Linha celular A375 – Um guia sobre a pesquisa do melanoma
A375 é uma linha celular de melanoma humano amplamente utilizada em pesquisas de toxicologia e imuno-oncologia. Os pesquisadores utilizam essa linha celular para estudar a biologia do câncer e as vias de sinalização, testar ou selecionar potenciais agentes anticâncer e desenvolver novas e eficazes terapias.
- Meio de crescimento
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- Tempo de duplicação
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- Tipo de crescimento
- Adere
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende A375
- Origem e características gerais das células A375
- Células A375: Informações sobre cultura celular
- Vantagens e limitações da linhagem celular A375
- Compre agora suas células A375
- Aplicações de pesquisa da linhagem celular A375
- Células A375: Publicações
- Recursos para a linha celular A375: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes (FAQ) sobre as células A375
- Referências
- Perguntas frequentes
Origem e características gerais das células A375
Conhecer a origem e as características gerais de uma linha celular pode ajudar você a planejar seu uso em pesquisas. Esta seção do artigo abordará a origem e as características da linha celular A375. Por exemplo, o que é a linha celular A375? Quais são as características da linha celular A375? De onde vêm as células A375? Qual é a morfologia das células de melanoma A375? Qual é o tamanho das células A375?
- A linha celular de câncer de pele A375 teve origem na cultura de explante de um tumor sólido de uma mulher de 54 anos com melanoma maligno [1].
- As células A375 apresentam morfologia de tipo epitelial.
- O tamanho das células A375 é relativamente menor em comparação com outras linhagens celulares. Elas possuem, aproximadamente, um diâmetro de 12 µm.
- As células do melanoma A375 são hipotriploides. O número modal de cromossomos para essa linhagem celular é 62. Normalmente, cada célula possui nove cromossomos marcadores e uma cópia dos cromossomos normais N2, N6 e N22.
Células A375: Informações sobre cultura celular
As culturas de células A375 são fáceis de manter. Elas não apresentam requisitos complexos de cultura celular. Esta seção ajudará você a conhecer as informações necessárias sobre a cultura celular, como, por exemplo, qual é o tempo de duplicação das células A375. Qual é o meio de cultura da linhagem celular A375? Qual é a densidade de semeadura das células A375? As células de melanoma A375 são aderentes?
Pontos-chave para a cultura de células A375
Tempo de duplicação populacional:
O tempo de duplicação das células A375 é de 20 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A A375 é uma linha celular de melanoma humano aderente.
Densidade de semeadura:
A densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm² é ideal para culturas de células A375. As células aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato (PBS) 1x e incubadas com solução de passagem (Accutase). Em seguida, as células são adicionadas ao meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são ressuspensas em meio de cultura e transferidas para novos frascos para crescimento.
Meio de crescimento:
Recomenda-se o DMEM como meio ideal para A375 quando suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 1,5 g/L de NaHCO₃, 4 mM de L-glutamina e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio para A375 deve ser renovado 2 a 3 dias por semana.
Condições de crescimento:
As células de melanoma A375 são cultivadas em uma incubadora umidificada (37 °C) com um suprimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células A375 congeladas devem ser mantidas a temperaturas inferiores a -150 °C na fase de vapor de nitrogênio líquido ou em um freezer elétrico.
Processo de congelamento e meio:
Os meios CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar a linhagem celular A375. Optou-se por um processo de congelamento lento, que permite uma redução gradual da temperatura de 1 °C, a fim de proteger a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
O frasco com as células de melanoma A375 congeladas é agitado rapidamente em banho-maria por 40 a 60 segundos, até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. As células são adicionadas a meio fresco e centrifugadas para remover os resíduos do meio de congelamento. O sedimento celular obtido foi novamente ressuspenso e transferido para novos frascos.
Nível de biossegurança:
As culturas de A375 são manuseadas e mantidas em laboratórios com nível de biossegurança 1.
Advantages & Limitations of A375 cell line
Like other cell lines, the A375 melanoma cell line is associated with a unique combination of advantages and limitations, making it a valuable tool for melanoma cancer research. This section has listed only a few significant pros and cons of the A375 cell line.
Advantages
The significant advantages of A375 cells are mentioned below:
- Melanoma tumour model: A375 cell line was derived from a malignant melanoma tumour, thus serving as an invaluable tumour model to investigate melanoma biology and therapeutic interventions. These cells exhibit melanoma-like properties, such as a high proliferation rate and invasiveness.
- Tumorigenicity: A375 cells are highly tumorigenic, meaning they can form tumours. A375 cells are reported to produce aggressive amelanotic melanomas in NIH Swiss mice treated with anti-thymocyte serum (an immune-suppressive agent).
- Well-characterized: A375 is a genetically well-characterized cell line. It possesses specific genetic mutations like melanoma. A375 mutations include A375 BRAF gene alteration, making it sensitive to BRAF-specific inhibitors. This genetic profile thus makes A375 cells a great cancer research tool to study underlying molecular pathways and targeted therapies.
Limitations
The limitation associated with A375 cells are:
- In vitro limitations: A375 is an in vitro tumour model. Although it mimics the characteristics of melanoma, it cannot fully represent the complexity of melanoma tumours. Therefore, caution is exercised when findings in vitro are generalized to clinical studies.
