigenicidade
A DU-145 é uma linhagem celular de câncer de próstata agressiva e tumorigênica, com potencial metastático moderado. É utilizada para o desenvolvimento do modelo de xenoenxerto DU-145 em camundongos imunocomprometidos, a fim de estudar a biologia, o desenvolvimento e o crescimento do câncer de próstata in vitro e in vivo.
Independência do receptor de andrógeno
As células de câncer de próstata DU-145 são independentes do receptor de andrógeno. Elas não dependem de andrógenos para crescer e não apresentam resposta nos níveis celular e molecular quando tratadas com andrógenos. São ideais para pesquisar os mecanismos do câncer de próstata independente de hormônios.
Limitações
As limitações da linhagem celular DU-145 são:
Modelo in vitro
A DU-145 é um modelo celular in vitro de carcinoma de próstata metastático; portanto, pode não representar totalmente a complexidade dos tumores primários da próstata. Além disso, pode não abranger todos os tipos e subtipos de câncer de próstata devido a características específicas, como a independência do receptor de andrógeno.
Aplicações de pesquisa das células DU-145
A linha celular de câncer de próstata DU-145 possui uma ampla gama de aplicações em pesquisa. Algumas aplicações promissoras estão listadas a seguir.
- Biologia do câncer de próstata: a DU-145 é um modelo relevante para o estudo da biologia do câncer de próstata. Pesquisadores utilizam essas células para investigar os mecanismos moleculares que impulsionam o desenvolvimento, a progressão e a metástase do câncer. Além disso, também são exploradas as alterações genéticas comumente associadas ao câncer de próstata. Uma pesquisa realizada em 2021 examinou as células DU-145 para identificar potenciais biomarcadores com implicações diagnósticas e terapêuticas eficientes. O estudo sugeriu a actina gama 1 (ACTG1) como um potencial biomarcador do câncer de próstata, uma vez que ela promove a proliferação das células cancerosas e regula a metástase por meio da ativação da via MAPK/ERK [2].
- Triagem e desenvolvimento de medicamentos: as células de câncer de próstata DU-145 são amplamente utilizadas para testar a citotoxicidade e a eficácia de potenciais medicamentos anticâncer. Isso ajuda os pesquisadores a identificar novos medicamentos, compreender a resistência aos medicamentos e os mecanismos moleculares subjacentes. Um estudo realizado em 2022 explorou o efeito citotóxico de uma mistura resinosa, a própolis ou cola de abelha, nas linhagens celulares de câncer de próstata PC-3 e DU-145. O estudo demonstrou efeitos inibidores do crescimento dessa substância natural em ambas as linhagens celulares e propôs seu potencial anticâncer [3]. Outro estudo foi realizado em 2019 para investigar os efeitos antiproliferativos de um composto natural, a betaína, nas células de câncer de próstata DU-145. A pesquisa demonstrou que a betaína exerce atividades antiproliferativas ao aumentar a morte celular mediada pelo estresse oxidativo e a inflamação nas células DU-145 [4].
5. Research Publications Featuring DU-145 Cells
The following are some research publications on the DU-145 cell line.
This study in the Biological Trace Element Research, 2020, proposed that zinc sulfate (ZnSo4) exerts anti-proliferative effects in DU-145 cells via inducing apoptosis, morphological changes, oxidative damage, and inflammation.
This research article was published in BMC Complementary Medicine and Therapies in 2020. This study explored the cytotoxic and anti-metastatic potential of a plant, Annona muricata L. bark extract, and its bioactive annonacin in the DU-145 cell line.
This publication in IUBMB Life (2019) proposed that long non-coding RNA LOXL1-AS1 interaction with miR-let-7a-5p and EGFR pathway regulate the doxorubicin resistance in DU-145 prostate cancer cells.
This article in Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) stated that Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) gene downregulation causes DU-145 cells death and inhibits epithelial to mesenchymal transition (EMT) via activating Pyk2/MKK7 pathway.
This study in the Journal of Food Biochemistry (2019) proposed that Casticin, a polymethoxyflavone, inhibits migration and invasion of DU-145 cells by regulating Ras/Akt/NF‐κB signalling.
Resources for DU-145 Cell line: Protocols, Videos, and More
Many online resources are available on the DU-145 prostate cancer cell line. Here this section will mention a few resources explaining the handling, maintenance, and transfection protocol for these cells:
- DU-145 transfection: This video tutorial is a step-wise guide for learning the protocol for transfecting DU-145 cells.
The DU-145 cell culture protocol is mentioned here.
- DU-145 subculturing: This link will help you learn the protocol for subculturing or sub-cultivating DU-145 cells.
- DU-145 cells: This website contains plenty of useful information about the DU-145 cell line, including DU145 medium, protocol for subculturing, and handling proliferative and cryopreserved cultures.
References
- Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., Betaine suppresses cell proliferation by increasing oxidative stress–mediated apoptosis and inflammation in DU-145 human prostate cancer cell line. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.