קו תאים HT-29
HT-29 הוא קו תאים של סרטן המעי הגס האנושי עם מגוון רחב של יישומים במחקר הסרטן והטוקסיקולוגיה. לדוגמה, תאים אלה רגישים לטיפולים כימותרפיים סטנדרטיים נגד סרטן המעי הגס. בנוסף, קו התאים HT-29 הוא מודל מבחנה מאופיין היטב לחקר התגובה של אפיתל המעי לזיהום חיידקי. תאי HT-29 מחקים את המאפיינים של תאי מעי בוגרים, כלומר אנטרוציטים, ולכן מתאימים למחקרים על היצמדות ומנגנונים.
- מדיום גידול
- ראה דף המוצר
- זמן הכפלה
- ראה דף המוצר
- סוג גידול
- נדבק
- רמת בטיחות ביולוגית
- BSL-1
- זמין אצל
- Cytion — הזמנת HT-29
תאי HT-29: מקור ומידע כללי
לפני השימוש בכל קו תאים, עליכם להכיר את המאפיינים הכלליים ואת מקורו. סעיף זה יסייע לכם ללמוד: מהן תאי HT-29? האם HT-29 הוא קו תאים של סרטן המעי הגס? מהו המורפולוגיה של תאי HT-29?
מהו קו התאים HT-29? HT-29 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה של המעי הגס שהוקם בשנת 1964 על ידי Trempe ו-Fogh. התאים נלקחו במקור מגידול ראשוני של אישה לבנה (בת 44) עם אדנוקרצינומה של המעי הגס [1]. מאז הקמתו, קו תאים זה משמש לחקר הביולוגיה של סוגי סרטן.
מורפולוגיה של תאי HT-29: לקו התאים HT-29 יש בדרך כלל מורפולוגיה דמוית אפיתל. תאים מובחנים גדלים בשכבות חד-תאיות, יוצרים חיבורים הדוקים בין תאים, ובעלי גבול מברשת אפיקלי. אם תאים אלה גדלים במדיום חסר גלוקוז או מקבלים חומרים מעוררים כמו בוטיראט או חומצה, הם מפגינים תכונות דמויות אנטרוציטים.
גודל התא: קוטר קו התאים של סרטן המעי הגס HT-29 הוא 11 מיקרומטר.
גנום ופלואידיות: המספר המודאלי של כרומוזומים בקו התאים HT-29 הוא 71. הוא עשוי לנוע בין 68 ל-72. יתר על כן, מספר הכרומוזומים הממוצע בתאי HT-29 הוא היפר-טריפלואידי, כאשר המרכיב 2S מופיע בשיעור של 2.4%.
מהו HT29 MTX? HT29 MTX הוא קו תאים עמיד למתוטרקסט, המבודד מקו התאים המקורי של סרטן המעי הגס האנושי HT-29 באמצעות התאמה ל-10 µM מתוטרקסט. תאים אלה מציגים מאפיינים של תאי גביע בוגרים המפרישים ריר.
מידע על תרבית תאים של קו התאים HT-29
היכרות עם דרישות התרבית הבסיסיות של קו תאים יכולה להקל על העבודה איתו. כדאי לדעת: מהו זמן ההכפלה של קו התאים HT-29? מהי צפיפות הזריעה של תאי HT-29? אילו מצעים מתאימים לתאי HT-29?
זמן הכפלה
זמן ההכפלה הממוצע של קו התאים HT-29 הוא 24 שעות.
תאים דבקים/תאים בתמיסה
HT-29 הוא קו תאים דבק.
צפיפות זריעה
צפיפות הזריעה המומלצת לתאי HT-29 היא 3 x 104 תאים/סמ"ר. תאים שגדלו נשטפים ב-1X PBS ומופרדים לאחר דגירה עם Accutase למשך 8-10 דקות. מוסיפים מדיה טרייה, והתאים עוברים צנטריפוגה. משקע התאים מושעה מחדש, והתאים מועברים לצלחות חדשות בצפיפות התאים המומלצת.
מדיום גידול
לצורך גידול אופטימלי של תאי HT-29 משתמשים במדיום מינימלי חיוני של איגל (EMEM) בתוספת 2.5 מ"מ L-גלוטמין ו-10% FBS. יש להחליף את המדיום 2-3 פעמים בשבוע.
תנאי גידול
תאי HT-29 דורשים אינקובטור לח בטמפרטורה של 37°C ואספקת CO2 של 5% לצורך גידול.
אחסון
תאים אלה מאוחסנים בשלב האדי של חנקן נוזלי בטמפרטורה הנמוכה מ-195°C.
מדיום הקפאה ותהליך
חומר ההקפאה המשמש לקו התאים HT-29 הוא CM-1 או CM-ACF. התאים מוקפאים בתהליך הקפאה איטי הגורם לירידה של 1°C בטמפרטורה ושומר ביעילות על חיוניות התאים.
