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Les cellules Vero : des voies novatrices dans la recherche virale et l’innovation en matière de vaccins

La lignée cellulaire Vero, un modèle de cellules mammifères immortalisées dérivées des cellules épithéliales rénales du singe vert africain, est à l’avant-garde de la recherche en virologie, en microbiologie ainsi qu’en biologie cellulaire et moléculaire. Son utilisation généralisée s’étend au développement de vaccins, aux criblages pharmaceutiques, ainsi qu’à l’étude de la biologie des virus et des parasites, de l’immunologie tumorale et des stratégies d’immunothérapie.

📋 Ligne cellulaire Vero — Faits en bref
Milieu de culture
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Temps de doublement
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Type de croissance
Adhérent
Niveau de biosécurité
BSL-1
Disponible chez
Cytion — Commander Vero

Origine et caractéristiques principales des cellules Vero

L’étude d’une lignée cellulaire telle que Vero soulève plusieurs questions : Que sont exactement les cellules Vero? Comment la lignée cellulaire Vero a-t-elle été établie? Quelle est l’histoire derrière le nom « Vero »? Cette section vise à élucider la genèse et les principales caractéristiques des cellules Vero.

La création de la lignée cellulaire Vero remonte à 1962; elle provient des cellules épithéliales rénales du singe vert africain. Cette lignée a été cultivée par Y. Kawakita et Yasumura à l’Université de Chiba, au Japon. Le terme « Vero » est dérivé de « Verda reno » en espéranto, ce qui signifie « rein vert », bien que « Vero » fasse également écho à la notion de « vérité ».

Les cellules Vero forment généralement des monocouches, mais peuvent s’adapter à des cultures en suspension, présentant alors une structure de type épithélial. Ces cellules se caractérisent par leur forme arrondie à allongée et un diamètre moyen d’environ 17 µm. Il convient de noter que les cellules Vero présentent un nombre de chromosomes hypodiploïde, le nombre modal de chromosomes étant de 58 chez environ 66 % de la population cellulaire, bien que des variations avec des ploidies plus élevées existent chez une petite fraction (1,7 %) des cellules.

Les clones de cellules Vero et leurs propriétés uniques

Des clones distincts issus de la lignée cellulaire Vero présentent des caractéristiques uniques qui les distinguent de la lignée d’origine. Parmi ceux-ci, deux clones de cellules Vero méritent d’être mentionnés :

  • Lignée cellulaire Vero E6 : Également connue sous le nom de Vero C1008, ce clone provient des cellules Vero 76 et a été isolé en 1979 par P.J. Price à l’aide d’une technique de dilution sur des plaques de microtitrage. Les cellules Vero E6 sont particulièrement adaptées à la culture de virus à réplication lente.

  • Cellules Vero 76 : Issu du rein d’un singe vert africain en 1968, ce clone conserve la morphologie épithéliale caractéristique des cellules Vero.

Ces variantes des cellules Vero, tout comme la lignée parente, continuent de jouer un rôle déterminant dans l’avancement de la recherche virologique et le développement d’interventions médicales, ce qui souligne leur importance au sein de la communauté scientifique.

Tissu rénal humain vu au microscope.

Informations sur la culture

La culture des cellules Vero, une lignée cellulaire de singe, nécessite de bien connaître certains paramètres spécifiques tels que le temps de doublement, la densité d’ensemencement et le milieu de culture approprié.

  • Temps de doublement de la population : Le temps de doublement des cellules Vero est d’environ 24 heures.

  • Adhérence : Les cellules Vero adhèrent aux surfaces et forment généralement des monocouches lorsqu’elles sont cultivées.

  • Densité d’ensemencement : Il est recommandé de commencer avec une densité d’ensemencement de 1 x 10^4 cellules/cm^2. Pour cultiver des cellules Vero adhérentes, rincez-les avec du PBS et traitez-les avec de l’Accutase pour les détacher. Après le détachement, centrifuger les cellules, les remettre en suspension dans un milieu frais, puis les transférer dans de nouveaux flacons de culture.