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Aplicações da linha celular A375 na pesquisa
A linha celular A375 tem amplas aplicações na pesquisa sobre o câncer. Aqui estão algumas das áreas mais comuns em que as células A375 são utilizadas.
- Pesquisa sobre câncer: as células A375 têm ampla aplicação na pesquisa sobre melanoma. Pesquisadores utilizaram essas células para investigar a biologia do câncer de pele, seus processos e os mecanismos de sinalização celular subjacentes, incluindo proliferação, migração e invasão celular. Isso também pode ajudar os pesquisadores a identificar novos alvos terapêuticos moleculares. Um estudo conduzido por Lin Zhu e colegas em 2019 utilizou células de melanoma A375 altamente agressivas e descobriu o papel do microRNA-3662 no crescimento e na invasão das células de melanoma A375. Os resultados do estudo indicam que o microRNA-3662 tem como alvo o gene ZEB1 e regula o crescimento das células de melanoma in vitro e in vivo no modelo tumoral A375 [2]. Da mesma forma, uma pesquisa realizada em 2018 constatou que as vias PI3K/AKT e MAPK/ERK estão envolvidas na proliferação e metástase da linhagem celular A375 [3].
- Descoberta e testes de medicamentos: a linhagem celular A375 é um modelo tumoral in vitro útil para testar e selecionar potenciais agentes anticâncer. Pesquisadores avaliam a toxicidade e a eficácia de novos medicamentos quimioterápicos, compostos e outras terapias utilizando essas células de melanoma A375. Por exemplo, um estudo explorou as propriedades anticâncer de micro e nanovesículas derivadas da toranja em células cancerosas de melanoma humano A375. Os resultados revelaram que as micro e nanovesículas induzem a parada do ciclo celular e a apoptose, além de inibir a expressão gênica na proliferação, migração e invasão celular [4].
Células A375: Publicações
Algumas publicações científicas significativas que abordam as células A375 são mencionadas aqui.
Este estudo foi publicado no Journal of Oncology em 2019. O estudo propôs que o tratamento combinado com vitamina D e seus análogos melhora a atividade anticâncer da cisplatina e da dacarbazina nas células de melanoma A375.
Esta pesquisa foi publicada no Journal of Herbal Medicine em 2022. Este estudo explorou os efeitos antimelanoma do gel de aloe vera em células de melanoma A375.
Este estudo publicado na revista Oncogene (2021) propôs que o membro 2 da família da fermitina (FERMT2 ou kindlin-2) estimula a progressão do melanoma por meio da ativação da MAPK, através da ligação com p-α-Pix e Rac1.
Este estudo publicado na revista The American Journal of Dermatopathology (2019) propôs que a FARP1 pode facilitar o desenvolvimento e a progressão do melanoma cutâneo. Assim, ela pode ser um alvo terapêutico útil.
Este artigo de pesquisa foi publicado na revista *Bioengineered* (2019). Este estudo explorou a atividade citotóxica e apoptótica de um extrato da planta *Phyllodium elegans* em linhagens celulares de carcinoma humano, incluindo a A375.
Recursos para a linhagem celular A375: protocolos, vídeos e muito mais
A seguir, apresentamos alguns recursos on-line sobre as células A375.
- Transfecção de células A375: este tutorial em vídeo ajudará você a aprender passo a passo como realizar a transfecção de células A375.
- Cultura celular: este vídeo traz informações muito úteis sobre o cultivo de linhagens celulares.
Os protocolos de cultura celular para as células A375 estão listados aqui.
- Linha celular A375: este link contém informações úteis sobre o cultivo e a manutenção da linha celular A375, incluindo meios de cultura para A375 e o manuseio de culturas A375 congeladas e em proliferação.
The A375 cell line is a human melanoma cell line derived from a malignant melanoma tumor. It is commonly used in cancer research due to its well-characterized genetic profile.
A375 cells are used in various studies, including the effects of rutoside for melanoma, silencing of TMSB4X expression, and photodynamic therapy for tumors.
The A375 cell line xenograft is a common model for studying tumor progression and therapeutic interventions in vivo. Researchers implant A375 cells into mice to create xenografts that mimic human melanoma.
Studies involving GHz millimeter wave exposure explore its effects on A375 cells, including potential changes in cell behavior and apoptosis expression.
Rutoside treatment has been shown to impact the cytoskeleton and actin cytoskeleton of A375 cells, which may influence their biomechanical properties and invasiveness.
Research often focuses on the expression of apoptosis-related proteins, levels of Tβ4, and interactions with melanoma compounds to understand the molecular mechanisms underlying melanoma.
Researchers can access a certificate of analysis, safety data sheet download, and certificate of origin for A375 cells to ensure they meet quality and safety standards.
A375 cells exhibit specific growth modes and form distinct cell layers, making them suitable for various experimental setups in melanoma research.
Photodynamic therapy involving methylene blue and other photosensitizers by light is used to induce cell death in A375 cancer cells, offering insights into potential melanoma treatments.
Studies on the karyotype, stemness features, and migratory melanoma cells help in understanding the aggressive nature and metastatic potential of A375 cells in melanoma research.
References
- Avram, S., et al., Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
- Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 targets ZEB1 and attenuates the invasion of the highly aggressive melanoma cell line A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C inhibits melanoma A375 cell proliferation and metastasis via suppressing PI3K/Akt and MAPK/ERK pathways. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al., Grapefruit-derived micro and nanovesicles show distinct metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.