תהליך ההפשרה
תאי HT-29 קפואים מופשרים באמבט מים המכוון לטמפרטורה של 37°C. תאים אלה ניתנים להשעיה מחדש ולהעברה ישירה לתוך בקבוקון המדיום הטרי. לעומת זאת, ניתן לסרכז את התאים המופשרים כדי להסיר את מרכיבי חומר ההקפאה, להפיץ אותם מחדש במדיום טרי ולגדל אותם בבקבוקים.
רמת בטיחות ביולוגית
רמת בטיחות ביולוגית 1 משמשת לטיפול ולתחזוקה של קו התאים HT-29.
תאי HT-29: יתרונות ומגבלות
לכל קו תאים יש יתרונות וחסרונות ייחודיים המבדילים אותו מקווי תאים אחרים. סעיף זה יסקור את היתרונות והמגבלות העיקריים הקשורים לתאי HT-29.
יתרונות
היתרונות העיקריים של תאי HT-29 הם:
-
קלים לגידול
קו התאים HT-29 קל לטיפול ולתחזוקה, ללא דרישות מורכבות לגידול. הוא מגודל באופן נרחב במעבדות מחקר.
-
מודל תאי מעי במבחנה
תאי HT-29 יכולים להתמיין לתאי מעי בוגרים (אנטרוציטים ותאים המייצרים ריר) בתנאי תרבית ספציפיים. הם משמשים כמודל תאי לחקר עיכול המזון וזמינות ביולוגית.
-
יעילות טרנספקציה גבוהה
תאי סרטן המעי הגס HT-29 מציעים יעילות טרנספקציה גבוהה, מה שהופך אותם למתאימים למחקרים על ביטוי גנים וויסות. ניתן לבצע ניסויי טרנספקציה זמניים ויציבים באמצעות שיטות שונות.
-
רגישות לתרופות
תאי HT-29 רגישים לתרופות כימותרפיות כגון פלואורואורציל ואוקסליפלטין, הנמצאות בשימוש נפוץ בטיפול בסרטן המעי הגס. הם משמשים לחקר עמידות לתרופות ולסינון תרופות טיפוליות פוטנציאליות לסרטן המעי הגס.
מגבלות
-
הטרוגניות
תאי HT-29, כמו קווי תאים סרטניים אחרים, מפגינים הטרוגניות ועשויים שלא ליצור אוכלוסיית תאים אחידה. הדבר עלול להשפיע על השחזור של תוצאות בבדיקות מסוימות ולהוביל לשונות קלה בתוצאות הניסוי.
-
הבחנה מוגבלת
לתאי HT-29 פוטנציאל התמיינות מוגבל. הם אינם מתמיינים באופן מלא לתאי מעי או תאי מעי גס, אלא מפגינים רק כמה תכונות אופייניות. מגבלה זו עשויה להגביל את השימוש בהם לחקר תהליכים ביולוגיים מורכבים יותר.
תאי HT-29: יישומים
קו התאים HT-29 מתורבת בהיקף נרחב במעבדות מחקר בשל מגוון היישומים הרחב שלו. סעיף זה יסקור רק כמה יישומים משמעותיים של תאי HT-29.
מחקר סרטן: HT-29 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה של המעי הגס, ולכן הוא משמש לחקר התקדמות הסרטן, התפתחותו והמנגנונים המולקולריים הבסיסיים. מחקר שנערך בשנת 2018 השתמש בקו התאים HT-29 כדי לחקור את המולקולות התאיות האחראיות לגרורות. מחקר זה מצא כי הגנים vimentin ו-CXCR4 מווסתים את גרורות התאים. לעומת זאת, העברת החומר הגנטי של microRNA-193a-5p mimic יכולה להפחית את רמות ה-mRNA של גנים אלה ולהצליח להפחית את גרורות תאי הסרטן [2].
מחקר טוקסיקולוגי: קו תאי HT-29 נמצא בשימוש נרחב במחקר טוקסיקולוגי. תאי קרצינומה של המעי הגס משמשים להערכת הרעילות של תרופות מועמדות שונות באמצעות בדיקות שונות. לדוגמה, מחקר בחן את פוטנציאל הרעילות של תמצית אתנולית מצמח Syzygium cumini על קו התאים HT-29. התוצאות הראו דיכוי משמעותי של צמיחת תאי HT-29, מה שמעיד על תכונות אנטי-סרטניות מבטיחות של התמצית [3].
מיקרוביולוגיה: ניתן להשתמש ב-HT-29 כמערכת תאים מארחים לחקירת הפתוגנזה של מיקרואורגניזמים פוטנציאליים, כגון חיידקים ונגיפים. חוקרים יכולים להדביק תאי HT-29 במיקרואורגניזמים כדי לחקור את האלימות שלהם ואת תגובת המארח. מחקר כזה השתמש בתאי HT-29 כדי לחקור את התכונות הפרוביוטיות של חיידקי חומצת החלב [4]. מחקר אחר השתמש בתאי HT-29 כדי להעריך את היעילות והבטיחות של טיפולים בבקטריופאג'ים [5].
5. פרסומים מחקריים בנושא תאי HT-29
סעיף זה יציג מספר פרסומים בולטים בנושא תאי HT-29 שיסייעו לכם בתכנון המחקר שלכם.