  • Milieu de croissance : Les milieux Ham’s F12 et DMEM conviennent tous deux à la culture des cellules Vero. Ceux-ci doivent être enrichis de 2,5 mM de L-glutamine et de 5 % de sérum fœtal bovin (SFB) pour favoriser une croissance optimale. Le milieu doit être renouvelé deux à trois fois par semaine.

  • Conditions de croissance : Les cellules Vero se développent à une température de 37 °C dans une atmosphère humidifiée contenant 5 % de CO₂.

  • Entreposage : Pour un entreposage à long terme, les cellules Vero doivent être conservées à des températures inférieures à -150 °C, soit dans un congélateur à très basse température, soit en phase vapeur d’azote liquide.

  • Procédure de congélation et milieu : Pour la cryoconservation, utilisez du CM-1 ou du CM-ACF, ou le milieu de culture contenant du FBS et du DMSO, comme milieu de congélation. Recourez à une technique de congélation lente, en abaissant progressivement la température de 1 °C par minute.

  • Procédure de décongélation : Décongelez les cellules Vero en plongeant le récipient dans un bain-marie à 37 °C et en l’agitant doucement pendant 40 à 60 secondes. Diluez ensuite les cellules dans un milieu frais, centrifugez-les pour éliminer le cryoprotecteur, remettez-les en suspension dans un milieu de croissance frais, puis placez-les dans un nouveau flacon pour qu’elles se rétablissent et se multiplient.

  • Niveau de biosécurité : Les cellules Vero doivent être manipulées dans un laboratoire répondant aux exigences du niveau de biosécurité 1.

Vero cells two and one days after subculturing (10x magnification).

Applications de la lignée cellulaire Vero dans la recherche

La lignée cellulaire Vero trouve de nombreuses applications de recherche dans les domaines de la biologie cellulaire et de la virologie. Nous en avons abordé quelques-unes en particulier ici.

Les cellules Vero dans la recherche virale et la production de vaccins

Les cellules Vero, dérivées de cellules rénales de singe vert africain, sont devenues un élément incontournable dans le développement de bioprocédés de fabrication de vaccins contre divers virus, notamment le poliovirus et le virus de l’encéphalite japonaise. Leur adaptabilité tant en culture adhérente qu’en suspension, ainsi que leur large capacité à prendre en charge divers virus, y compris des agents pathogènes comme le virus des petits ruminants, soulignent leur importance dans l’isolement des virus et le développement de vaccins.

De nombreuses études ont eu recours aux cellules Vero pour la production de vaccins destinés à l’humain. Par exemple, une étude notable publiée en 2019 a démontré l’utilisation des cellules Vero dans le développement d’un vaccin inactivé contre le virus de la fièvre jaune [2].

Les cellules Vero sont couramment utilisées dans les études sur les infections virales, comme une étude menée en 2020 qui a infecté des cellules Vero avec différents isolats du virus SARS-CoV-2 afin d’étudier les propriétés de croissance du virus [4]. De même, une autre étude a examiné les réponses cellulaires à l’infection par le SARS-CoV-2 à l’aide d’une culture de cellules Vero [5].

Le rôle des cellules Vero dans l’ingénierie tissulaire et le développement des bioprocédés en amont

Au-delà de la production de vaccins, les cellules Vero contribuent à l’ingénierie tissulaire et au domaine plus large du développement des bioprocédés, ce qui souligne la nécessité de poursuivre la recherche sur leurs propriétés et leurs applications. Le choix de sous-lignées de cellules Vero appropriées est essentiel pour maximiser leur potentiel dans les industries biotechnologique et pharmaceutique.

Utilisation des cellules Vero dans les essais d’efficacité et d’innocuité des médicaments

Les cellules Vero sont fréquemment utilisées dans les essais de médicaments pour évaluer l’efficacité et l’innocuité des composés pharmaceutiques. Ces cellules sont souvent considérées comme un modèle standard de cellules rénales normales dans les études portant sur les effets cytotoxiques de divers médicaments et agents thérapeutiques. Par exemple, une étude comparant l’impact d’extraits de racines de la plante Terminalia avicennioides sur la lignée cellulaire HepG2 (cellules cancéreuses du foie) et sur des cellules Vero, dérivées de l’épithélium rénal de singe, a révélé que les extraits étaient plus nocifs pour les cellules cancéreuses que pour les cellules saines.

