תאי MB49-Luc
800.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | MB49-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים MB49 של קרצינומה של תאי המעבר בשלפוחית השתן בעכברים, שהונדס כך שיבטא באופן יציב את גן הרפורט של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי MB49 הושג במקור על ידי גרימת 7,12-דימתילבנז[א]אנתרצן (DMBA) בעכבר C57BL/6, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל סינגני של קרצינומה של האפיתל השתני במארחים בעלי מערכת חיסון תקינה מסוג C57BL/6. תאי MB49 מציגים מורפולוגיה אפיתלית ומבטאים אנטיגנים מסוג MHC Class I, מה שהופך אותם לזיהויים מבחינה חיסונית על ידי מערכת החיסון של המארח, ולכן הם מהווים מודל חשוב לחקר האינטראקציות בין הגידול למערכת החיסון, גישות אימונותרפיה ומנגנוני בריחה חיסונית בסרטן שלפוחית השתן. השילוב היציב של לוקיפרז ב-MB49-Luc מאפשר הדמיה רגישה ולא פולשנית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים אורתוטופיים תוך-שלפוחיתיים ותת-עוריים בעכברי C57BL/6 סינגניים. האות הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר הערכה ארוכת טווח של השתלת הגידול, התקדמות הגידול בשלפוחית השתן ותגובה טיפולית, ללא צורך בהליכים פולשניים חוזרים. MB49-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד להערכת משטרי אימונוטרפיה תוך-שלפוחיתית, מעכבי נקודות בקרה מערכתיים ושיטות טיפול חדשניות לסרטן שלפוחית השתן הפולש לשריר ולזה שאינו פולש לשריר, במודלים פרה-קליניים בעלי מערכת חיסונית תקינה. MB49-Luc שומר על המאפיינים הביולוגיים והאימונולוגיים המרכזיים של קו ה-MB49 ההורי, כולל תאימות סינגנית ל-C57BL/6 והמאפיין הקריוטיפי האופייני של אובדן כרומוזום Y. הרפורט של לוקיפרז משפר את הרגישות הניסויית ומאפשר מעקב בזמן אמת אחר הגידול. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את קינטיקת הגידול ואת הפנוטיפ החיסוני בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש בקנה מידה גדול in vivo. |
|---|---|
| אורגניזם | עכבר |
| רקמה | שלפוחית השתן |
| מחלה | קרצינומה של תאי המעבר בשלפוחית השתן בעכבר |
| מילים נרדפות | MB49-לוציפרז, MB49 LucSH+ |
מאפיינים
| גיל | מבוגר |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | זן עכברים עם ריבוי גנים (C57BL/6) |
| מורפולוגיה | אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | MB49-Luc (מספר קטלוג Cytion 305681) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_E8D4 |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאים זה מכיל קלטת דיווח של לוקיפרז של גחלילית (Luc2, עם קודונים מותאמים) המשולבת באופן יציב, שהוכנסה באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו. אוכלוסיית התאים הפוליקלונלית שהתקבלה נשמרה תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). נדרשת רמת אבטחה S1. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
| ביטוי חלבון | לוק |
|---|---|
| ביטוי אנטיגן | Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים) |
| קריוטיפ | איבד את כרומוזום Y |
טיפול
| תרבית ביניים | DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | Accutase, 10 דקות בטמפרטורת החדר |
| זמן הכפלה | 24–48 שעות |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| יחס פיצול | 1 עד 3 |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 305681-180526 | תעודת ניתוח | 03. Jul. 2026 | 305681 |