הערכת ההשפעה האנטי-סרטנית של תמצית אתנולית של Syzygium cumini על קו תאי המעי הגס HT-29
מחקר זה הציע תמצית אתנולית של Syzygium cumini כסוכן אנטי-סרטני פוטנציאלי נגד קו תאי סרטן המעי הגס HT-29. התמצית עיכבה באופן משמעותי את צמיחת תאי הסרטן.
טטרנדרין מעכב את צמיחת תאי קרצינומה של המעי הגס HT-29 באמצעות מסלול Bcl-2/Caspase 3/PARP ושלב G1/S
פרסום זה ב-Bioscience Reports בדק את הפעילות האנטי-סרטנית של תרכובת בשם טטרנדרין על תאי HT-29. התוצאות הראו כי טטרנדרין מעכב את התרבותם וצמיחתם של תאי הסרטן באמצעות ויסות מסלולי איתות התאיים.
microRNA‐193a‐5p מעכב את הנדידה של תאי סרטן המעי הגס האנושיים HT‐29 באמצעות דיכוי מסלול הגרורות
מחקר זה הציע כי miRNA-193a-5p עשוי לווסת את גרורות תאי HT-29 באמצעות ויסות גנים הקשורים לגרורות.
בקטריופאגים הם אגרסיביים יותר כלפי חיידקים הנמצאים בתאי אדם מאשר בתרבית חיידקים; תובנות מתאי HT-29
מאמר זה פורסם ב-Nature Scientific Reports בשנת 2018. מחקר זה השתמש בקו תאים סרטניים HT-29 כמודל תאי מעי כדי להעריך את היעילות של הטיפול המוצע בבקטריופאג'ים.
במחקר זה, החוקרים השתמשו בתאי HT-29 כדי לחקור את הפעילות הפרוביוטית של חיידקי חומצת החלב. מעניין לציין כי המחקר הצביע על כך שחיידקי לקטובצילוס מונעים הידבקות של חיידקים פתוגניים לתאי המעי הגס.
תאי HT-29 משאבים: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
סעיף זה יסקור כמה משאבים מקוונים הזמינים בנושא תאי HT-29, שיסייעו ללמוד את פרוטוקולי התחזוקה, התרבית והטרנספקציה שלהם.
פרוטוקולים לגידול תאים
המשאבים הבאים ינחו אתכם בנוגע לריבוי תאי HT-29.
- גידול תאי HT-29: קישור זה יספק ידע בסיסי על מצע הגידול, ההפשרה והתרבות המשנית של תאי HT-29.
- תחזוקת תרבויות HT-29: מאמר זה מכיל את כל המידע השימושי על תרבית ותחזוקת תאי HT-29.
פרוטוקולי טרנספקציה
קו התאים HT-29 מתאפיין ביעילות טרנספקציה גבוהה, והוא משמש לעתים קרובות במחקרי ביטוי גנים. המשאבים הבאים מתארים את פרוטוקולי הטרנספקציה האפשריים עבור תאים אלה.
- טרנספקציה של HT-29: קישור זה לאתר מכיל את הפרוטוקול המפורט לטרנספקציה של תאי HT-29.
- טרנספקציה של קו תאי HT-29: מסמך זה מתאר את פרוטוקול הטרנספקציה של קו תאי HT-29 עם DNA פלסמיד.
סרטונים הקשורים לקו התאים HT-29
להלן מספר סרטונים על גידול ותחזוקה של קו תאים סרטני זה.
- העברת תאים: סרטון זה מציג פרוטוקול להעברת תאים עבור קווי תאים דבקים.
- טרנספקציה של תאי HT-29: סרטון זה ינחה אתכם לגבי שיטת הטרנספקציה המשמשת לתאי HT-29.
אנו מקווים שהמידע במאמר זה יסייע לכם בטיפול ובתחזוקה של קו התאים HT-29. אם אתם מתכננים להשתמש בתאי HT-29 במחקר שלכם, הזמינו אותם מאיתנו.
מקורות
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, קו תאים HT29. ההשפעה של חומרים ביו-אקטיביים במזון על הבריאות: מודלים in vitro ו-ex vivo, 2015: עמ' 113-124.
- Shirafkan, N., et al., microRNA‐193a‐5p מעכב נדידה של תאי סרטן המעי הגס האנושיים HT‐29 באמצעות דיכוי מסלול הגרורות. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): עמ' 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, ו-R. Safaralizadeh, הערכת ההשפעה האנטי-סרטנית של תמצית אתנולית של Syzygium cumini על קו תאי המעי הגס HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: עמ' 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., תכונות פרוביוטיות של לקטובציליס ויכולתן לעכב את ההידבקות של חיידקים אנטרופתוגניים לתאי Caco-2 ו-HT-29. פרוביוטיקה וחלבונים אנטי-מיקרוביאליים, 2021. 13: עמ' 102-112.
- Shan, J., et al., בקטריופאגים הם אגרסיביים יותר כלפי חיידקים הנמצאים בתאי אדם מאשר בתרבית חיידקים; תובנות מתאי HT-29. דוחות מדעיים, 2018. 8(1): עמ' 5091.