Limites des cellules Vero

Bien que les cellules Vero soient largement utilisées, elles présentent certaines limites, telles que la production de toxines Vero et des altérations génomiques pouvant avoir une incidence sur certaines applications. Il est essentiel de bien comprendre les sous-lignées spécifiques et les caractéristiques génomiques des cellules Vero, y compris la lignée Vero F6, afin d’optimiser leur utilisation dans divers bioprocédés.

545,10 CAD$*

Contenu : 1.5 milliliter

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial
Numéro de produit : 605372

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Vero E6 Cells
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Publications de recherche

Voici quelques publications de recherche récentes et parmi les plus citées portant sur les cellules Vero.

Adaptation des cellules Vero à la culture en suspension pour la production du virus de la rage dans différents milieux sans sérum

Cette étude, publiée dans le Vaccine Journal (2019), a permis d’adapter les cellules Vero à la culture en suspension afin de produire le virus de la rage à un titre élevé à l’aide de divers milieux sans sérum.

Sensibilité de Toxoplasma gondii à l’extrait éthanolique de Tinospora crispa dans des cellules Vero

Cet article a été publié dans la revue *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* en 2019. L’étude a suggéré que l’extrait éthanolique de la plante Tinospora crispa exerce un effet néfaste sur le parasite Toxoplasma gondii. Il est toutefois sans danger pour les cellules hôtes (la lignée cellulaire Vero).

Effets de l’extrait de feuilles de Colchicum baytopiorum sur la cytotoxicité et les voies de mort cellulaire dans les lignées cellulaires C-4 I et Vero

Cet article a été publié par le Journal de l’Union balkanique d’oncologie en 2021. Dans cette étude, Ozlem Dagdeviren Ozsoylemez et Gul Ozcan ont exploré l’effet cytotoxique de l’extrait de feuilles de Colchicum baytopiorum sur les lignées cellulaires C-4I et Vero.

Le resvératrol inhibe la réplication du coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SARS-CoV-2) dans des cellules Vero en culture

Cette étude, publiée dans *Phytotherapy Research* (2021), a utilisé des cellules Vero infectées par le SARS-CoV-2 pour étudier l’effet thérapeutique du resvératrol sur la réplication virale.

Les statines lipophiles inhibent la production du virus Zika dans les cellules Vero

Cet article publié dans *Nature Scientific Reports* (2019) suggère que les statines lipophiles, à savoir la cérivastatine, la lovastatine, la fuvastatine, la simvastatine et la mévastatine, peuvent entraver la production du virus Zika dans les cellules Vero.

Ressources sur les cellules Vero : protocoles, vidéos et plus encore

Protocoles de culture cellulaire

Foire aux questions sur les cellules Vero

Les cellules Vero constituent une lignée cellulaire dérivée des cellules rénales du singe vert d’Afrique. Elles sont largement utilisées dans les bioprocédés de production de vaccins en raison de leur capacité à se développer facilement en culture et à produire en toute sécurité divers virus destinés à la fabrication de vaccins.
Une banque de cellules Vero est un ensemble de cellules dont la pureté et l’innocuité ont été minutieusement vérifiées. Ces cellules sont entreposées et utilisées comme matière première homogène pour la production de vaccins, ce qui garantit la normalisation et l’évolutivité du processus de fabrication.
Le vaccin contre l’encéphalite japonaise protège contre le virus de l’encéphalite japonaise, qui est cultivé dans des cultures cellulaires, souvent à partir de cellules Vero, afin de produire le vaccin. Le virus est ensuite inactivé ou atténué, puis purifié pour obtenir le vaccin.
Le vaccin cellulaire contre la rage est produit en cultivant le virus de la rage dans des cellules de culture, en inactivant le virus, puis en l'utilisant pour stimuler le système immunitaire afin de le protéger contre l'infection par la rage.
Le séquençage du génome consiste à déterminer la séquence complète de l'ADN du génome d'un organisme. Dans le contexte des maladies virales, il permet d'identifier le matériel génétique du virus, de comprendre ses mutations et de mettre au point des traitements ciblés ou des vaccins.
La perte d’hétérozygotie dans les cellules en culture désigne la réduction de la diversité génétique qui survient lorsque les deux copies d’un chromosome deviennent identiques à un emplacement précis, à la suite de mutations ou de délétions. Ce phénomène peut avoir une incidence sur les caractéristiques de la cellule, notamment ses schémas de croissance et sa réponse aux virus.
Les vecteurs viraux sont des outils couramment utilisés par les biologistes moléculaires pour introduire du matériel génétique dans les cellules. Ce processus peut être mis en œuvre à diverses fins, notamment pour étudier la fonction des gènes, traiter des maladies génétiques ou mettre au point des vaccins.
L'isolement viral consiste à isoler un échantillon viral pur à partir d'un échantillon clinique. Il s'agit d'une étape cruciale pour identifier le virus responsable d'une infection et mettre au point des vaccins ou des traitements adaptés.
Le développement de bioprocédés désigne la conception, la mise au point et la mise en œuvre de procédés impliquant l'utilisation de cellules vivantes ou de leurs composants afin d'obtenir les produits souhaités, tels que des vaccins ou des protéines thérapeutiques.
L'ingénierie tissulaire permet de créer des modèles tissulaires en 3D qui reproduisent la structure et la fonction des tissus in vivo, ce qui permet d'évaluer l'efficacité et l'innocuité des vaccins dans un environnement contrôlé qui ressemble étroitement au contexte naturel d'une infection.
Le virus de la rubéole est l'agent pathogène responsable de la rubéole, également appelée « rougeole allemande ». Les recherches sur ce virus font souvent appel aux cellules Vero, une lignée cellulaire dérivée de cellules rénales de singes verts d’Afrique, en raison de leur grande efficacité dans la réplication virale. Ces cellules offrent un environnement contrôlé permettant d’étudier les caractéristiques du virus et de mettre au point des vaccins.
On entend par « suspension de cellules Vero » des cellules Vero qui ont été cultivées dans un milieu liquide. Ce type de culture cellulaire est essentiel à la recherche virologique, car il permet la production de virus à grande échelle et facilite des processus tels que les études sur la cinétique de l’infection, le développement de vaccins et les essais de toxicité.

Les sous-lignées de cellules Vero sont des souches spécialisées issues de la lignée cellulaire Vero d’origine, chacune présentant des caractéristiques uniques adaptées à différents besoins de recherche. En voici quelques exemples :

  • Vero 76 : adaptée à la croissance en suspension, utilisée dans la production de vaccins.
  • Vero E6 : très sensible au virus Ebola, utilisée dans la recherche sur les fièvres hémorragiques.
L'immortalisation des cellules Vero signifie qu'elles ont été modifiées pour se multiplier indéfiniment. Cela revêt une grande importance dans le domaine de la recherche, car cela garantit un approvisionnement continu et uniforme en cellules pouvant être utilisées pour des expériences sans la variabilité liée au vieillissement cellulaire, ce qui améliore ainsi la reproductibilité des résultats expérimentaux.

Références

  1. Ammerman, N.C., M. Beier-Sexton et A.F. Azad, « Croissance et entretien des lignées cellulaires Vero ». Current protocols in microbiology, 2008. 11(1) : p. A. 4E. 1–A. 4E. 7.
  2. Pato, T.P., et al., Purification du virus de la fièvre jaune produit dans des cellules Vero pour la fabrication d’un vaccin inactivé. Vaccine, 2019. 37(24) : p. 3214–3220.
  3. Aliyu-Amoo, H., et al., Effet antiprolifératif des extraits et des fractions de la racine de Terminalia avicennioides (Combretaceae) Guill. et Perr. sur les lignées cellulaires HepG2 et Vero. Clinical Phytoscience, 2021, 7(1) : p. 1–7.
  4. Yao, P., et al., Isolement et caractéristiques de croissance du SARS-CoV-2 dans les cellules Vero. Virologica Sinica, 2020. 35(3) : p. 348–350.
  5. Park, B.K., et al., Signalisation différentielle et production virale dans les cellules Calu-3 et les cellules Vero lors d’une infection par le SARS-CoV-2. Biomolecules & Therapeutics, 2021. 29(3) : p. 273.
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